摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第10-11页 |
1. 文献综述 | 第11-16页 |
·副猪嗜血杆菌研究 | 第11-13页 |
·副猪嗜血杆菌研究概述 | 第11页 |
·副猪嗜血杆菌毒力因子的研究 | 第11-13页 |
·神经氨酸酶与唾液酸代谢的研究进展 | 第13-16页 |
·唾液酸 | 第13-14页 |
·神经氨酸酶 | 第14-15页 |
·副猪嗜血杆菌唾液酸代谢的研究 | 第15-16页 |
2. 研究目的与意义 | 第16-17页 |
3. 材料与方法 | 第17-32页 |
·实验材料 | 第17-21页 |
·载体与质粒 | 第17-18页 |
·工具酶及主要试剂 | 第18-19页 |
·主要培养基与抗生素的配制 | 第19-20页 |
·主要缓冲液与试剂及其配制 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-31页 |
·副猪嗜血杆菌nanH基因的克隆 | 第21-24页 |
·重组质粒的构建 | 第24-25页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第25页 |
·连接产物的转化 | 第25-26页 |
·质粒的制备与鉴定 | 第26-27页 |
·蛋白的原核表达 | 第27-29页 |
·神经氨酸酶试剂盒检测神经氨酸酶活性 | 第29-31页 |
·神经氨酸酶粘附功能的研究 | 第31-32页 |
4. 结果与分析 | 第32-43页 |
·副猪嗜血杆菌15个标准血清型神经氨酸酶序列分析 | 第32-34页 |
·nanH全基因的获取与分析 | 第32页 |
·不同血清型间nanH基因比较结果 | 第32-33页 |
·不同细菌间nanH基因序列比较结果 | 第33-34页 |
·测序重组质粒酶切鉴定 | 第34页 |
·副猪嗜血杆菌不同标准血清型神经氨酸酶活性分析 | 第34-36页 |
·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶结构特点 | 第36-37页 |
·神经氨酸酶可溶性表达的研究 | 第37-43页 |
·神经氨酸酶基因的克隆 | 第37-38页 |
·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第38-39页 |
·SDS-PAGE鉴定 | 第39-40页 |
·原核表达培养基的选择 | 第40-41页 |
·NA活性的标准化 | 第41-43页 |
5. 讨论 | 第43-48页 |
·副猪嗜血杆菌不同标准株序列和活性分析 | 第43-44页 |
·神经氨酸酶在副猪嗜血杆菌中的重要性 | 第44-45页 |
·副猪嗜血杆菌可溶性表达的研究 | 第45页 |
·唾液酸代谢的研究 | 第45-48页 |
6. 小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
附录:副猪嗜血杆菌15株标准血清型菌株神经氨酸酶氨基酸序列 | 第55-62页 |