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核盘菌弱毒相关DNA病毒1特性及其应用潜能研究

目录第1-8页
中文摘要第8-11页
Abstract第11-14页
縮略词表第14-16页
第一章 前言第16-41页
 1 核盘菌和作物菌核病第16-22页
   ·核盘菌及经济重要性第16页
   ·核盘菌生活史与病害循环第16-17页
   ·核盘菌致病机理第17-19页
   ·作物菌核病的防治第19-22页
 2 真菌病毒的研究进展第22-40页
   ·真菌病毒的分类第22-26页
   ·真菌病毒的起源进化第26-28页
   ·真菌病毒的传播第28-29页
   ·真菌病毒与寄主关系第29-31页
   ·真菌病毒侵染性克隆体系第31-32页
   ·弱毒现象的机理相关研究第32-35页
   ·真菌寄主抗病毒机制第35-38页
   ·弱毒相关病毒与生物防治第38-40页
 3 本研究的目的和意义第40-41页
第二章 SsHADV-1的发现和克隆分析第41-80页
 1 材料第41-44页
   ·菌株和培养方法第41-42页
   ·培养基第42页
   ·供试植物第42-43页
   ·载体和引物第43页
   ·酶和试剂盒第43-44页
   ·仪器和设备第44页
 2 方法第44-54页
   ·核盘菌菌株的分离第44页
   ·生长速度、菌核产量的测定第44-45页
   ·菌丝形态观察第45页
   ·致病力测定第45-46页
   ·核盘菌弱毒菌株DT-8中弱毒相关因子的传播特性第46-47页
   ·核盘菌原生质体制备和再生第47页
   ·核酸提取和电泳第47-48页
   ·SsHADV-1病毒核酸构型的酶切鉴定第48页
   ·SsHADV-1全长序列的克隆和全长序列拼接第48页
   ·SsHADV-1系统进化分析第48-49页
   ·Southern blot杂交分析第49-50页
   ·SsHADV-1的基因表达分析第50-51页
   ·病毒粒子的提纯第51-52页
   ·SsHADV-1病毒粒体的负染观察第52页
   ·病毒粒体的核酸和结构蛋白的检测第52-54页
 3 结果第54-75页
   ·核盘菌菌核分离情况第54页
   ·核盘菌弱毒菌株DT-8的生物学性状第54-59页
   ·弱毒因子的初步鉴定第59-61页
   ·SsHADV-1的克隆和序列分析第61-68页
   ·亚基因组序列的克隆和分析第68-70页
   ·病毒粒体的负染观察及核酸、结构蛋白的检测第70-72页
   ·SsHADV-1的传播特性第72-75页
 4 讨论第75-80页
   ·自然界中存在DNA病毒的真菌寄主第75页
   ·SsHADV-1引起核盘菌弱毒性状具有生防潜能第75-76页
   ·SsHADV-1具有不同于双生病毒的结构特点第76-77页
   ·SsHADV-1与双生病毒的进化关系第77-78页
   ·SsHADV-1的分类地位-建议建立新的病毒属--Gemycircularviruses第78-80页
第三章 SsHADV-1侵染性相关研究第80-96页
 1 材料第80页
   ·酶和引物第80页
 2 方法第80-83页
   ·滚环扩增克隆SsHADV-1第80-81页
   ·PEG介导SsHADV-1病毒粒子转染核盘菌原生质体第81页
   ·PEG介导SsHADV-1 DNA转染核盘菌原生质体第81-82页
   ·病毒粒子直接侵染核盘菌第82页
   ·SsHADV-1 DNA对完整菌丝的侵染能力第82-83页
 3 结果第83-91页
   ·PEG介导SsHADV-1病毒粒子和DNA转染核盘菌第83-85页
   ·SsHADV-1的ssDNA基因组转染核盘菌原生质体第85-86页
   ·SsHADV-1的dsDNA复制体转染核盘菌原生质体第86-87页
   ·SsHADV-1病毒粒子直接侵染核盘菌第87-90页
   ·SsHADV-1基因组DNA不能侵染完整菌丝第90-91页
 4 讨论第91-96页
   ·SsHADV-1病毒粒子的体外侵染能力第92-93页
   ·SsHADV-1病毒粒子的入侵机制第93-94页
   ·SsHADV-1的体外传播途径第94-96页
第四章 SsHADV-1生防潜能研究第96-124页
 1 材料第96-97页
   ·供试菌株及培养方法第96页
   ·供试植物第96-97页
   ·引物及其它试剂第97页
 2 方法第97-103页
   ·制备SsHADV-1病毒粗提液第97页
   ·SsHADV-1病毒粒子体外侵染不同营养亲和型菌株第97-98页
   ·SsHADV-1病毒粒子的防病潜能第98-100页
   ·SsHADV-1病毒粒子在叶片上稳定性检测第100页
   ·SsHADV-1病毒在植物中复制能力检测第100-102页
   ·SsHADV-1寄主范围检测第102-103页
 3 结果第103-120页
   ·SsHADV-1体外侵染核盘菌不同营养亲和型菌株第103-105页
   ·SsHADV-1体外侵染核盘菌属内真菌第105-107页
   ·SsHADV-1病毒粒子对拟南芥的保护作用第107-111页
   ·SsHADV-1病毒粒子对带菌花瓣侵染的保护作用第111页
   ·SsHADV-1病毒粒子对烟草植株上菌核病的防治作用第111-114页
   ·SsHADV-1病毒粒子对油菜植株上菌核病的防治作用第114-116页
   ·SsHADV-1田间生防试验第116-118页
   ·SsHADV-1病毒粒子在叶片上稳定性检测第118-119页
   ·SsHADV-1病毒在植物中复制能力检测第119-120页
 4 讨论第120-124页
   ·SsHADV-1的生防机理第121页
   ·核盘菌营养亲和群非SsHADV-1应用的限制因子第121-122页
   ·SsHADV-1病毒粒子的稳定性和安全性第122-124页
第五章 SsHADV-1侵染性克隆体系的建立第124-140页
 1 材料第124-125页
   ·载体和引物第124-125页
 2 方法第125-129页
   ·SsHADV-1侵染性克隆载体构建第125-127页
   ·农杆菌介导SsHADV-1侵染性克隆载体转化核盘菌原生质体第127-128页
   ·转染子生物学特性鉴定第128-129页
 3 结果第129-136页
   ·SsHADV-1的侵染性克隆转染核盘菌原生质体第129-132页
   ·转染子生物学性状测定第132-134页
   ·缺失CP后影响病毒复制和系统侵染第134-136页
 4 结论与讨论第136-140页
   ·构建侵染性克隆载体策略第136-137页
   ·病毒全长形成机制第137-138页
   ·侵染性克隆体系的潜在应用第138-140页
第六章 结论和展望第140-146页
 1 论文的主要结论第140-142页
   ·SsHADV-1的生物学特性和基因组研究第140-141页
   ·SsHADV-1病毒粒子体外传播和生防潜力相关研究第141页
   ·SsHADV-1侵染性克隆的构建和应用的研究第141-142页
 2 展望第142-144页
   ·SsHADV-1的弱毒机理第142页
   ·SsHADV-1的生物防治应用潜能第142-143页
   ·SsHADV-1病毒粒子的体外侵染机制第143页
   ·SsHADV-1的复制机制第143-144页
   ·SsHADV-1的传播机制第144页
 3 论文主要创新点第144-146页
参考文献第146-165页
附录1:培养基和试剂的配方第165-169页
附录2:发表论文情况第169-171页
致谢第171-172页

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