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猪的转腺苷一磷酸脱氨酶1基因细胞系的制备

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
1 引言第10-22页
   ·动物肉质风味研究第10-12页
     ·肉质风味的研究进展第10页
     ·肌苷酸作为风味物质的研究进展第10-11页
     ·肉质性状相关候选基因的研究进展第11-12页
   ·AMPD1 基因概况第12-15页
     ·AMPD1 基因的表达研究第12页
     ·AMPD1 基因的结构与特性第12-13页
     ·AMPD1 基因的功能第13-14页
     ·AMPD1 基因的研究进展与应用前景第14-15页
   ·转基因细胞系的制备第15-20页
     ·外源基因导入受体细胞方法第15-16页
     ·转染细胞的筛选方法第16-17页
     ·转基因猪的研究进展及应用前景第17-20页
   ·本研究的目的和意义第20-22页
2 材料与方法第22-36页
   ·实验材料第22-24页
     ·主要器材第22-23页
     ·主要药品及配制第23-24页
     ·DNA 分析软件与网址第24页
   ·实验方法第24-36页
     ·猪AMPD1 基因cDNA 的克隆测序第24-28页
     ·真核表达载体pcDNA3.1(+)-AMPD1 的构建.第28-29页
     ·猪成纤维细胞与PK15 细胞体外培养第29-30页
     ·转染用质粒的准备第30-31页
     ·G418 最适筛选浓度的选择与转染条件的优化第31-32页
     ·转染第32页
     ·阳性细胞的筛选第32-36页
3 结果与分析第36-46页
   ·猪AMPD1 基因完整CDS 区的克隆测序第36-37页
     ·重组克隆质粒PMD18-T-AMPD1 的构建第36页
     ·猪AMPD1 基因序列的测定第36-37页
   ·pcDNA3.1-AMPD1 质粒的构建和鉴定第37页
   ·细胞培养的结果第37-39页
     ·细胞的冻存和复苏第37-38页
     ·猪成纤维细胞和PK15 细胞的生长曲线第38-39页
   ·转染的结果第39-45页
     ·G418 浓度筛选的结果第39-41页
     ·细胞转染结果第41-45页
   ·阳性细胞PCR 检测结果第45-46页
4 讨论第46-48页
   ·猪AMPD1 基因的克隆测序第46页
   ·G418 筛选浓度的选择第46-47页
   ·细胞培养的体系和方法第47页
   ·转染第47页
   ·关于阳性细胞的鉴定第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-53页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第53页

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