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思茅松毛虫核型多角体病毒及全基因组分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 文献综述第14-35页
   ·松毛虫病毒研究进展第15-21页
     ·松毛虫病毒种类第15-17页
     ·国内外松毛虫病毒的应用第17页
     ·松毛虫病毒的交叉感染研究第17-20页
     ·松毛虫病毒基因组序列结构与功能的研究第20页
     ·问题及展望第20-21页
   ·杆状病毒的分类学和生物学第21-30页
     ·分类第21页
     ·杆状病毒的感染周期第21-24页
     ·杆状病毒基因组结构第24-27页
     ·杆状病毒的重复基因第27-28页
     ·涉及杆状病毒宿主域的病毒基因第28页
     ·杆状病毒基因组的进化第28-30页
   ·杆状病毒杀虫剂第30-33页
     ·体内生产第30页
     ·体外生产第30页
     ·病毒的利用第30-33页
     ·杆状病毒在害虫防治中的限制因素第33页
     ·杆状病毒杀虫剂的利用前景和展望第33页
   ·本研究的目的及意义第33-34页
   ·主要研究内容第34-35页
第二章 思茅松毛虫核型多角体病毒的形态及毒力研究第35-44页
   ·引言第35页
   ·材料与方法第35-37页
     ·材料第35-36页
     ·主要试剂第36页
     ·主要仪器及产地第36-37页
   ·方法第37-38页
     ·病毒的初步鉴定第37页
     ·病毒的分离纯化第37页
     ·病毒的染色鉴定第37-38页
     ·病毒超微结构观察第38页
     ·毒力测定第38页
     ·传代病毒超微结构的观察第38页
     ·数据分析第38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·思茅松毛虫室内饲养第38页
     ·病毒鉴定第38-40页
     ·思茅松毛虫核型多角体病毒的形态特征第40-42页
     ·不同感染浓度与死亡率的关系第42页
   ·结论与讨论第42-44页
第三章 思茅松毛虫核型多角体病毒全基因组分析第44-72页
   ·引言第44页
   ·材料与方法第44-47页
     ·DekiNPV 来源第44页
     ·主要实验试剂第44页
     ·主要仪器及产地第44-45页
     ·主要试剂及缓冲液的配制第45-46页
     ·DekiNPV 基因组 DNA 的提取第46页
     ·DNA 测序第46-47页
     ·DNA 序列分析第47页
     ·系统分析(Phylogenetic analysis)第47页
     ·核酸序列号第47页
   ·结果第47-70页
     ·DekiNPV 基因组序列分析第47-48页
     ·DekiNPV 基因组结构第48页
     ·DekiNPV 与其它杆状病毒的 ORF 的比较第48-50页
     ·结构基因第50页
     ·DNA 复制和晚期基因的表达第50页
     ·抗凋亡基因第50-51页
     ·辅助功能基因第51页
     ·重复基因(bro genes)第51页
     ·DekiNPV 特有 ORF第51-63页
     ·基因对等图分析第63-64页
     ·同源区(homologous regions/hr)第64-67页
     ·进化分析第67-70页
   ·结论与讨论第70-72页
第四章 思茅松毛虫核型多角体病毒的 PCR 检测方法第72-82页
   ·引言第72页
   ·材料与方法第72-76页
     ·病毒株和多角体纯化第72-73页
     ·主要试剂及溶液配制第73-74页
     ·主要仪器第74页
     ·病毒 DNA 的提取第74页
     ·病虫总 DNA 的提取第74页
     ·健康虫总 DNA 的提取第74页
     ·DekiNPV 的 PCR 检测第74-76页
   ·结果与分析第76-80页
     ·DekiNPV 基因组 DNA 的 PCR 扩增与特异性检测结果第76-77页
     ·DekiNPV 基因组 DNA 的 6 个浓度的 PCR 检测结果第77-78页
     ·不同底物目标片段的检测结果第78-79页
     ·DekiNPV 寄主域的 PCR 检测第79-80页
   ·结论与讨论第80-82页
第五章 思茅松毛虫核型多角体病毒寄主域和替代寄主的研究第82-95页
   ·引言第82页
   ·材料与方法第82-87页
     ·试虫来源第82-83页
     ·细胞来源第83页
     ·主要试剂第83页
     ·主要仪器第83页
     ·病毒纯化第83页
     ·接种物 DekiNPV 纯度的检查第83页
     ·病毒粒子的制备第83-84页
     ·基于 11 种鳞翅目昆虫对 DekiNPV 寄主域及其替代寄主的研究第84页
     ·两种处理后死亡幼虫体内是否存在 NPV 和 CPV 混合感染的染色鉴定第84页
     ·两株昆虫细胞系在 DekiNPV 寄主域上的研究第84-85页
     ·两种处理后死亡的四种松毛虫和美国白蛾体内多角体的分离和鉴定第85页
     ·病毒 DNA 的提取第85页
     ·酶切分析第85页
     ·幼虫总 DNA 的提取第85-86页
     ·美国白蛾幼虫潜伏性病毒的检测第86页
     ·四种松毛虫幼虫潜伏性病毒的检测第86页
     ·两种处理后 4 种松毛虫和美国白蛾体内分离到的多角体是否含有DekiNPV 的 PCR 检测第86-87页
     ·数据分析第87页
   ·结果第87-92页
     ·接种物的纯度检测第87页
     ·DekiNPV 对 11 种鳞翅目昆虫的致死率第87-88页
     ·两种处理后 5 种死亡幼虫体内是否存在 NPV 和 CPV 混合感染的染色鉴定结果第88-89页
     ·DekiNPV 对 2 株昆虫细胞系的感染研究第89-90页
     ·两种处理后死亡虫体内病毒的超微结构观察第90-91页
     ·两种处理后美国白蛾幼虫中分离到的病毒身份的鉴定第91页
     ·四种松毛虫和美国白蛾的潜伏性病毒的确认第91-92页
     ·DekiNPV 诱发潜伏感染的能力第92页
   ·结论与讨论第92-95页
第六章 全文总结第95-97页
   ·主要结论第95-96页
   ·本研究的创新点第96页
   ·有待进一步的研究工作第96-97页
参考文献第97-108页
致谢第108-109页
作者简介第109页

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