小反刍兽疫及口蹄疫病毒抗原基因重组山羊痘病毒活载体疫苗的研究
| 博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-33页 |
| ·小反刍兽疫疫苗研究进展 | 第14-21页 |
| ·PPR 简介 | 第14-15页 |
| ·PPR 弱毒疫苗 | 第15-19页 |
| ·重组标记疫苗 | 第19-20页 |
| ·小结与展望 | 第20-21页 |
| ·口蹄疫疫苗研究进展 | 第21-25页 |
| ·口蹄疫简介 | 第21页 |
| ·灭活抗原疫苗 | 第21-22页 |
| ·新型分子疫苗 | 第22-24页 |
| ·基础研究在合理设计 FMD 疫苗中的作用 | 第24-25页 |
| ·羊痘病毒研究进展 | 第25-32页 |
| ·羊痘简介 | 第25-26页 |
| ·羊痘病毒基因组研究进展 | 第26-27页 |
| ·羊痘疫苗研究进展 | 第27-30页 |
| ·羊痘病毒活载体研究进展 | 第30-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 重组转移载体的设计、构建与功能验证 | 第33-44页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·材料与试剂 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的设计 | 第34页 |
| ·重组质粒的构建 | 第34-37页 |
| ·启动子 p11 和 p7.5 功能的验证 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·目的片段 PCR 结果 | 第37-38页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第38-41页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第41页 |
| ·转染 LT 细胞结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| ·同源臂的设计 | 第41-42页 |
| ·载体设计与构建策略 | 第42-43页 |
| ·启动子功能的验证 | 第43-44页 |
| 第三章 重组山羊痘病毒的产生与纯化 | 第44-53页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·材料与试剂 | 第44页 |
| ·重组质粒的制备 | 第44页 |
| ·GPV 基因组 DNA 的提取 | 第44-45页 |
| ·重组质粒与 GPV 共转染 LT 细胞 | 第45页 |
| ·重组 GPV（rGPV）的筛选与纯化 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-49页 |
| ·重组质粒转染 LT 细胞的结果 | 第45-46页 |
| ·重组 GPV 的筛选结果 | 第46-48页 |
| ·重组 GPV 的纯化结果 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-53页 |
| ·同源重组的基本过程 | 第49页 |
| ·痘病毒基因组 DNA 的复制 | 第49-50页 |
| ·提高同源重组的效率 | 第50-51页 |
| ·重组 GPV 的筛选策略 | 第51页 |
| ·重组 GPV 的纯化 | 第51-53页 |
| 第四章 重组山羊痘病毒外源基因的鉴定 | 第53-61页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料与试剂 | 第53页 |
| ·RT-PCR 检测 rGPV 外源基因的转录 | 第53-54页 |
| ·rGPV 中外源基因表达产物的检测 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-57页 |
| ·rGPV 中外源基因 RT-PCR 结果 | 第55-56页 |
| ·rGPV 中外源基因的表达结果 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| ·病毒基因转录的特点 | 第57-58页 |
| ·痘病毒基因转录的主要元件和转录后加工 | 第58-59页 |
| ·病毒蛋白的翻译及其翻译后加工 | 第59页 |
| ·rGPV 中外源基因的转录和翻译 | 第59-61页 |
| 第五章 rGPV 的免疫效果测定 | 第61-69页 |
| ·材料与方法 | 第61-62页 |
| ·试剂及疫苗制备 | 第61页 |
| ·动物分组及免疫程序 | 第61-62页 |
| ·抗体水平及效价测定 | 第62页 |
| ·数据统计及分析 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-66页 |
| ·rGPV 病毒滴度 | 第62页 |
| ·抗体水平与效价 | 第62-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·痘病毒感染的免疫反应 | 第66-68页 |
| ·抗体水平的变化 | 第68-69页 |
| 第六章 全文结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简历 | 第87页 |
