| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| 一、鞘糖脂G63（globotriaosylceramide）的研究进展 | 第8-13页 |
| （一） 鞘糖脂的结构 | 第8-9页 |
| （二） 鞘糖脂的生物学作用 | 第9-10页 |
| （三） 鞘糖脂G63（globotriaosylceramide）的结构及生物活性 | 第10-11页 |
| （四） 鞘糖脂G63（globotriaosylceramide）在细胞内的运输 | 第11-13页 |
| 二、Shiga toxin 的结构与活性 | 第13-15页 |
| （一） Shiga toxin 的分子结构 | 第13-14页 |
| （二） Shiga toxin 的生物活性 | 第14-15页 |
| 三、志贺(氏)菌毒素（Shiga toxin）的细胞内运输 | 第15-18页 |
| （一） Shiga toxin 的内吞 | 第15-16页 |
| （二） Shiga toxin 由内含体到高尔基体的转运 | 第16页 |
| （三） Shiga toxin 由高尔基体到内质网的转运 | 第16-17页 |
| （四） Shiga toxin 酶活部分到达细胞质的转运 | 第17-18页 |
| 四、目前的研究概况 | 第18页 |
| 五、本文的研究内容与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-32页 |
| 一、实验材料 | 第20-21页 |
| （一） 细胞及其培养试剂 | 第20页 |
| （二） 原始质粒 | 第20页 |
| （三） 其他试剂与药品 | 第20页 |
| （四） 实验仪器 | 第20-21页 |
| 二、实验方法 | 第21-32页 |
| （一） 质粒的构建 | 第21-23页 |
| （二） 质粒的大量制备 | 第23-24页 |
| （三） GST-STxB 蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第24页 |
| （四） SDS-PAGE 与 Western blotting | 第24-26页 |
| （五） GST-STxB 蛋白的大量制备 | 第26-28页 |
| （六） GST-STxB 蛋白的纯化 | 第28页 |
| （七） GST-STxB 蛋白的 HPLC 分析 | 第28页 |
| （八） 哺乳动物细胞培养 | 第28页 |
| （九） GST-STxB 蛋白的胞内运输 | 第28-30页 |
| （十） GST-STxB 蛋白与Hela 细胞表面G63 受体结合量的流式细胞检测 | 第30-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-44页 |
| 一、质粒构建及其验证 | 第32-33页 |
| （一） 目的基因片段的扩增 | 第32页 |
| （二） 目的基因片段与载体的连接 | 第32-33页 |
| （三） GST-STxB-pGEX-4T-1 质粒的酶切验证 | 第33页 |
| 二、GST-STxB 蛋白的诱导表达 | 第33-37页 |
| （一） SDS-PAGE 分析 | 第33-35页 |
| （二） 蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| （三） Western blotting | 第36页 |
| （四） 蛋白的除盐、浓缩 | 第36-37页 |
| 三、GST-STxB 蛋白的 HPLC 分析 | 第37-39页 |
| 四、GST-STxB 蛋白的胞内运输 | 第39-41页 |
| 五、GST-STxB 蛋白与Hela 细胞表面G63 受体结合量的流式细胞检测 | 第41-44页 |
| 第四章 讨论 | 第44-47页 |
| 一、GST-STxB 目的片段的克隆 | 第44页 |
| 二、GST-STxB 蛋白的表达与纯化 | 第44-45页 |
| 三、GST-STxB 蛋白的结构分析 | 第45页 |
| 四、GST-STxB 蛋白的胞内运输 | 第45-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
