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民猪脂蛋白脂酶基因真核表达载体的构建及其调控关系研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第10-17页
   ·我国猪肉质研究的历史第10-11页
   ·影响猪肉质性状基因的研究进展第11-13页
     ·影响猪肉质性状的主效基因第11-12页
     ·影响猪肉质性状的侯选基因第12-13页
   ·LPL 基因的国内外研究进展第13-16页
     ·LPL 基因的分子结构第13-14页
     ·LPL 基因的生物功能第14-15页
     ·LPL 基因的克隆及染色体定位第15页
     ·LPL 基因与脂肪性状的关系第15-16页
   ·本研究的目的意义及主要内容第16-17页
2 材料与方法第17-31页
   ·实验材料第17-19页
     ·实验动物第17页
     ·菌株和克隆表达载体第17页
     ·主要仪器设备第17-18页
     ·主要药品及试剂第18-19页
     ·工具酶及试剂盒第19页
     ·主要分子生物学软件第19页
     ·相关生物信息学网站第19页
   ·实验方法第19-31页
     ·引物设计与合成第19-20页
     ·LPL 基因CDS 的克隆与测序第20-23页
     ·LPL 基因真核表达载体的构建第23-25页
     ·转染用质粒的制备第25-27页
     ·PK-15 细胞转染实验第27-28页
     ·LPL 基因在PK-15 细胞转录水平上的表达检测第28-31页
3 结果与分析第31-37页
   ·LPL 基因CDNA 的TA 克隆第31-32页
     ·总RNA 质量检测第31页
     ·LPL 基因编码区的RT-PCR 扩增第31页
     ·重组克隆质粒PMD18-T-LPL 的酶切鉴定第31-32页
     ·LPL 基因测序鉴定第32页
   ·pcDNA3.1-LPL 真核表达载体的构建第32-34页
     ·LPL 基因的获得第32页
     ·pcDNA3.1 质粒的酶切处理及回收第32-33页
     ·重组质粒pcDNA3.1(+)-LPL 的酶切鉴定第33页
     ·重组质粒pcDNA3.1(+)-LPL 的序列测定第33-34页
     ·转染用质粒的制备第34页
   ·PK-15 细胞培养及pcDNA3.1-LPL 重组质粒的转染第34-35页
     ·PK-15 细胞培养及转染效果第34页
     ·G418 筛选浓度的确立第34-35页
     ·LPL 基因超表达效果检测第35页
   ·外源基因基因表达量的检测第35-37页
4 讨论第37-39页
   ·用于克隆目的基因的引物第37页
   ·LPL 与载体的连接第37页
   ·外源基因表达的检测第37-39页
5 结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-45页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第45页

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