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外来生物福寿螺热休克蛋白的克隆与其表达差异的研究

致谢第1-6页
摘要第6-9页
Abstract第9-12页
目次第12-15页
图清单第15-17页
表清单第17-18页
1 绪论第18-32页
   ·前言第18-19页
   ·福寿螺温度耐受性研究进展第19-21页
     ·温度对福寿螺生长繁殖的影响第19-20页
     ·温度对福寿螺摄食的影响第20页
     ·温度对福寿螺存活以及分布的影响第20页
     ·展望第20-21页
   ·热休克蛋白的研究进展第21-31页
     ·热休克蛋白的分类及定位第21-23页
     ·热休克蛋白 60、70 及 90 家族特点及分子结构特征第23-24页
     ·热休克蛋白的主要生物学功能第24-28页
     ·热休克蛋白基因的表达调控第28-29页
     ·软体动物热休克蛋白的研究进展第29-30页
     ·展望第30-31页
   ·本课题的研究内容及意义第31页
   ·课题来源及论文的内容安排第31-32页
2 福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因的克隆及表达分析第32-69页
   ·材料第32-34页
     ·实验材料第32页
     ·主要试剂第32-33页
     ·主要仪器第33页
     ·引物第33-34页
   ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 cDNA 的克隆第34-42页
     ·福寿螺样品的处理第34页
     ·福寿螺组织总 RNA 的提取第34-35页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 中间片段的获得第35-37页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 cDNA 3’和 5’端的克隆第37-42页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 cDNA 全长序列的确定及分析第42页
   ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因组序列的克隆第42-43页
     ·鳃组织基因组的提取第42页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因组 DNA 片段的克隆第42-43页
   ·经不同温度处理后福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因转录水平第43-46页
     ·福寿螺的处理第43-44页
     ·福寿螺组织总 RNA 抽提及其 cDNA 的合成第44页
     ·福寿螺内参基因β-actin cDNA 的克隆第44页
     ·荧光实时定量 PCR 引物的设计第44-45页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 的表达特征第45-46页
   ·结果第46-66页
     ·福寿螺 HSP60 基因的克隆与分析第46-51页
     ·福寿螺 HSP70 基因的克隆与分析第51-55页
     ·福寿螺 HSP90 基因的克隆及分析第55-60页
     ·经不同温度处理后福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因表达量第60-66页
   ·讨论第66-69页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因的克隆第66-68页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70 和 HSP90 基因转录水平第68-69页
3 福寿螺 HSC70 基因的克隆及表达分析第69-86页
   ·材料第69-71页
     ·实验材料第69-70页
     ·主要试剂及配制第70-71页
     ·主要仪器第71页
     ·引物第71页
   ·福寿螺 HSC70 cDNA 的克隆第71页
   ·福寿螺 HSC70 基因组序列的克隆第71-72页
   ·荧光实时定量 PCR 检测福寿螺 HSC70 mRNA 水平第72-75页
     ·实验材料处理第72页
     ·福寿螺组织总 RNA 的抽提及其 cDNA 的合成第72页
     ·荧光实时定量 PCR 检测 HSC70 mRNA 的表达水平第72-73页
     ·免疫印迹检测 HSC70 蛋白质水平第73-74页
     ·间接免疫荧光技术检测 HSC70 在福寿螺正常鳃组织中的分布第74-75页
   ·结果第75-84页
     ·福寿螺 HSC70 基因的克隆及分析第75-81页
     ·HSC70 组织表达特异性及温度胁迫诱导表达第81-83页
     ·正常情况下福寿螺各组织 HSC70 蛋白水平第83页
     ·福寿螺鳃组织中 HSC70 蛋白的分布第83-84页
   ·讨论第84-86页
     ·福寿螺 HSC70 基因的克隆第84-85页
     ·福寿螺 HSC70 基因的表达特征第85-86页
4 总结第86-87页
   ·研究总结第86-87页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70、HSC70 和 HSP90 基因的克隆第86页
     ·福寿螺 HSP60、HSP70、HSC70 和 HSP90 基因的表达情况第86-87页
   ·课题展望第87页
参考文献第87-93页
作者简历第93页

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