| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩写词 | 第16-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-19页 |
| 第2章 综述 | 第19-31页 |
| 2.1 小梁网的氧化应激 | 第19-27页 |
| 2.1.1 背景 | 第19页 |
| 2.1.2 氧化应激(Oxidative stress) | 第19-20页 |
| 2.1.3 小梁网活性氧的来源 | 第20-24页 |
| 2.1.4 小梁网的氧化损伤 | 第24-26页 |
| 2.1.5 小梁网的抗氧化系统 | 第26-27页 |
| 2.2 氧化应激在小梁网细胞的研究进展 | 第27-31页 |
| 2.2.1 氧化应激在小梁网体内/体外的研究 | 第27-29页 |
| 2.2.2 抗氧化治疗青光眼的研究情况 | 第29-30页 |
| 2.2.3 结论与展望 | 第30-31页 |
| 第3章 CLC-2在HTM上的表达 | 第31-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第31-32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32-34页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 HTM细胞培养 | 第35页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第35页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第35-36页 |
| 3.2.4 细胞计数 | 第36页 |
| 3.2.5 qRT-PCR方法检测ClC-2mRNA在HTM细胞上的表达 | 第36-38页 |
| 3.2.6 细胞免疫荧光法检测ClC-2蛋白在HTM细胞上的表达 | 第38-39页 |
| 3.2.7 Western blot法检测ClC-2蛋白在HTM细胞上的表达 | 第39-40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-41页 |
| 3.3.1 qRT-PCR法检测ClC-2 mRNA在HTM细胞上的表达 | 第40页 |
| 3.3.2 Western blot法检测ClC-2蛋白在HTM细胞上的表达 | 第40-41页 |
| 3.3.3 细胞免疫荧光法检测ClC-2在HTM细胞上的表达及定位 | 第41页 |
| 3.4 小结 | 第41-43页 |
| 第4章 H202诱导小梁细胞氧化损伤 | 第43-51页 |
| 4.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 CCK-8法检测浓度梯度H2O2对HTM细胞活性的影响 | 第44页 |
| 4.2.2 流式细胞仪检测H_2O_2对HTM细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 4.2.3 流式细胞仪检测H_2O_2对HTM细胞内ROS的影响 | 第45页 |
| 4.2.4 荧光显微镜检测H_2O_2对HTM细胞线粒体膜电位的影响 | 第45-46页 |
| 4.2.5 统计学处理 | 第46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-49页 |
| 4.3.1 CCK-8法检测浓度梯度H_2O_2对HTM细胞活性的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.2 流式细胞仪检测H_2O_2诱导HTM细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 4.3.3 流式细胞仪检测H_2O_2对HTM细胞内活性氧含量的影响 | 第48页 |
| 4.3.4 荧光显微镜检测H_2O_2对HTM线粒体活性的影响 | 第48-49页 |
| 4.4 小结 | 第49-51页 |
| 第5章 增强CLC-2表达对HTM细胞氧化损伤的影响 | 第51-61页 |
| 5.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第51-52页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 5.2.1 慢病毒介导的CLC-2基因表达载体(LV6-CLC-2)及其对照病毒载体(LV5-NC)的构建 | 第52页 |
| 5.2.2 ClC-2慢病毒载体感染HTM细胞 | 第52-53页 |
| 5.2.3 qRT-PCR方法检测各组细胞转染效果 | 第53页 |
| 5.2.4 Western blot方法检测各组转染效果 | 第53页 |
| 5.2.5 CCK-8法检测各组细胞的存活率 | 第53-54页 |
| 5.2.6 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第54页 |
| 5.2.7 流式细胞仪检测各组细胞内ROS | 第54页 |
| 5.2.8 荧光显微镜下检测各组细胞内线粒体膜电位 | 第54页 |
| 5.2.9 统计学处理 | 第54页 |
| 5.3 实验结果 | 第54-60页 |
| 5.3.1 ClC-2慢病毒载体转染HTM细胞最适滴度的测定 | 第54-55页 |
| 5.3.2 qRT-PCR方法检测各组细胞ClC-2 mRNA表达 | 第55-56页 |
| 5.3.3 Western bolt方法检测各组细胞ClC-2蛋白表达 | 第56页 |
| 5.3.4 CCK-8法检测各组细胞的存活率 | 第56-57页 |
| 5.3.5 流式细胞仪检测各组细胞的存活率 | 第57-58页 |
| 5.3.6 流式细胞仪检测各组细胞内ROS变化 | 第58-59页 |
| 5.3.7 荧光显微镜检测各组细胞线粒体膜电位变化 | 第59-60页 |
| 5.4 小结 | 第60-61页 |
| 第6章 抑制CLC-2表达对HTM细胞氧化损伤的影响 | 第61-71页 |
| 6.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第61页 |
| 6.1.2 主要仪器设备 | 第61-62页 |
| 6.2 实验方法 | 第62-64页 |
| 6.2.1 RNAi抑制HTM内ClC-2的表达 | 第62页 |
| 6.2.2 荧光显微镜检查各组转染效率 | 第62页 |
| 6.2.3 qRT-PCR方法检测各组细胞ClC-2mRNA的表达 | 第62-63页 |
| 6.2.4 Western blot方法检测各组细胞ClC-2蛋白的表达 | 第63页 |
| 6.2.5 CCK-8法检测各组细胞的存活率 | 第63页 |
| 6.2.6 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第63页 |
| 6.2.7 流式细胞仪检测各组细胞内ROS | 第63页 |
| 6.2.8 荧光显微镜下检测各组细胞内线粒体膜电位 | 第63页 |
| 6.2.9 统计学处理 | 第63-64页 |
| 6.3 实验结果 | 第64-69页 |
| 6.3.1 荧光显微镜检测各组细胞转染效率 | 第64页 |
| 6.3.2 qRT-PCR方法检测各组细胞ClC-2 mRNA表达 | 第64-65页 |
| 6.3.3 Western blot方法检测各组细胞ClC-2蛋白的表达 | 第65页 |
| 6.3.4 CCK-8法检测各组细胞的存活率 | 第65-66页 |
| 6.3.5 流式细胞仪检测各组细胞的存活率 | 第66-67页 |
| 6.3.6 流式细胞仪检测各组细胞内ROS变化 | 第67-68页 |
| 6.3.7 荧光显微镜检测各组细胞线粒体膜电位变化 | 第68-69页 |
| 6.4 小结 | 第69-71页 |
| 第7章 CLC-2对H2O2诱导HTM细胞凋亡分子机制研究 | 第71-77页 |
| 7.1 实验材料 | 第71-72页 |
| 7.1.1 主要试剂 | 第71-72页 |
| 7.1.2 主要仪器设备 | 第72页 |
| 7.1.3 实验分组 | 第72页 |
| 7.2 实验方法 | 第72页 |
| 7.2.1 Western blot方法检测各组细胞Bcl-2蛋白的表达 | 第72页 |
| 7.2.2 Western blot方法检测各组细胞Bax蛋白的表达 | 第72页 |
| 7.2.3 Western blot方法检测各组细胞caspase-3蛋白表达 | 第72页 |
| 7.3 统计学处理 | 第72-73页 |
| 7.4 实验结果 | 第73-75页 |
| 7.4.1 Western blot方法检测各组细胞Bcl-2蛋白的表达 | 第73-74页 |
| 7.4.2 Western blot方法检测各组细胞Bax蛋白的表达 | 第74-75页 |
| 7.4.3 Western blot方法检测各组细胞活化Caspase-3蛋白的表达 | 第75页 |
| 7.5 小结 | 第75-77页 |
| 第8章 讨论 | 第77-85页 |
| 第9章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-101页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
