| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 目次 | 第11-14页 |
| 图清单 | 第14-15页 |
| 表清单 | 第15-16页 |
| 缩略词表 | 第16-17页 |
| 1 绪论 | 第17-29页 |
| ·朊蛋白相关疾病概述 | 第17-21页 |
| ·朊蛋白疾病的发现及特征 | 第17-18页 |
| ·朊蛋白在细胞中的表达 | 第18页 |
| ·朊蛋白的结构特征 | 第18-19页 |
| ·朊蛋白的生理生化功能 | 第19-20页 |
| ·朊蛋白致病性及疯牛病概述 | 第20-21页 |
| ·朊蛋白基因概述 | 第21-25页 |
| ·朊蛋白基因结构 | 第21-22页 |
| ·牛朊蛋白基因多态性与朊蛋白的表达调控 | 第22-24页 |
| ·朊蛋白基因多态性对疯牛病易感性的影响 | 第24-25页 |
| ·牛白细胞粘附缺陷病概述 | 第25-26页 |
| ·牛白细胞粘附缺陷病基因多态性及其影响 | 第25-26页 |
| ·公牛选育 | 第26-27页 |
| ·选题意义与内容 | 第27-29页 |
| ·选题内容 | 第27-28页 |
| ·选题意义 | 第28-29页 |
| 2 荷斯坦朊蛋白基因多态性分析 | 第29-42页 |
| ·仪器设备、实验材料和主要试剂 | 第29-32页 |
| ·实验动物样品及来源 | 第29页 |
| ·主要仪器和设备 | 第29页 |
| ·主要药品和试剂 | 第29-31页 |
| ·引物 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| ·总 DNA 提取方法 | 第32-33页 |
| ·扩增产物 PCR-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| ·克隆测序 | 第34-36页 |
| ·基因型判读方法 | 第36页 |
| ·数据分析方法 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·荷斯坦公牛基因组 DNA 提取物检测 | 第37页 |
| ·PRNP 等位基因 PCR 扩增及 PAGE 检测 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆的鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·PRNP 基因测序结果 | 第39-40页 |
| ·PRNP 基因型统计 | 第40页 |
| ·数据统计 | 第40-41页 |
| ·PRNP 基因多态性与精子活力相关性 | 第41-42页 |
| 3 不同基因型朊蛋白表达量 Q-PCR 分析 | 第42-49页 |
| ·实验材料、主要试剂和仪器设备 | 第42-43页 |
| ·实验动物样品及来源 | 第42页 |
| ·主要药品和试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器和设备 | 第42页 |
| ·内参及引物 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·荷斯坦牛精液总 RNA 提取 | 第43页 |
| ·荧光实时定量 PCR | 第43-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·精液总 RNA 提取检测 | 第45页 |
| ·Q-PCR 扩增特异性及扩增效率分析 | 第45-47页 |
| ·不同基因型朊蛋白相对表达结果 | 第47-48页 |
| ·荷斯坦公牛 PRNP 多态性与精子活力相关性及抗病性评估 | 第48-49页 |
| 4 牛白细胞粘附缺陷病基因多态性与精子活力相关性分析 | 第49-57页 |
| ·实验材料、主要试剂和仪器设备 | 第49页 |
| ·实验动物样品及来源 | 第49页 |
| ·主要仪器和设备 | 第49页 |
| ·主要药品和试剂 | 第49页 |
| ·引物及扩增条件 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·总 DNA 提取 | 第49页 |
| ·BLAD 基因扩增与 PCR 产物酶切 | 第49-51页 |
| ·电泳分离及基因型判读方法 | 第51-52页 |
| ·数据分析方法 | 第52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-57页 |
| ·总 DNA 提取检测 | 第52页 |
| ·BLAD 基因 PCR 产物 PAGE 电泳检测 | 第52-53页 |
| ·等位基因 DNA 片段扩增产物测序 | 第53-54页 |
| ·BLAD 基因型分析 | 第54页 |
| ·数据统计 | 第54-55页 |
| ·BLAD 基因中 A-G 突变对白细胞生理功能作用的影响 | 第55页 |
| ·BLAD 基因多态性和精子活力关联性分析 | 第55-57页 |
| 5 总结、创新点与展望 | 第57-59页 |
| ·全文总结 | 第57页 |
| ·创新点 | 第57-58页 |
| ·展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 作者简历 | 第64页 |
