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水稻抗虫相关基因OsICS和OsHPL3的功能分析

致谢第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-16页
第一章 文献综述和研究的目的意义第16-40页
 1 植物诱导抗虫反应及主要的信号途径第16-27页
   ·植物诱导抗虫反应第16-17页
   ·虫害诱导的植物体内主要信号途径及其相互作用第17-27页
 2 植物ICS基因及其对植物防御途径的调节第27-32页
   ·ICS基因在水杨酸信号途径中的作用第27-29页
   ·植物中异分支酸合成酶参与的抗性反应第29-32页
 3 HPL基因及其产物GLV对植物防御反应的调控第32-37页
   ·脂氢过氧化物裂解酶基因HPL第32-34页
   ·HPL及其产物GLV在植物防御中的作用第34-37页
 4 目的意义与研究思路第37-40页
   ·研究目的与意义第37-38页
   ·研究技术路线第38-40页
第二章 水稻异分支酸合成酶基因OSICS特征分析第40-59页
 1 引言第40页
 2 材料与方法第40-51页
   ·供试植物第40-41页
   ·供试昆虫第41页
   ·水稻处理第41-42页
   ·水稻总RNA的提取、电泳、分光光度计检测其浓度和纯度及cDNA的制备第42-44页
   ·供试载体第44页
   ·供试菌株及酶第44页
   ·水稻OsICS基因的克隆及产物的纯化第44-45页
   ·与PMD19-T载体的连接第45-46页
   ·大肠杆菌感受态细胞的制备与重组质粒的转化第46-47页
   ·重组质粒的提取第47页
   ·重组质粒酶切鉴定及目的片段测序第47页
   ·ICS序列分析及系统进化树的构建第47-48页
   ·水稻OsICS编码蛋白的亚细胞定位第48-49页
   ·水稻OsICS的表达谱分析第49-51页
 3 结果与分析第51-57页
   ·水稻OsICS基因的克隆第51-52页
   ·水稻OsICS蛋白结构分析第52-53页
   ·水稻OsICS系统树分析第53-54页
   ·水稻OsICS编码蛋白的亚细胞定位第54页
   ·水稻OsICS的器官表达谱第54-55页
   ·水稻OsICS的诱导表达谱第55-57页
 4 讨论第57-59页
第三章 水稻OSICS反义抑制突变体的获得第59-73页
 1 引言第59页
 2 材料与方法第59-66页
   ·供试水稻第59页
   ·供试昆虫第59页
   ·水稻OsICS反义表达载体构建第59-60页
   ·反义抑制ICS转基因水稻的获得第60-63页
   ·纯合子筛选第63页
   ·Southern杂交检测转基因水稻T-DNA插入拷贝数第63-65页
   ·定量PCR检测水稻OsICS基因表达水平第65页
   ·反义抑制OsICS基因对水稻生长发育的影响第65-66页
 3 结果与分析第66-72页
   ·反义表达载体构建第66-67页
   ·植物转化及纯合品系筛选第67-68页
   ·Southern杂交鉴定T-DNA拷贝数第68-69页
   ·定量PCR检测水稻OsICS基因表达水平第69-70页
   ·反义抑制OsICS基因对水稻生长发育的影响第70-72页
 4 讨论第72-73页
第四章 水稻OSICS对SA信号途径的调控及其抗虫功能分析第73-90页
 1 引言第73页
 2 材料与方法第73-76页
   ·供试水稻第73页
   ·供试昆虫第73页
   ·水稻处理第73页
   ·JA和SA含量测定第73-74页
   ·乙烯(ET)含量测定第74-75页
   ·胰蛋白酶抑制剂TrypPls含量测定第75页
   ·生物测定第75-76页
   ·数据分析第76页
 3 结果与分析第76-88页
   ·OsICS参与调控SA合成第76-79页
   ·OsICS不影响ET合成第79页
   ·OsICS不影响TrypPIs合成第79-80页
   ·OsICS对BPH行为的影响第80-84页
   ·OsICS对WBPH行为的影响第84-87页
   ·OsICS不影响SSB幼虫的生长第87-88页
 4 讨论第88-90页
第五章 水稻OSHPL3的表达谱分析及其对GLV途径的调控第90-106页
 1 引言第90页
 2 材料与方法第90-94页
   ·供试水稻第90页
   ·供试昆虫第90-91页
   ·水稻处理第91页
   ·水稻总RNA的提取、电泳及cDNA第链合成第91页
   ·定量PCR检测水稻OsHPL3基因表达水平第91页
   ·水稻OsHPL3纯合子筛选第91页
   ·Southern杂交检测转基因水稻T-DNA插入拷贝数第91-92页
   ·反义品系沉默效果检测第92-93页
   ·OsHPL3反义品系降低水稻植株的GLV含量第93-94页
   ·反义抑制OsHPL3基因对水稻生长发育的影响第94页
   ·数据分析第94页
 3 结果与分析第94-104页
   ·水稻OsHPL3的诱导表达谱第94-99页
   ·水稻OsHPL3反义品系纯合子的获得第99-100页
   ·Southern杂交检测转基因水稻T-DNA插入拷贝数第100页
   ·反义品系沉默效果检测第100-101页
   ·OsHPL3反义品系降低水稻植株的GLV含量第101-103页
   ·反义抑制OsHPL3基因不影响水稻的生长发育第103-104页
 4 讨论第104-106页
第六章 水稻OSHPL3介导的对WBPH抗性研究第106-126页
 1 引言第106页
 2 材料和方法第106-109页
   ·供试水稻第106页
   ·供试昆虫第106-107页
   ·水稻处理第107页
   ·白背飞虱生测第107-108页
   ·各品系挥发物的捕集和分析第108页
   ·稻虱缨小蜂选择性测定第108-109页
   ·数据分析第109页
 3 结果与分析第109-124页
   ·OsHPL3反义品系增加对WBPH的抗性第109-112页
   ·外源GLV恢复OsHPL3对WBPH的抗性第112-119页
   ·各品系挥发物的捕集和分析第119-122页
   ·OsHPL3反义品系对WBPH天敌稻虱缨小蜂的影响第122页
   ·外源GLV恢复OsHPL3对WBPH天敌稻虱缨小蜂的影响第122-124页
 4 讨论第124-126页
第七章 本文小结与今后研究第126-130页
 1 本文小结第126-128页
 2 本文创新之处第128页
 3 今后的研究方向第128-130页
参考文献第130-148页
缩略词表第148-150页
附录第150-159页
 附录A 载体示意图第150-151页
 附录B 主要的仪器第151-152页
 附录C 主要的试剂及来源第152-155页
 附录D 水稻转基因体系培养基配方第155-158页
 附录E 水稻室内培养液配方第158-159页
作者简介第159页

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