致谢 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
目录 | 第13-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-40页 |
·植食性昆虫诱导的植物防御 | 第16-26页 |
·受体 | 第17-18页 |
·MAPK信号级联 | 第18页 |
·激素信号途径 | 第18-25页 |
·活性氧自由基 | 第25页 |
·防御化合物 | 第25-26页 |
·植物防御相关的重要调控因子 | 第26-38页 |
·WRKY转录因子 | 第26-37页 |
·NPR1基因 | 第37-38页 |
·研究目的和意义 | 第38-39页 |
·技术路线 | 第39-40页 |
·OsWRKY70和OsWRKY24基因功能研究 | 第39页 |
·OsNPR1基因功能研究 | 第39-40页 |
第二章 水稻转录因子OsWRKY70的抗虫功能解析 | 第40-89页 |
·材料与方法 | 第40-51页 |
·供试水稻和昆虫 | 第40页 |
·水稻处理 | 第40-41页 |
·总RNA的提取与cDNA第一链的合成 | 第41页 |
·OsWRKY70基因的克隆 | 第41-42页 |
·定量PCR | 第42页 |
·转基因植株的获得 | 第42-44页 |
·Southern杂交 | 第44-45页 |
·亚细胞定位 | 第45页 |
·凝胶组织分析(EMSA) | 第45-46页 |
·酵母单杂交(Y1H) | 第46-47页 |
·原核表达载体的构建和蛋白纯化 | 第47-49页 |
·GST pull-down | 第49页 |
·水稻核蛋白的提取和Western杂交 | 第49-50页 |
·激素提取 | 第50页 |
·H_2O_2的测定 | 第50页 |
·胰蛋白酶抑制剂测定 | 第50页 |
·昆虫的生物测定 | 第50-51页 |
·数据分析 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-84页 |
·OsWRKY70基因的克隆与序列分析 | 第51-52页 |
·OsWRKY70亚细胞定位 | 第52页 |
·OsWRKY70转录激活和转录结合活性分析 | 第52-57页 |
·OsWRKY70诱导表达分析 | 第57-58页 |
·OsWRKY70基因过量表达和RNAi表达载体的获得 | 第58-59页 |
·OsWRKY70突变体的获得与转基因效果的鉴定 | 第59-60页 |
·转基因突变体表型的变化 | 第60-62页 |
·过量表达品系转录组的变化 | 第62-65页 |
·过量表达品系内源性GA含量的变化 | 第65-66页 |
·OsWRKY70位于MAPK信号级联下游 | 第66-68页 |
·OsWRKY70正调控二化螟诱导的JA,ET的合成而负调控SA的合成 | 第68-71页 |
·OsWRKY70正调控对二化螟的抗性 | 第71-73页 |
·外施JA回补了OsWRKY70 RNAi品系对二化螟的抗性 | 第73-74页 |
·OsWRKY70负调控对褐飞虱的抗性 | 第74-76页 |
·OsWRKY70负调控褐飞虱诱导的H_2O_2、SA的合成 | 第76-77页 |
·外施GA、SA和H_2O_2回补了OeWRKY70品系对褐飞虱的抗性 | 第77-81页 |
·GA信号途径参与了水稻应答褐飞虱的抗性 | 第81-84页 |
·讨论 | 第84-89页 |
·OsWRKY70是一个位于MAPK下游早期的虫害诱导的响应子 | 第84-85页 |
·OsWRKY70在二化螟诱导的抗性途径中的定位 | 第85-86页 |
·OsWRKY70参与了GA信号途径 | 第86页 |
·GA信号途径在BPH抗性中的作用 | 第86-87页 |
·OsWRKY70参与水稻应对BPH的抗性机理 | 第87-88页 |
·OsWRKY70是一个各种虫害诱导复杂网络信号中的关键调控因子 | 第88-89页 |
第三章 虫害诱导的OsWRKY24基因功能解析 | 第89-101页 |
·材料与方法 | 第89-90页 |
·供试水稻和昆虫 | 第89页 |
·OsWRKY24基因的克隆 | 第89页 |
·定量PCR | 第89页 |
·OsWRKY24过量表达和RNAi表达载体的构建 | 第89-90页 |
·双突变体ir-wrky24/70的构建 | 第90页 |
·结果与分析 | 第90-99页 |
·OsWRKY24基因的克隆与序列分析 | 第90-92页 |
·OsWRKY24基因的诱导表达分析 | 第92-93页 |
·OsWRKY24基因RNAi载体和过量表达载体的获得 | 第93-94页 |
·OsWRKY24基因突变体的获得与转基因效果的鉴定 | 第94-95页 |
·OsWRKY24对二化螟诱导的JA和SA的影响 | 第95-96页 |
·OsWRKY24对二化螟诱导的TrpPIs的合成和二化螟抗性的影响 | 第96-97页 |
·抑制OsWRKY24基因不影响对褐飞虱的抗性 | 第97页 |
·OsWRKY24基因在水稻二化螟抗性中的贡献 | 第97-99页 |
·讨论 | 第99-101页 |
第四章 虫害诱导的OsNPR1基因功能解析 | 第101-111页 |
·材料与方法 | 第101页 |
·供试水稻和昆虫 | 第101页 |
·水稻处理 | 第101页 |
·实验方法 | 第101页 |
·数据分析 | 第101页 |
·结果与讨论 | 第101-107页 |
·OsNPR1基因的表达特征 | 第102-103页 |
·OsNPR1对虫害诱导的JA、乙烯和SA的影响 | 第103-105页 |
·OsNPR1对虫害诱导的胰蛋白酶抑制剂和挥发物的影响 | 第105-107页 |
·反义抑制OsNPR1增强了水稻对二化螟的抗性 | 第107页 |
·讨论 | 第107-111页 |
第五章 全文总结 | 第111-113页 |
·总讨论 | 第111-112页 |
·三个调控子在不同取食习性昆虫诱导的抗性中的作用 | 第111页 |
·OsWRKY70和OsWRKY24是否属于功能冗余基因? | 第111-112页 |
·创新之处 | 第112页 |
·下一步研究 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-127页 |
附录1 (S1) | 第127页 |
附录2 (S2) | 第127-128页 |
附录3 (S3) | 第128页 |
附录4 (S4) | 第128页 |