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人红系终末分化中不同期幼稚细胞的分离和功能研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
英文缩写词简表第12-13页
前言第13-15页
第一章 红系发育培养系统的建立第15-23页
   ·材料第15-16页
     ·细胞培养试剂第15页
     ·细胞来源第15页
     ·CD34~+干细胞分离设施和试剂第15-16页
     ·细胞离心涂片及Giemsa染色设备第16页
     ·主要仪器第16页
     ·缓冲液的配制第16页
   ·方法第16-19页
     ·CD34~+干细胞分离第16-18页
     ·CD34~+细胞培养第18页
     ·细胞离心涂片制备第18页
     ·Giemsa染色第18-19页
   ·结果第19-21页
     ·细胞发育中的形态的观察第19-20页
     ·细胞在21天培养系统中的生长情况第20-21页
   ·讨论第21-23页
第二章 红细胞膜蛋白在发育中的变化第23-30页
   ·材料第23-24页
     ·抗体纯化以及标记荧光试剂第23页
     ·蛋白质印迹所用抗体第23页
     ·流式细胞学分析法所用抗体第23-24页
     ·蛋白质印迹相关设备第24页
     ·流式细胞学分析法相关设备第24页
   ·方法第24-25页
     ·抗体的纯化以及荧光标记第24页
     ·蛋白质印迹方法第24-25页
     ·流式细胞学分析法第25页
   ·结果第25-29页
     ·通过蛋白质印迹法对膜蛋白和骨架蛋白的分析第25-27页
     ·人红系发育终末分化中膜表面蛋白的变化第27-29页
   ·讨论第29-30页
第三章 用Band3和α4 integrin作为标记物来对体外培养中红系终末分化的分析以及根据这两个标记物将红系终末发育的五个期的分选第30-37页
   ·材料第30-31页
     ·细胞培养第30页
     ·流式细胞学分析第30页
     ·流式细胞学分选的仪器和分析软件第30页
     ·流式分析以及流式分选所用的抗体第30-31页
     ·细胞离心涂片以及Giemsa染色第31页
   ·方法第31-32页
     ·用双标记物对培养的细胞进行分析第31页
     ·荧光激活的流式细胞分选第31页
     ·细胞离心涂片和Giemsa染色第31-32页
   ·结果第32-35页
     ·用不同的组合对红系终末分化发育的比较以及最终确定Band3和α4integrin为标记物第32-33页
     ·流式细胞分选出在培养的CD34~+阳性的细胞中的不同期的细胞第33-35页
   ·讨论第35-37页
第四章 体外培养细胞的有丝分裂能力和不同期细胞表面蛋白的表达水平第37-45页
   ·材料第37-38页
     ·流式分选过的细胞的培养材料第37页
     ·洗脱抗体的材料第37-38页
     ·流式细胞分选所用抗体第38页
     ·抗体洗脱后再染色时用的抗体第38页
   ·方法第38-39页
     ·流式细胞学分选第38页
     ·流式细胞分选后的不同期细胞的培养以及细胞计数第38页
     ·抗体洗脱第38-39页
     ·抗体洗脱后的细胞染色第39页
   ·结果第39-42页
     ·红系终末分化中不同期的有丝分裂能力第39-41页
     ·洗脱流式细胞分选的细胞上的抗体以及重新染色对其进行流式细胞分析第41-42页
   ·讨论第42-45页
第五章 正常人骨髓中红系发育终末分化的研究以及人骨髓中幼稚细胞的流式细胞分选第45-55页
   ·材料第45-46页
     ·正常人骨髓的来源第45页
     ·流式细胞分析所用的抗体第45页
     ·流式细胞分选所用的抗体第45页
     ·骨髓中CD45~+细胞消除的相关试剂以及设备第45页
     ·细胞离心涂片以及Giemsa染色制备的设备第45-46页
     ·流式细胞分析仪器和软件第46页
     ·流式细胞分选仪器和软件第46页
   ·方法第46-47页
     ·正常人骨髓中单核细胞的分离第46页
     ·骨髓中CD45~+细胞的消除第46-47页
     ·骨髓细胞流式学分析第47页
     ·骨髓流式细胞学分选第47页
     ·细胞离心涂片和Giemsa染色第47页
   ·结果第47-53页
     ·对于人骨髓的流式细胞学分析以及不同期细胞的划分策略第47-50页
     ·正常人骨髓的流式细胞分选以及细胞形态第50-51页
     ·对人正常骨髓中红系发育的各个期进行统计学分析第51-53页
   ·讨论第53-55页
第六章 骨髓异常增生综合症病人红系发育的异常发生第55-60页
   ·材料第55页
     ·骨髓异常增生综合症的病人骨髓来源第55页
     ·流式细胞分析所用的抗体以及仪器设备第55页
     ·骨髓中CD45~+细胞消除的相关试剂以及设备第55页
   ·方法第55-56页
     ·骨髓异常增生综合症的骨髓中单核细胞的分离方法第55-56页
     ·骨髓异常增生综合症中单核细胞中CD45+细胞的消除法第56页
     ·骨髗异常增生综合症中红系细胞的流式细胞学染色第56页
   ·结果第56-58页
     ·骨髓异常增生综合症的病人的骨教中红系发育异常第56-58页
   ·讨论第58-60页
参考文献第60-63页
综述第63-72页
 参考文献第68-72页
攻读学位期间主要研究成果第72-73页
致谢第73页

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