| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-26页 |
| 1 研究目的及意义 | 第13-14页 |
| 2 国内外研究现状 | 第14-24页 |
| ·植物病原细菌的的群体感应及利用 | 第14-18页 |
| ·桉树胚性愈伤形成与胚状体发生机理研究进展 | 第18-20页 |
| ·桉树基因工程育种的现状和不足 | 第20-24页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 尾巨桉高效再生体系的建立 | 第26-40页 |
| 1 材料与试剂 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·主要植物生长调节剂及培养基基本成分的配制 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-30页 |
| ·尾巨桉愈伤组织诱导 | 第27页 |
| ·不定芽的诱导 | 第27-28页 |
| ·不同植物生长调节剂组合对不定芽伸长的影响 | 第28页 |
| ·不同植物生长调节剂组合对不定芽生根的影响 | 第28页 |
| ·再生苗的炼苗与移栽 | 第28-29页 |
| ·培养条件及数据统计分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第30-31页 |
| ·不同因素对不定芽分化的影响 | 第31-34页 |
| ·不同浓度NAA和PBU组合对不定芽伸长的影响 | 第34页 |
| ·不同质量浓度的植物生长调节剂对生根的影响 | 第34-35页 |
| ·炼苗时间及移栽基质对生根苗移栽成活率的影响 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| ·影响桉树再生的因素 | 第35-37页 |
| ·愈伤组织形态特征与不定芽发生的关系 | 第37页 |
| ·尾巨桉组织培养与抗褐化的关系 | 第37-38页 |
| ·尾巨桉组织培养苗的炼苗与移栽 | 第38页 |
| 5 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 尾巨桉胚性与非胚性愈伤组织差异比较研究 | 第40-54页 |
| 1 材料与植物生长调节剂及培养基基本成分的配制 | 第40页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·主要植物生长调节剂及培养基基本成分的配制 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-43页 |
| ·尾巨桉胚性愈伤组织诱导 | 第40-41页 |
| ·不同类型愈伤组织差异研究 | 第41-43页 |
| 3 试验结果 | 第43-48页 |
| ·不同植物生长调节剂组合对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第43-44页 |
| ·胚性与非胚性愈伤组织体细胞胚胎发生比较 | 第44-45页 |
| ·不同类型愈伤组织木质素含量差异 | 第45页 |
| ·尾巨桉的不同类型愈伤组织的酶活性差异比较 | 第45页 |
| ·尾巨桉的不同类型愈伤组织的相关基因表达差异研究 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 第四章 植物病原菌群体猝灭基因克隆及植物表达载体的构建 | 第54-65页 |
| 1 材料与方法 | 第54-56页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·诱导表达载体pCAMBIA-PPP3-aiiA构建方法 | 第54-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-63页 |
| ·aiiA基因的克隆 | 第56-57页 |
| ·PPP3启动子的克隆 | 第57页 |
| ·aiiA基因的生物信息学分析 | 第57-60页 |
| ·重组质粒pMD~(TM)19-T+PPP3+aiiA转化大肠杆菌的鉴定 | 第60页 |
| ·重组质粒pCAMBIA+PPP3+aiiA转化农杆菌的鉴定 | 第60-61页 |
| ·pCAMBIA1301-PPP3-gus转化农杆菌的鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组质粒PCAMBIA-35S-aiiA转化农杆菌的鉴定 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 4 结论 | 第64-65页 |
| 第五章 aiiA基因原核表达载体构建及功能分析 | 第65-75页 |
| 1 材料与试剂 | 第65页 |
| 2 方法 | 第65-70页 |
| ·引物设计 | 第65-66页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第66-70页 |
| 3 实验结果 | 第70-73页 |
| ·aIIA基因原核表达载体的构建及序列分析 | 第70-71页 |
| ·原核表达条件优化 | 第71页 |
| ·可溶性靶蛋白抗病性测定 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-74页 |
| 5 结论 | 第74-75页 |
| 第六章 尾巨桉高效遗传转化体系的建立 | 第75-89页 |
| 1 材料 | 第75-76页 |
| ·植物材料 | 第75页 |
| ·菌种与质粒 | 第75页 |
| ·主要培养基 | 第75-76页 |
| 2 方法 | 第76-78页 |
| ·工程菌液的制备 | 第76页 |
| ·尾巨桉对抗生素抗性水平检测及农杆菌抑菌实验 | 第76-77页 |
| ·遗传转化体系的正交试验设计 | 第77页 |
| ·转基因植株检测 | 第77页 |
| ·转基因植株GUS染色 | 第77-78页 |
| 3 结果与分析 | 第78-84页 |
| ·抗性素对尾巨桉再生的影响及农杆菌抑菌效果 | 第78-80页 |
| ·抗性愈伤组织的诱导结果 | 第80-81页 |
| ·抗性不定芽诱导 | 第81-82页 |
| ·正交试验方差分析 | 第82-83页 |
| ·愈伤组织gus染色结果 | 第83页 |
| ·转基因植株中gus基因的检测 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-87页 |
| ·抗生素对尾巨桉再生的影响 | 第84-86页 |
| ·影响桉树遗传转化的因素 | 第86-87页 |
| ·GUS基因和GUS染色的探讨 | 第87页 |
| 5 结论 | 第87-89页 |
| 第七章 病原物诱导型启动子在烟草中瞬时表达活性分析 | 第89-95页 |
| 1 实验材料 | 第89页 |
| ·植物材料 | 第89页 |
| ·菌株、质粒 | 第89页 |
| 2 实验方法 | 第89-91页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达分析 | 第89-90页 |
| ·组织化学染色分析 | 第90页 |
| ·RNA提取及RT-PCR | 第90页 |
| ·实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,QPCR) | 第90-91页 |
| 3 结果与分析 | 第91-93页 |
| ·RNA提取 | 第91页 |
| ·瞬时表达接种叶片GUS染色情况 | 第91页 |
| ·实时定量PCR分析目的基因的诱导表达 | 第91-93页 |
| 4 讨论 | 第93-94页 |
| 5 小结 | 第94-95页 |
| 第八章 诱导表达载体转化尾巨桉及检测 | 第95-101页 |
| 1 材料 | 第95页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第95页 |
| ·分子试剂 | 第95页 |
| 2 方法 | 第95-96页 |
| ·尾巨桉转基因方法 | 第95页 |
| ·拟转化植株的PCR检测 | 第95页 |
| ·拟转化植株Southern杂交实验 | 第95-96页 |
| 3 结果 | 第96-99页 |
| ·转基因植株目的基因PCR检测 | 第96-97页 |
| ·Southern探针合成及合成效率检测 | 第97-98页 |
| ·转基因抗性苗中目的基因序列测定及PCR-Southern检测 | 第98-99页 |
| 4 讨论 | 第99-100页 |
| 5 小结 | 第100-101页 |
| 第九章 尾巨桉中外源基因诱导表达分析 | 第101-109页 |
| 1 材料 | 第101页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第101页 |
| ·分子试剂 | 第101页 |
| 2 方法 | 第101-102页 |
| ·RNA提取及RT-PCR | 第101页 |
| ·Northern杂交实验 | 第101-102页 |
| ·实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,QPCR) | 第102页 |
| 3 结果与分析 | 第102-107页 |
| ·目的基因的诱导表达分析 | 第102-103页 |
| ·转基因抗性苗中目的基因表达的Northern blotting检测 | 第103页 |
| ·目的基因的诱导表达分析 | 第103-104页 |
| ·实时定量PCR分析目的基因的诱导表达 | 第104-107页 |
| 4 讨论 | 第107-108页 |
| 5 小结 | 第108-109页 |
| 第十章 转基因尾巨桉抗病性分析 | 第109-120页 |
| 1 材料与方法 | 第109-111页 |
| ·植物材料 | 第109页 |
| ·致病菌的分离和接种 | 第109-110页 |
| ·酶活性测定 | 第110页 |
| ·转基因植株的抗性调查 | 第110-111页 |
| ·疫霉菌接种及抗性观察 | 第111页 |
| ·转PPP3+aiiA和35S+aiiA基因的尾巨桉抗性差异比较 | 第111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-117页 |
| ·转基因尾巨桉抗性分析 | 第111-115页 |
| ·转基因尾巨桉对疫霉菌抗性观察 | 第115-116页 |
| ·转PPP3+aiiA和35S+aiiA基因的尾巨桉抗性差异比较 | 第116-117页 |
| 3 讨论 | 第117-119页 |
| 4 结论 | 第119-120页 |
| 全文结论 | 第120-121页 |
| 本文主要创新点 | 第121页 |
| 后续研究思路 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-135页 |
| 缩略词表 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 作者简介 | 第138-139页 |
