| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-20页 |
| ·CotA蛋白 | 第10-13页 |
| ·CotA蛋白的来源和位置 | 第10页 |
| ·CotA蛋白的特性 | 第10页 |
| ·CotA蛋白的同源性 | 第10-12页 |
| ·CotA蛋白的结构 | 第12-13页 |
| ·漆酶的种类 | 第13-14页 |
| ·有关细菌漆酶的研究 | 第14-16页 |
| ·细菌漆酶的生物学研究 | 第14-15页 |
| ·细菌漆酶的培养条件的优化技术 | 第15-16页 |
| ·细菌漆酶酶活的测定 | 第16页 |
| ·CotA漆酶的应用前景 | 第16-17页 |
| ·环境保护 | 第16-17页 |
| ·造纸工业 | 第17页 |
| ·生物燃料电池 | 第17页 |
| ·其他领域 | 第17页 |
| ·本课题来源及研究目的和意义 | 第17-18页 |
| ·课题来源 | 第17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·展望 | 第18-20页 |
| 2 大肠杆菌BL2 1(DE3)产CotA漆酶的发酵条件优化 | 第20-34页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·供试菌株 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·药品及试剂配制 | 第20页 |
| ·仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-25页 |
| ·CotA漆酶的制备 | 第21页 |
| ·CotA漆酶酶活的测定 | 第21-22页 |
| ·SDS-PAGE | 第22-23页 |
| ·诱导条件的测定 | 第23页 |
| ·工程菌株产CotA漆酶最适培养条件的优化 | 第23-24页 |
| ·工程菌株产CotA漆酶最适培养基的优化 | 第24-25页 |
| ·分析 | 第25-32页 |
| ·CotA漆酶最佳诱导条件的测定 | 第25-27页 |
| ·产酶最适培养环境的优化 | 第27-29页 |
| ·培养基对工程菌株产漆酶的影响 | 第29-32页 |
| ·讨论 | 第32页 |
| ·本章小结 | 第32-34页 |
| 3 大肠杆菌BL21(DE3 )产CotA漆酶纯化方法研究 | 第34-44页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·菌株 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·药品和试剂 | 第34页 |
| ·仪器与设备 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·CotA的诱导表达 | 第35页 |
| ·CotA漆酶酶活的测定及蛋白含量的测定 | 第35-36页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第36页 |
| ·透析 | 第36页 |
| ·聚乙二醇(PEG20000)浓缩 | 第36页 |
| ·DEAE-Sepharose FF(1.6×50 cm)离子交换层析 | 第36-38页 |
| ·SephadexG-75凝胶过滤(1.6×50cm) | 第38页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·结果分析 | 第39-42页 |
| ·硫酸铵最佳饱和度选择 | 第39页 |
| ·离子交换层析上样缓冲体系pH值及洗脱离子强度的确定 | 第39-40页 |
| ·DEAE-Sepharose离子交换层析 | 第40-41页 |
| ·Sephadex G-75凝胶过滤 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 4 纯化CotA漆酶的酶学性质研究 | 第44-53页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·菌种 | 第44页 |
| ·试剂和药品 | 第44页 |
| ·仪器与设备 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·纯化的CotA漆酶的制备 | 第44页 |
| ·CotA漆酶酶活的测定 | 第44页 |
| ·CotA漆酶酶学性质研究 | 第44-45页 |
| ·CotA漆酶染料降解研究 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-51页 |
| ·CotA漆酶酶学性质 | 第46-49页 |
| ·染料脱色 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录A 主要试剂 | 第58-59页 |
| 附录B 主要试剂配制方法 | 第59-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
