| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 脱落酸RCAR1/PYR1/PYL受体的介绍 | 第13-29页 |
| ·脱落酸(ABA)受体的发现 | 第13-17页 |
| ·花期控制蛋白A(FCA) | 第13-14页 |
| ·叶绿体的镁离子螫合酶H亚基(ChIH) | 第14页 |
| ·G蛋白偶联受体类(GCR2>G1>G2) | 第14-15页 |
| ·ABA受体调节元件/pyrabactin抵抗蛋白/pyrabactin抵抗类似蛋白(RCAR1/PYR/PYL) | 第15-17页 |
| ·RCAR/PYR/PYL介导的ABA信号通路简介 | 第17-24页 |
| ·信号通路核心 | 第17-18页 |
| ·PYLs介导的ABA信号通路的主要功能 | 第18-20页 |
| ·PYLs结构与功能的研究 | 第20-21页 |
| ·ABA与PYLs的结合抑制PP2Cs的机制研究现状 | 第21-24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| 第二章 基于液体NMR自旋弛豫的蛋白质动力学分析 | 第29-41页 |
| ·概述 | 第29页 |
| ·液体核磁共振研究蛋白质动力学的方法 | 第29-34页 |
| ·弛豫时间(T_1,T_2)和异核NOEs的测量 | 第29-30页 |
| ·谱密度函数 | 第30页 |
| ·Model-Free方法 | 第30-31页 |
| ·蛋白质侧链动力学 | 第31-32页 |
| ·化学交换 | 第32-33页 |
| ·CPMG弛豫色散 | 第33-34页 |
| ·射频场中的演化：R_(1ρ)弛豫 | 第34页 |
| ·热力学原理在蛋白质动力学中的应用 | 第34-36页 |
| ·总结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 第三章 PYL10对PP2C的磷酸酶活性的抑制依赖ABA的作用 | 第41-57页 |
| ·前言 | 第41页 |
| ·钼酸盐方法定量检测蛋白质磷酸酶的活性 | 第41-42页 |
| ·实验材料与方法 | 第42-47页 |
| ·重组蛋白表达载体的构建 | 第42-45页 |
| ·PYL10,PYL2-wt,PYL2-m与HAB1_(172-511)的过表达及纯化 | 第45-47页 |
| ·“钼蓝”法测量PP2C磷酸酶活性 | 第47页 |
| ·等温滴定量热法(ITC)分析 | 第47页 |
| ·结果和讨论 | 第47-55页 |
| ·PYL10、PYL2-wt、PYL2-m以及HAB1_(172-511)蛋白质的纯化 | 第48-50页 |
| ·PYL10对PP2C的抑制作用可能不受渗透压的直接影响 | 第50-51页 |
| ·PYL10对PP2C的抑制作用可以同时被ABA和BSA增强 | 第51-53页 |
| ·ABA与PYL10的结合伴随着焓减 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第四章 ABA结合前后PYL10的动力学变化 | 第57-73页 |
| ·前言 | 第57页 |
| ·实验材料与方法 | 第57-59页 |
| ·用于NMR实验的PYL10的表达与纯化 | 第57-58页 |
| ·NMR三维实验和主链归属 | 第58-59页 |
| ·主链弛豫测量 | 第59页 |
| ·ABA滴定实验 | 第59页 |
| ·结果和讨论 | 第59-68页 |
| ·PYL10在有无ABA存在下的液体核磁共振的主链归属 | 第59-60页 |
| ·ABA/PYL10在纳秒尺度上的柔性比apo-PYL10大 | 第60-64页 |
| ·约化谱密度函数J(0)在apo-PYL10和ABA/PYL10结构上的映射 | 第64-65页 |
| ·ABA滴定过程中PYL10的构象交换 | 第65-68页 |
| ·总结和展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第五章 运用Label-Free质谱定量分析大肠杆菌酪氨酸激酶ETK催化结构域的磷酸化变化 | 第73-99页 |
| ·背景介绍 | 第73-81页 |
| ·细菌酪氨酸激酶的介绍 | 第73-74页 |
| ·大肠杆菌K12酪氨酸激酶(ETK)的研究现状 | 第74-77页 |
| ·基于质谱的蛋白质组学的定量检测方法 | 第77-81页 |
| ·实验材料和方法 | 第81-85页 |
| ·实验仪器及质粒来源 | 第81页 |
| ·ETK-CTD和蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)蛋白的表达纯化 | 第81-82页 |
| ·免疫印迹(western-blot)检测 | 第82页 |
| ·体外激酶活性实验及检测 | 第82-83页 |
| ·质谱检测以及数据分析 | 第83-85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-94页 |
| ·ETK-CTD和PTP1B蛋白质的纯化 | 第85-86页 |
| ·体外磷酸化实验以及质谱样品的制备 | 第86-87页 |
| ·液相串联质谱(LC-MS/MS)能检测的胰蛋白酶酶切的ETK-CTD肽段 | 第87-88页 |
| ·LC-MS/MS检测ETK-CTD的磷酸化肽段 | 第88-90页 |
| ·定量分析ETK-CTD中Tyr574位点磷酸化水平的变化 | 第90-92页 |
| ·用western-blot检测ETK-CTD的总体磷酸化变化 | 第92-94页 |
| ·讨论和总结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-99页 |
| 第六章 植物内向整流钾离子通道KAT1的功能研究初探 | 第99-111页 |
| ·背景介绍 | 第99-103页 |
| ·植物钾离子通道的分类 | 第99-100页 |
| ·KAT1的研究现状 | 第100-103页 |
| ·实验材料和方法 | 第103-105页 |
| ·重组质粒的构建 | 第103-104页 |
| ·细胞转染和电生理记录 | 第104-105页 |
| ·实验结果和讨论 | 第105-108页 |
| 参考文献 | 第108-111页 |
| 附录1 培养基的配制 | 第111-112页 |
| 附录2 缓冲溶液的配制 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
