摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
英文缩写词简表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 红系发育培养系统的建立 | 第15-23页 |
·材料 | 第15-16页 |
·细胞培养试剂 | 第15页 |
·细胞来源 | 第15页 |
·CD34~+干细胞分离设施和试剂 | 第15-16页 |
·细胞离心涂片及Giemsa染色设备 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·缓冲液的配制 | 第16页 |
·方法 | 第16-19页 |
·CD34~+干细胞分离 | 第16-18页 |
·CD34~+细胞培养 | 第18页 |
·细胞离心涂片制备 | 第18页 |
·Giemsa染色 | 第18-19页 |
·结果 | 第19-21页 |
·细胞发育中的形态的观察 | 第19-20页 |
·细胞在21天培养系统中的生长情况 | 第20-21页 |
·讨论 | 第21-23页 |
第二章 红细胞膜蛋白在发育中的变化 | 第23-30页 |
·材料 | 第23-24页 |
·抗体纯化以及标记荧光试剂 | 第23页 |
·蛋白质印迹所用抗体 | 第23页 |
·流式细胞学分析法所用抗体 | 第23-24页 |
·蛋白质印迹相关设备 | 第24页 |
·流式细胞学分析法相关设备 | 第24页 |
·方法 | 第24-25页 |
·抗体的纯化以及荧光标记 | 第24页 |
·蛋白质印迹方法 | 第24-25页 |
·流式细胞学分析法 | 第25页 |
·结果 | 第25-29页 |
·通过蛋白质印迹法对膜蛋白和骨架蛋白的分析 | 第25-27页 |
·人红系发育终末分化中膜表面蛋白的变化 | 第27-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第三章 用Band3和α4 integrin作为标记物来对体外培养中红系终末分化的分析以及根据这两个标记物将红系终末发育的五个期的分选 | 第30-37页 |
·材料 | 第30-31页 |
·细胞培养 | 第30页 |
·流式细胞学分析 | 第30页 |
·流式细胞学分选的仪器和分析软件 | 第30页 |
·流式分析以及流式分选所用的抗体 | 第30-31页 |
·细胞离心涂片以及Giemsa染色 | 第31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·用双标记物对培养的细胞进行分析 | 第31页 |
·荧光激活的流式细胞分选 | 第31页 |
·细胞离心涂片和Giemsa染色 | 第31-32页 |
·结果 | 第32-35页 |
·用不同的组合对红系终末分化发育的比较以及最终确定Band3和α4integrin为标记物 | 第32-33页 |
·流式细胞分选出在培养的CD34~+阳性的细胞中的不同期的细胞 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第四章 体外培养细胞的有丝分裂能力和不同期细胞表面蛋白的表达水平 | 第37-45页 |
·材料 | 第37-38页 |
·流式分选过的细胞的培养材料 | 第37页 |
·洗脱抗体的材料 | 第37-38页 |
·流式细胞分选所用抗体 | 第38页 |
·抗体洗脱后再染色时用的抗体 | 第38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·流式细胞学分选 | 第38页 |
·流式细胞分选后的不同期细胞的培养以及细胞计数 | 第38页 |
·抗体洗脱 | 第38-39页 |
·抗体洗脱后的细胞染色 | 第39页 |
·结果 | 第39-42页 |
·红系终末分化中不同期的有丝分裂能力 | 第39-41页 |
·洗脱流式细胞分选的细胞上的抗体以及重新染色对其进行流式细胞分析 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
第五章 正常人骨髓中红系发育终末分化的研究以及人骨髓中幼稚细胞的流式细胞分选 | 第45-55页 |
·材料 | 第45-46页 |
·正常人骨髓的来源 | 第45页 |
·流式细胞分析所用的抗体 | 第45页 |
·流式细胞分选所用的抗体 | 第45页 |
·骨髓中CD45~+细胞消除的相关试剂以及设备 | 第45页 |
·细胞离心涂片以及Giemsa染色制备的设备 | 第45-46页 |
·流式细胞分析仪器和软件 | 第46页 |
·流式细胞分选仪器和软件 | 第46页 |
·方法 | 第46-47页 |
·正常人骨髓中单核细胞的分离 | 第46页 |
·骨髓中CD45~+细胞的消除 | 第46-47页 |
·骨髓细胞流式学分析 | 第47页 |
·骨髓流式细胞学分选 | 第47页 |
·细胞离心涂片和Giemsa染色 | 第47页 |
·结果 | 第47-53页 |
·对于人骨髓的流式细胞学分析以及不同期细胞的划分策略 | 第47-50页 |
·正常人骨髓的流式细胞分选以及细胞形态 | 第50-51页 |
·对人正常骨髓中红系发育的各个期进行统计学分析 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第六章 骨髓异常增生综合症病人红系发育的异常发生 | 第55-60页 |
·材料 | 第55页 |
·骨髓异常增生综合症的病人骨髓来源 | 第55页 |
·流式细胞分析所用的抗体以及仪器设备 | 第55页 |
·骨髓中CD45~+细胞消除的相关试剂以及设备 | 第55页 |
·方法 | 第55-56页 |
·骨髓异常增生综合症的骨髓中单核细胞的分离方法 | 第55-56页 |
·骨髓异常增生综合症中单核细胞中CD45+细胞的消除法 | 第56页 |
·骨髗异常增生综合症中红系细胞的流式细胞学染色 | 第56页 |
·结果 | 第56-58页 |
·骨髓异常增生综合症的病人的骨教中红系发育异常 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
综述 | 第63-72页 |
参考文献 | 第68-72页 |
攻读学位期间主要研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |