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羊口疮病毒的分离鉴定及B2L囊膜蛋白单克隆抗体的制备

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-8页
CONTENTS第8-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 文章综述第12-25页
   ·引言第12页
   ·羊口疮病毒研究进展第12-20页
     ·病原学及其分类第12-13页
     ·病毒的形态结构第13-15页
     ·病毒的基因组结构第15-16页
     ·毒力因子第16-19页
     ·ORFV 的研究展望第19-20页
   ·蛋白 B2L 的研究进展第20-23页
   ·表位研究方法第23-24页
   ·目的与意义第24-25页
第二章 羊口疮病毒的分离鉴定第25-36页
   ·材料第25页
     ·病料来源、细胞和实验动物第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要器材第25页
   ·方法第25-29页
     ·病毒分离第25-26页
     ·分离株的鉴定第26-29页
       ·电镜观察第26页
       ·间接免疫荧光检测(IFA)第26页
       ·PCR 鉴定第26-28页
       ·TCID50 测定第28页
       ·家兔小鼠的攻毒实验第28页
       ·动物回归试验第28-29页
   ·结果第29-36页
     ·病原体电镜观察结果第30-31页
     ·间接免疫荧光检测(IFA)第31页
     ·TCID50 测定第31页
     ·家兔小鼠的攻毒实验第31-32页
     ·回归实验第32-34页
     ·B2L 和 F1L 基因鉴定及进化分析结果第34-36页
第三章 单克隆抗体的制备第36-52页
   ·材料第36-37页
     ·细胞、细菌和实验动物第36页
     ·主要试剂第36页
     ·主要仪器设备和耗材第36-37页
   ·方法第37-44页
     ·蛋白 B2L 的表达与纯化第37页
     ·免疫小鼠第37-38页
     ·间接 ELISA 方法检测抗体效价第38-39页
     ·杂交瘤细胞株的建立第39-40页
     ·阳性杂交瘤细胞株的筛选第40-41页
     ·阳性杂交瘤细胞的克隆化第41页
     ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第41-42页
     ·单克隆抗体的大量制备及初步纯化第42-43页
     ·杂交瘤细胞培养上清及初步纯化单抗 4E2 的效价测定第43页
     ·4E2 的纯化及浓度的测定第43-44页
     ·2E4 生物学活性鉴定第44页
   ·结果第44-52页
     ·蛋白 B2L 的诱导表达、纯化结果第44-46页
     ·抗原和血清最佳工作浓度的确立第46-47页
     ·小鼠免疫血清抗体效价检测第47页
     ·细胞融合与杂交瘤细胞的筛选第47-48页
     ·单抗的大量制备及初步纯化第48-49页
     ·2E4 效价的测定第49页
     ·2E4 特异性鉴定第49-52页
第四章 中和试验和免疫荧光实验第52-56页
   ·材料第52页
     ·毒株、细胞和动物第52页
     ·主要试剂第52页
     ·主要仪器第52页
   ·方法第52-53页
     ·2E4 的中和试验第52-53页
     ·间接免疫荧光实验第53页
   ·结果第53-56页
     ·中和试验第53-54页
     ·免疫荧光检测 ORFV 在感染细胞内的分布情况第54-56页
第五章 讨论第56-61页
   ·羊口疮病毒的分离鉴定第56-57页
   ·单克隆抗体的制备第57-59页
   ·中和试验和免疫荧光实验第59-61页
第六章 结论第61-62页
参考文献第62-69页
致谢第69-70页
附录第70-76页
个人简历第76页

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