摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
1 前言 | 第8-20页 |
·莱茵衣藻 | 第8-10页 |
·莱茵衣藻的结构 | 第8页 |
·莱茵衣藻生活史 | 第8-9页 |
·莱茵衣藻作为实验载体的优势 | 第9-10页 |
·纤毛 | 第10-12页 |
·纤毛的结构 | 第10页 |
·纤毛的分类 | 第10-11页 |
·纤毛的功能 | 第11-12页 |
·纤毛病 | 第12页 |
·纤毛运送蛋白(IFT) | 第12-15页 |
·IFT的发现 | 第12页 |
·IFT的组成 | 第12-13页 |
·IFT的运动机制 | 第13-15页 |
·RNA干扰 | 第15-17页 |
·RNA干扰载体构建的方法 | 第16页 |
·RNA干扰载体构建的特征 | 第16-17页 |
·莱茵衣藻核转化 | 第17-18页 |
·基因枪法 | 第17页 |
·玻璃珠法 | 第17页 |
·电击法 | 第17-18页 |
·本实验的研究意义及研究内容 | 第18-20页 |
·研究的背景和意义 | 第18-19页 |
·主要内容 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-42页 |
·实验材料 | 第20-28页 |
·藻种,菌种,质粒及引物 | 第20-21页 |
·主要药品 | 第21-23页 |
·仪器与设备 | 第23-24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·标准溶液的配制 | 第25-28页 |
·实验方法 | 第28-42页 |
·生物信息学在线分析及软件应用 | 第28-29页 |
·体外相互作用 | 第29-36页 |
·体内相互作用 | 第36-42页 |
3 结果与讨论 | 第42-61页 |
·莱茵衣藻基因ift25与ift27生物信息学分析 | 第42-49页 |
·蛋白序列同源性分析 | 第42-43页 |
·蛋白理化性质与结构分析 | 第43-49页 |
·IFT25与IFT27体外相互作用研究 | 第49-55页 |
·大肠杆菌表达载体pGEX-2T-IFT25,pMAL-C2H-IFT27的构建 | 第49-50页 |
·重组质粒pGEX2T-IFT25,pMAL-C2H-IFT27的双切验证 | 第50-51页 |
·转化菌株载体导入验证 | 第51页 |
·IFT25和IFT27在蛋白水平的相互作用 | 第51-55页 |
·IFT25与IFT27体内相互作用研究 | 第55-61页 |
·莱茵衣藻人工干扰载体的构建(以pChlamyRNA3int-IFT25为例) | 第55页 |
·pChlamyRNA3int-IF25及pChlamyRNA3int-IFT27的测序验证 | 第55-56页 |
·莱茵衣藻生长曲线测定 | 第56-57页 |
·莱茵衣藻核转化 | 第57页 |
·抗性藻种的筛选 | 第57-58页 |
·IFT25与IFT27在转录水平的关系 | 第58-59页 |
·IFT25与IFT27在蛋白水平的关系 | 第59-61页 |
4 结论 | 第61-62页 |
·莱茵衣藻IFT25与IFT27蛋白序列分析 | 第61页 |
·体外相互作用 | 第61页 |
·体内相互作用 | 第61-62页 |
5 展望 | 第62-63页 |
6 参考文献 | 第63-68页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第68-69页 |
8 致谢 | 第69-70页 |
附录 | 第70页 |