DAZL基因对犊牛支持细胞几种精子发生相关基因表达的影响
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| ·研究背景与科学意义 | 第12-14页 |
| ·睾丸支持细胞的促生长作用 | 第12页 |
| ·睾丸支持细胞的免疫抑制作用 | 第12-13页 |
| ·睾丸支持细胞与器官移植 | 第13页 |
| ·睾丸支持细胞在帕金森病治疗中的应用 | 第13页 |
| ·睾丸支持细胞的临床应用 | 第13-14页 |
| ·文献综述 | 第14-20页 |
| ·睾丸的形态结构 | 第14-15页 |
| ·精子发生 | 第15-16页 |
| ·支持细胞对精子发生的影响 | 第16-18页 |
| ·DAZL 基因相关研究进展 | 第18-20页 |
| ·本研究的目标、内容和研究方案 | 第20-22页 |
| ·研究目标 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20页 |
| ·研究方案 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要药品与试剂 | 第22页 |
| ·菌株及载体 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·组织取样 | 第23页 |
| ·缓冲液及常用试剂的配置 | 第23-25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25-26页 |
| ·总 RNA 的提取及反转录反应 | 第26-27页 |
| ·基因克隆和载体构建 | 第27-28页 |
| ·定量 RT-PCR | 第28-29页 |
| ·细胞培养与鉴定 | 第29-31页 |
| ·细胞生长曲线的绘制 | 第31页 |
| ·细胞的转染及筛选 | 第31-32页 |
| ·统计分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-47页 |
| ·细胞的培养与鉴定 | 第33-35页 |
| ·支持细胞的体外培养特性 | 第33-34页 |
| ·支持细胞的鉴定 | 第34页 |
| ·生精细胞的鉴定 | 第34-35页 |
| ·细胞生长曲线的汇制 | 第35-37页 |
| ·相同代次不同密度的比较 | 第35-36页 |
| ·相同密度不同代次的比较 | 第36-37页 |
| ·基因克隆和序列分析 | 第37-43页 |
| ·牛 DAZL 基因 CDS 区克隆 | 第37-38页 |
| ·牛 DAZL 基因编码区结构分析 | 第38-42页 |
| ·牛 DAZL 过表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·成牛和犊牛睾丸中精子发生相关基因的表达检测 | 第43-44页 |
| ·过表达 DAZL 后精子发生相关基因的表达检测 | 第44页 |
| ·DAZL 转基因支持细胞系的初步建立 | 第44-47页 |
| ·G418 浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·支持细胞的筛选 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·犊牛睾丸支持细胞的体外培养及鉴定分析 | 第47页 |
| ·犊牛睾丸生精细胞的体外培养及初步鉴定 | 第47-48页 |
| ·不同代次、传代密度支持细胞增殖特性的比较 | 第48页 |
| ·牛 DAZL 转基因支持细胞系的建立 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 6 展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第60页 |
