| 论文创新点 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-37页 |
| 1、蛋白质结构与功能的关系 | 第15-16页 |
| 2、蛋白质折叠与错误折叠 | 第16-22页 |
| ·、蛋白质折叠 | 第16-18页 |
| ·、蛋白质错误折叠 | 第18-19页 |
| ·、体内蛋白质错误折叠防御机制 | 第19-20页 |
| ·、蛋白质错误折叠与相关疾病 | 第20-22页 |
| 3、人β_2微球蛋白(β_2M)简介 | 第22-28页 |
| ·、人β_2M的概述 | 第22-23页 |
| ·、β_2M与疾病 | 第23-27页 |
| ·、β_2M纤维的研究 | 第27-28页 |
| 4、晚期糖基化修饰 | 第28-31页 |
| ·、晚期糖基化修饰的机理 | 第28-29页 |
| ·、晚期糖基化修饰的检测研究方法 | 第29-30页 |
| ·、晚期糖基化修饰终产物与疾病 | 第30-31页 |
| 5、研究蛋白质结构变化的方法与技术 | 第31-35页 |
| ·、直接研究生物大分子结构的方法 | 第31-33页 |
| ·、荧光光谱技术 | 第33-34页 |
| ·、圆二色光谱法 | 第34页 |
| ·、生物质谱技术 | 第34-35页 |
| 6、本课题的研究内容及意义 | 第35-37页 |
| 第二章 晚期糖基化修饰诱导β_2M形成聚集体的研究 | 第37-60页 |
| 摘要 | 第37页 |
| 引言 | 第37-38页 |
| 1、实验材料、试剂和方法 | 第38-45页 |
| ·、实验材料和溶液配制 | 第38页 |
| ·、实验仪器 | 第38-39页 |
| ·、实验方法 | 第39-45页 |
| ·、β_2M的表达、复性、纯化与鉴定 | 第39-40页 |
| ·、β_2M的晚期糖基化修饰 | 第40-41页 |
| ·、SDS-PAGE对β_2M的晚期糖基化修饰鉴定 | 第41页 |
| ·、荧光光谱技术对β_2M的晚期糖基化修饰鉴定 | 第41页 |
| ·、MALDI-TOF对β_2M的晚期糖基化修饰鉴定 | 第41页 |
| ·、Western Blot对β_2M的晚期糖基化修饰终产物鉴定 | 第41-42页 |
| ·、浊度实验检测晚期糖基化修饰β_2M聚集体的生成 | 第42-43页 |
| ·、ThT荧光法检测晚期糖基化修饰β_2M聚集体的生成 | 第43页 |
| ·、原子力显微镜观察聚集体的形态 | 第43页 |
| ·、圆二色光谱法检测晚期糖基化修饰β_2M的二级结构变化 | 第43-44页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M的蛋白酶水解抗性实验 | 第44-45页 |
| 2、结果 | 第45-58页 |
| ·、β_2M表达与纯化 | 第45页 |
| ·、D型核糖对β_2M的晚期糖基化修饰 | 第45-48页 |
| ·、β_2M晚期糖基化终产物的生成 | 第48-51页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M聚集 | 第51-56页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M聚集体的生成 | 第51-54页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M聚集体的形态学 | 第54-55页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M二级结构变化 | 第55-56页 |
| ·、Trypsin及蛋白酶K对晚期糖基化修饰β_2M水解 | 第56-58页 |
| 3、讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 晚期糖基化修饰β_2M聚集体的细胞毒性及机理研究 | 第60-82页 |
| 摘要 | 第60页 |
| 引言 | 第60-61页 |
| 1、实验材料、试剂和方法 | 第61-64页 |
| ·、实验材料 | 第61页 |
| ·、实验仪器 | 第61-62页 |
| ·、实验方法 | 第62-64页 |
| ·、细胞毒性检测 | 第62页 |
| ·、Hoechst 33342染色 | 第62-63页 |
| ·、Annexin V-FITC和PI双染检测凋亡 | 第63页 |
| ·、DCFH-DA检测胞内活性氧簇水平 | 第63-64页 |
| ·、统计分析 | 第64页 |
| 2、结果 | 第64-79页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M聚集体对细胞的毒性 | 第64-72页 |
| ·、晚期糖基化修饰β_2M聚集体的细胞毒性分析 | 第64-69页 |
| ·、荧光检测细胞凋亡 | 第69-71页 |
| ·、双染结合流式细胞仪检测分析细胞凋亡 | 第71-72页 |
| ·、胞内活性氧簇水平的检测 | 第72-76页 |
| ·、抗氧化剂NAC条件下的细胞毒性检测 | 第76-79页 |
| 3、讨论 | 第79-82页 |
| 第四章 生理拥挤环境中β_2M纤维聚集及解聚研究 | 第82-99页 |
| 摘要 | 第82页 |
| 引言 | 第82-83页 |
| 1、材料和方法 | 第83-87页 |
| ·、实验材料试剂和溶液配制 | 第83-84页 |
| ·、实验仪器 | 第84页 |
| ·、实验方法 | 第84-87页 |
| ·、ThT荧光法检测β_2M纤维聚集与解聚生长动力学 | 第84-85页 |
| ·、圆二色光谱法检测β_2M纤维聚集生长与解聚时的二级结构变化 | 第85-86页 |
| ·、透射电镜对β_2M纤维聚集及解聚形态学检测 | 第86页 |
| ·、数据分析 | 第86-87页 |
| 2、结果 | 第87-97页 |
| ·、稀溶液和拥挤条件下β_2M纤维化聚集 | 第87-91页 |
| ·、ThT荧光检测β_2M纤维化的聚集 | 第87-89页 |
| ·、CD光谱法研究纤维生长时二级结构的变化 | 第89页 |
| ·、透射电镜对不同条件下纤维形态的观察 | 第89-91页 |
| ·稀溶液和拥挤条件下β_2M纤维解聚 | 第91-97页 |
| ·、ThT荧光检测β_2M纤维解聚 | 第91-93页 |
| ·、CD光谱法研究纤维解聚时二级结构的变化 | 第93-95页 |
| ·、透射电镜对不同条件下纤维解聚后的形态学研究 | 第95-97页 |
| 3. 讨论 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-117页 |
| 攻读博士学位期间发表和待发表的论文目录 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
