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通过两种不同载体表达的猪细小病毒VP2生物学特性的比较研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·PPV 研究进展第11-14页
     ·PPV 简介第11页
     ·PPV 感染的临床症状第11页
     ·PPV 的分子生物学特性第11-12页
     ·PPV 的培养特性第12页
     ·PPV 感染机制第12-13页
     ·PPV 感染的组织病变第13页
     ·PPV 的流行病学第13-14页
   ·VP2 基因及其编码的蛋白研究进展第14-16页
   ·PPV 疫苗研究进展第16-19页
     ·弱毒疫苗第16页
     ·灭活疫苗第16-17页
     ·基因疫苗第17-19页
   ·研究的目的及意义第19-21页
第二章 VP2 在杆状病毒表达载体系统中的表达第21-27页
   ·试验材料与器材第21页
     ·试验材料第21页
     ·主要试验器材第21页
   ·试验方法第21-23页
     ·重组杆状病毒在 Sf9 细胞中的培养第21-22页
     ·VP2 电镜观察第22页
     ·VP2 Western blot 试验第22页
     ·VP2 血凝试验第22-23页
     ·VP2 纯化第23页
   ·结果第23-26页
     ·VP2 电镜观察结果第23-24页
     ·VP2 Western blot 试验结果第24页
     ·VP2 血凝试验结果第24-25页
     ·VP2 纯化结果第25-26页
   ·讨论第26-27页
第三章 VP2 在 pET 表达系统中的表达第27-37页
   ·试验材料与器材第27-28页
     ·试验材料第27页
     ·主要试验器材第27-28页
   ·试验方法第28-32页
     ·引物设计第28页
     ·PPV 基因组 DNA 的提取第28页
     ·VP2 基因全长序列的扩增第28-29页
     ·PCR 产物的纯化第29页
     ·重组质粒的构建第29页
     ·重组质粒的提取第29-30页
     ·重组质粒的鉴定第30页
     ·重组质粒的表达第30-31页
     ·VP2 电镜观察第31页
     ·VP2 Western blot 试验第31页
     ·VP2 血凝试验第31-32页
     ·VP2 纯化第32页
   ·结果第32-36页
     ·VP2 基因全长序列的扩增结果第32-33页
     ·重组质粒的鉴定结果第33页
     ·重组质粒的表达结果第33-34页
     ·VP2 电镜观察结果第34页
     ·VP2 Western blot 试验结果第34-35页
     ·VP2 血凝试验结果第35页
     ·VP2 纯化结果第35-36页
   ·讨论第36-37页
第四章 纳米 PCR 检测方法的建立第37-43页
   ·试验材料第37页
   ·试验方法第37-38页
     ·引物设计第37页
     ·VP2 重组质粒模板的制备第37-38页
     ·纳米 PCR 检测方法的建立以及条件优化第38页
     ·敏感性试验第38页
     ·特异性试验第38页
     ·纳米 PCR 与普通 PCR 对临床样品的检测比较第38页
   ·结果第38-40页
     ·阳性模板的制备第38-39页
     ·纳米 PCR 检测方法的建立以及条件优化第39页
     ·敏感性试验第39-40页
     ·特异性试验第40页
     ·临床样品的检测第40页
   ·讨论第40-43页
第五章 VP2 亚单位疫苗免疫豚鼠试验第43-53页
   ·试验材料第43页
   ·试验方法第43-45页
     ·豚鼠试验免疫方案第43页
     ·血凝抑制试验第43-44页
     ·病毒 TCID50的测定第44页
     ·攻毒以及保护效力的评价第44页
     ·淋巴细胞增殖试验第44-45页
     ·纳米 PCR 检测第45页
   ·结果第45-48页
     ·血凝抑制试验结果第45-46页
     ·淋巴细胞增殖试验结果第46-47页
     ·纳米 PCR 检测结果第47-48页
   ·讨论第48-53页
     ·血凝抑制试验第48-49页
     ·淋巴细胞增殖试验第49-50页
     ·纳米 PCR 检测第50-53页
第六章 结论第53-55页
参考文献第55-65页
附录第65页
致谢第65-67页
作者简历第67页

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