| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-25页 |
| ·Whirly蛋白研究进展 | 第12-16页 |
| ·Whirly蛋白结构的进化 | 第12-13页 |
| ·Whirly蛋白的分布 | 第13-14页 |
| ·Whirly蛋白的功能 | 第14-15页 |
| ·Whirly蛋白作用机制 | 第15-16页 |
| ·低温胁迫对植物的影响 | 第16-20页 |
| ·低温胁迫对生物膜系统的影响 | 第17页 |
| ·低温胁迫对抗氧化系统的影响 | 第17-18页 |
| ·低温胁迫对植物基因表达调控的影响 | 第18-20页 |
| ·高通量转录组测序 | 第20-24页 |
| ·高通量转录组测序的基本原理 | 第20页 |
| ·高通量转录组测序的实验流程 | 第20-21页 |
| ·高通量转录组测序的发展应用 | 第21-24页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-40页 |
| ·试验材料与处理 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·材料处理 | 第25页 |
| ·菌株与载体 | 第25页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第25-26页 |
| ·PCR引物 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-40页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第26-27页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第27页 |
| ·番茄LeWhy1基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·目的片段的回收 | 第28-29页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第30页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·LeWhy1的亚细胞定位 | 第31-34页 |
| ·真核表达载体的构建及番茄转化 | 第34-36页 |
| ·转基因番茄植株的检测 | 第36-37页 |
| ·转基因番茄生理指标的测定 | 第37-38页 |
| ·转基因番茄转录组测序 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-65页 |
| ·LeWhy1基因的分离及其特征 | 第40-45页 |
| ·LeWhy1基因全长cDNA序列的克隆 | 第40页 |
| ·LeWhy1基因的序列分析及其编码的蛋白质序列分析 | 第40-42页 |
| ·Le Why1的亚细胞定位的软件预测 | 第42-43页 |
| ·Le Why1-GFP融合蛋白的亚细胞定位分析 | 第43-45页 |
| ·LeWhy1基因在番茄中的表达分析 | 第45-47页 |
| ·LeWhy1基因在番茄不同器官中的表达 | 第45页 |
| ·LeWhy1基因受低温诱导表达 | 第45-46页 |
| ·LeWhy1基因在逆境胁迫及信号物质下的表达分析 | 第46-47页 |
| ·LeWhy1基因在番茄中的遗传转化 | 第47-49页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第47页 |
| ·转LeWhy1基因植株的鉴定 | 第47-49页 |
| ·过表达LeWhy1基因提高了番茄植株的耐冷性 | 第49-51页 |
| ·过表达LeWhy1提高了低温胁迫下生物膜的稳定性 | 第49页 |
| ·过表达LeWhy1降低了O2??和H2O2的积累 | 第49-50页 |
| ·低温处理对转基因番茄CAT、APX和POD活性的影响 | 第50-51页 |
| ·高通量转录组测序分析 | 第51-65页 |
| ·基因表达分析 | 第52-53页 |
| ·差异表达基因的数据库注释 | 第53-56页 |
| ·高通量转录组测序库中差异表达基因的筛选 | 第56-62页 |
| ·新基因分析 | 第62-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| ·LeWhy1基因编码一个细胞核、叶绿体双定位的Whirly蛋白 | 第65-66页 |
| ·过表达LeWhy1提高了番茄的低温抗性 | 第66页 |
| ·低温胁迫对番茄基因的调控 | 第66-67页 |
| ·过表达LeWhy1对番茄基因的调控 | 第67-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第79页 |
