| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 縮略词 | 第10-11页 |
| 1. 前言 | 第11-24页 |
| ·蓝藻 | 第11-12页 |
| ·集胞藻PCC 6803 | 第12-14页 |
| ·藻胆体 | 第14-15页 |
| ·藻胆蛋白 | 第15-16页 |
| ·藻胆蛋白的生物合成 | 第16-17页 |
| ·连接多肽 | 第17-18页 |
| ·核膜连接蛋白ApcE(L_(CM)) | 第18-19页 |
| ·蛋白设计以及从头设计的蛋白Hp49 | 第19-20页 |
| ·蓝细菌光敏色素 | 第20-21页 |
| ·集胞藻PCC 6803的外源转化 | 第21-22页 |
| ·课题研究意义 | 第22-24页 |
| 2. ApcE能量传递模型的构建 | 第24-43页 |
| 引言 | 第24-25页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·质粒与菌种 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·所用试剂 | 第25-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-38页 |
| ·克隆中用到的方法 | 第28-30页 |
| ·从琼脂糖中回收DNA片段 | 第28-29页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第29页 |
| ·细胞感受态的制备和CaCl_2化学转化法 | 第29-30页 |
| ·磷酸化反应 | 第30页 |
| ·pET-ApcE(1-240/△77-153)::hP49的构建 | 第30-33页 |
| ·pET-hP49的构建 | 第31-33页 |
| ·pET-ApcE(1-240/△77-153)::hP49的构建 | 第33页 |
| ·pET-ApcE(1-240/△77-153)::hP49(2α)的构建 | 第33-34页 |
| ·pET-hP49(2α)的构建 | 第34页 |
| ·pET-ApcE(1-240/△77-153)::hP49(2α)的构建 | 第34页 |
| ·pET-ApcE(1-240/△77-153)::Hp49(2α)与色素在大肠杆菌中的重组 | 第34-35页 |
| ·重组产物超声破碎与提纯 | 第35-36页 |
| ·蛋白质电泳和醋酸锌染色 | 第36页 |
| ·锌卟啉(ZnMP)浓度的确定 | 第36-37页 |
| ·重组产物浓度的确定 | 第37页 |
| ·重组产物与ZnMP的共价结合 | 第37-38页 |
| ·光谱的测定 | 第38页 |
| ·实验结果与分析 | 第38-42页 |
| ·质粒检测结果与分析 | 第38-39页 |
| ·蛋白质电泳结果与分析 | 第39页 |
| ·光谱结果与分析 | 第39-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 3. ApcE::Hp49转藻突变体的构建 | 第43-57页 |
| 引言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-45页 |
| ·菌种与质粒 | 第43-44页 |
| ·培养基 | 第44-45页 |
| ·所用试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-46页 |
| ·Synechocystis sp PCC 6803野生藻种纯化 | 第45-46页 |
| ·野生藻种纯度的鉴定 | 第46页 |
| ·蓝藻总DNA的提取 | 第46页 |
| ·克隆过程中用到的实验方法 | 第46页 |
| ·取代cpcA::cpcB基因的突变质粒的构建及转化 | 第46-50页 |
| ·pBlue-T_上-hishP49::apce(1-240)-kan-T_下的构建 | 第47-49页 |
| ·pCDEDuet-hishP49::apcE(1-240)的构建 | 第47页 |
| ·pBlue-T_上T_下的构建 | 第47-48页 |
| ·pBlue-T_上-Hp49::Apce(1-240)-kan-T_下的构建 | 第48-49页 |
| ·pBlue-T_上-hishP49(2α)::apcE(1-240)-kan-t_下的构建 | 第49页 |
| ·集胞藻PCC6803的自然转化 | 第49-50页 |
| ·取代基因apcE的突变质粒的构建以及转化 | 第50-52页 |
| ·转藻质粒pBlue-T_上-hishP49::apcE(1-240)-Str-T_下的构建 | 第50-51页 |
| ·转藻质粒pBlue-T_上-hishP49(2α)::apcE(1-240)-Str-T_下的构建 | 第51页 |
| ·藻种的转化 | 第51-52页 |
| ·实验结果以及分析 | 第52-55页 |
| ·突变质粒的DNA电泳检测结果 | 第52-54页 |
| ·藻种自然转化的实验结果 | 第54-55页 |
| ·转藻突变体的PCR检测 | 第55页 |
| ·本章小结 | 第55-57页 |
| 4. 鱼腥藻PCC7120基因all4261gaF2与PCB的共价偶联 | 第57-67页 |
| 引言 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·菌种与质粒 | 第57-58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·所用试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·克隆中用到的方法 | 第58页 |
| ·藻种DNA的提取 | 第58页 |
| ·pET-all4261GAF2的构建 | 第58-60页 |
| ·pET-all4261GAF2与PCB在大肠杆菌中的重组 | 第60页 |
| ·重组产物的超声、提纯 | 第60页 |
| ·光谱的测定 | 第60-61页 |
| ·色素蛋白的蛋白质电泳和锌电泳 | 第61页 |
| ·色素蛋白的透析、变性实验 | 第61页 |
| ·实验结果和分析 | 第61-66页 |
| ·质粒的电泳检测结果及分析 | 第61-62页 |
| ·蛋白质电泳结果及分析 | 第62-63页 |
| ·PCB-All4262GAF2的吸收、荧光光谱 | 第63页 |
| ·可逆光质变色 | 第63-64页 |
| ·PCB-All4261GAF2消光系数的测定 | 第64-65页 |
| ·荧光量子产率 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
