| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论(细胞自噬系统在脂类代谢与辐射生物学中的研究进展) | 第11-41页 |
| ·自噬系统概述 | 第11-20页 |
| ·自噬系统与脂质系统的关系 | 第20-26页 |
| ·脂质的分解与储存 | 第20-23页 |
| ·一条特殊的脂质分解途径一脂质自噬 | 第23-24页 |
| ·蛋白质糖基化 | 第24-25页 |
| ·seipin基因突变与脂代谢疾病 | 第25-26页 |
| ·细胞自噬参与脂滴代谢 | 第26页 |
| ·自噬系统与辐射之间的关系 | 第26-41页 |
| ·辐射旁效应 | 第26-29页 |
| ·细胞缝隙连接组成分子connexin43的结构功能介绍 | 第29-32页 |
| ·细胞内的氧化还原状态(redox state)介绍 | 第32-36页 |
| ·细胞内氧化还原状态与胞浆激酶活化之间的关系 | 第36-37页 |
| ·辐射损伤信号在细胞间以及组织间的传递 | 第37页 |
| ·细胞间缝隙连接与辐射旁效应 | 第37-38页 |
| ·细胞缝隙连接分子与细胞自噬 | 第38-39页 |
| ·辐射诱发的ROS与细胞自噬以及细胞缝隙链接分子connexin43之间的关系 | 第39页 |
| ·细胞内氧化还原状态(ROS)与Src激酶之间的关系 | 第39页 |
| ·src激酶通路与connexin43之间的关系 | 第39页 |
| ·辐射自噬通路的激活机制 | 第39-41页 |
| 第二章 突变seipin通过诱导异常脂滴的形成激活自噬 | 第41-60页 |
| ·实验材料和方法 | 第42-49页 |
| ·质粒构建与试剂 | 第42页 |
| ·细胞培养和转染 | 第42-43页 |
| ·免疫细胞化学和尼罗红染色 | 第43-44页 |
| ·免疫印迹实验与抗体 | 第44-48页 |
| ·流式细胞术 | 第48页 |
| ·数据统计分析 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-58页 |
| ·seipin和LC3的胞内共定位 | 第49-50页 |
| ·过表达seipin突变体(N88S和S90L)改变自噬体标记物GFP-LC3在亚细胞内的分布样式 | 第50-51页 |
| ·突变的seipin影响脂滴的形态 | 第51-53页 |
| ·自噬抑制剂3-MA易化突变的seipin诱导的异常空泡的融合过程 | 第53-55页 |
| ·蛋白质糖基化抑制剂Tunicamycin能模拟seipin突变体的效应 | 第55-56页 |
| ·seipin突变体以去糖基化依赖方式诱导自噬 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 调节自噬系统对辐射旁效应的影响 | 第60-85页 |
| ·实验材料和方法 | 第61-66页 |
| ·α粒子发射装置 | 第61页 |
| ·质粒和试剂 | 第61-62页 |
| ·细胞培养和转染 | 第62-63页 |
| ·实时定量PCR | 第63-65页 |
| ·蛋白印迹实验与抗体 | 第65页 |
| ·流式细胞术 | 第65-66页 |
| ·活性氧产物检测 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-81页 |
| ·细胞辐射自噬发生的剂量相关性 | 第66-67页 |
| ·α-粒子辐照对胞内ROS水平和src激酶磷酸化的影响 | 第67-68页 |
| ·ROS淬灭剂DMSO部分逆转高低剂量诱导的src激酶活性变化 | 第68-69页 |
| ·自噬诱导剂rampamycin使细胞死亡率减少 | 第69-70页 |
| ·细胞自噬在受照射细胞和旁区细胞中均被诱导 | 第70-74页 |
| ·自噬系统的底物connexin43被src激酶通路调控 | 第74-76页 |
| ·connexin43在旁细胞的自噬诱导过程中是必需的 | 第76-80页 |
| ·高剂量辐照下自噬诱导剂rapamycin能降低辐照区和旁区细胞内的凋亡 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-85页 |
| 第四章 总结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与参加的学术会议 | 第99页 |
