| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩写词表（Abbreviations) | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-27页 |
| 1 文献综述 | 第12-25页 |
| ·细胞周期概述 | 第12-13页 |
| ·细胞周期检查点 | 第13-14页 |
| ·细胞周期中的两个重要转换 | 第14页 |
| ·细胞周期调控的因素 | 第14-15页 |
| ·细胞周期的主要调控因子 | 第15-25页 |
| ·细胞周期依赖性蛋白激酶(cycle-dependent kinase,CDK) | 第15-17页 |
| ·细胞周期蛋白(Cyclin) | 第17-18页 |
| ·细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(ICK) | 第18-22页 |
| ·WEE1和CKS | 第22-23页 |
| ·RB-E2F/DP | 第23-25页 |
| ·细胞周期调控机理 | 第25页 |
| 2. 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第一章 ICK基因单突变体、双突变体及RNAI转基因系表型分析 | 第27-54页 |
| 1 研究背景 | 第27-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-40页 |
| ·主要实验材料 | 第29页 |
| ·生化试剂 | 第29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-31页 |
| ·植物DNA提取相关试剂的配制 | 第30页 |
| ·PCR相关试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·质粒提取相关试剂的配制 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-40页 |
| ·引物的设计 | 第31-32页 |
| ·拟南芥材料的种植 | 第32-33页 |
| ·拟南芥总RNA提取 | 第33页 |
| ·反转录制备拟南芥cDNA | 第33-34页 |
| ·DNA的限制性内切酶消化 | 第34页 |
| ·DNA片段的连接 | 第34-35页 |
| ·利用pFGC5941构建RNA干涉载体 | 第35-36页 |
| ·利用pHGRV构建RNA干涉载体 | 第36-37页 |
| ·电转化(大肠杆菌或农杆菌) | 第37-38页 |
| ·质粒载体的制备 | 第38-39页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化(花序浸泡法) | 第39-40页 |
| ·转基因种子筛选 | 第40页 |
| ·环境胁迫的处理 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-50页 |
| ·纯合单突变体的筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| ·双突变体的构建和表达分析 | 第41-43页 |
| ·单突变体和双突变体的生长分析 | 第43-45页 |
| ·RNAi载体的构建和转化 | 第45-47页 |
| ·ICK1敲除突变体和RNAi系表型分析 | 第47-48页 |
| ·ICK1敲除突变体和RNAi系处理条件下的基因表达分析 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| ·T-DNA插入突变体是研究拟南芥基因功能的优良材料 | 第50页 |
| ·ICK基因的单突变体没有明显的表型 | 第50-51页 |
| ·RNA干涉与T-DNA插入突变 | 第51-52页 |
| ·ICK基因参与植物逆境调节 | 第52-53页 |
| ·进一步的研究设想 | 第53-54页 |
| 第二章 拟南芥中敲除多个ICK基因的表型分析 | 第54-92页 |
| 1 研究背景 | 第54-56页 |
| 2 材料和方法 | 第56-63页 |
| ·实验材料和条件 | 第56-59页 |
| ·植物材料和生长条件 | 第56-58页 |
| ·植物生长条件 | 第58页 |
| ·酶类 | 第58页 |
| ·试剂与耗材 | 第58-59页 |
| ·引物与测序分析 | 第59页 |
| ·软件与数据分析的方法 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-63页 |
| ·DNA/RNA的提取物和RT-PCR | 第59-60页 |
| ·激酶活性分析 | 第60页 |
| ·生物量分析,子叶、叶片、花瓣、种子和胚胎大小的测量 | 第60-61页 |
| ·细胞/气孔大小,密度和数量,以及表皮毛数分析 | 第61页 |
| ·实时PCR检测 | 第61-62页 |
| ·Rb和磷酸化Rb的免疫检测 | 第62页 |
| ·互补测试 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-86页 |
| ·单突变体和低阶突变体没有明显形态改变 | 第63-66页 |
| ·CDK活性随着ICK/KRP基因的下调而逐渐升高 | 第66-68页 |
| ·ICK/KRP四突变体和五突变体的叶形发生改变 | 第68-69页 |
| ·ICK/KRP四突变体和五突变体在早期生长加快 | 第69-71页 |
| ·ICK/KRP下调促进细胞增殖,但细胞变小 | 第71-75页 |
| ·ICK/KRP五突变体的成熟叶片中细胞密度增大 | 第75-77页 |
| ·ICK/KRP五突变体的花瓣中细胞增殖增强 | 第77-78页 |
| ·ICK/KRP五突变体的种子增大 | 第78-80页 |
| ·ick1/2/5/6/7中E2F-依赖基因的表达上调 | 第80-83页 |
| ·Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白在ICK突变体中上调 | 第83-84页 |
| ·互补分析 | 第84-86页 |
| 4 讨论 | 第86-92页 |
| ·多个ICK/KRP的下调表达对拟南芥有多重影响 | 第86-87页 |
| ·下调ICK/KRP的影响具有累积效应 | 第87-88页 |
| ·E2F途径相关基因在ICK/KRP五突变体中上调表达 | 第88-92页 |
| 总结 | 第92-93页 |
| 1 本研究的创新之处 | 第92页 |
| 2 研究展望 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-103页 |
| 附录 | 第103-111页 |
| 附录1 突变体验证及表达分析引物序列 | 第103-104页 |
| 附录2 REAL-TIME PCR引物序列 | 第104-108页 |
| 附录3 本研究中所涉及主要基因的Accession number | 第108-110页 |
| 附录4 作者简介和在读期间发表的论文 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
