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副猪嗜血杆菌神经氨酸酶的序列分析及可溶性表达的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表(Abbreviation)第10-11页
1. 文献综述第11-16页
   ·副猪嗜血杆菌研究第11-13页
     ·副猪嗜血杆菌研究概述第11页
     ·副猪嗜血杆菌毒力因子的研究第11-13页
   ·神经氨酸酶与唾液酸代谢的研究进展第13-16页
     ·唾液酸第13-14页
     ·神经氨酸酶第14-15页
     ·副猪嗜血杆菌唾液酸代谢的研究第15-16页
2. 研究目的与意义第16-17页
3. 材料与方法第17-32页
   ·实验材料第17-21页
     ·载体与质粒第17-18页
     ·工具酶及主要试剂第18-19页
     ·主要培养基与抗生素的配制第19-20页
     ·主要缓冲液与试剂及其配制第20-21页
   ·实验方法第21-31页
     ·副猪嗜血杆菌nanH基因的克隆第21-24页
     ·重组质粒的构建第24-25页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第25页
     ·连接产物的转化第25-26页
     ·质粒的制备与鉴定第26-27页
     ·蛋白的原核表达第27-29页
     ·神经氨酸酶试剂盒检测神经氨酸酶活性第29-31页
   ·神经氨酸酶粘附功能的研究第31-32页
4. 结果与分析第32-43页
   ·副猪嗜血杆菌15个标准血清型神经氨酸酶序列分析第32-34页
     ·nanH全基因的获取与分析第32页
     ·不同血清型间nanH基因比较结果第32-33页
     ·不同细菌间nanH基因序列比较结果第33-34页
     ·测序重组质粒酶切鉴定第34页
   ·副猪嗜血杆菌不同标准血清型神经氨酸酶活性分析第34-36页
   ·副猪嗜血杆菌神经氨酸酶结构特点第36-37页
   ·神经氨酸酶可溶性表达的研究第37-43页
     ·神经氨酸酶基因的克隆第37-38页
     ·重组表达质粒的构建及鉴定第38-39页
     ·SDS-PAGE鉴定第39-40页
     ·原核表达培养基的选择第40-41页
     ·NA活性的标准化第41-43页
5. 讨论第43-48页
   ·副猪嗜血杆菌不同标准株序列和活性分析第43-44页
   ·神经氨酸酶在副猪嗜血杆菌中的重要性第44-45页
   ·副猪嗜血杆菌可溶性表达的研究第45页
   ·唾液酸代谢的研究第45-48页
6. 小结第48-49页
参考文献第49-54页
致谢第54-55页
附录:副猪嗜血杆菌15株标准血清型菌株神经氨酸酶氨基酸序列第55-62页

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