| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 实验技术路线 | 第19-20页 |
| 第一章 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·质粒、菌株、细胞株和动物 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·主要抗体 | 第20页 |
| ·主要引物 | 第20-21页 |
| ·仪器设备 | 第21页 |
| ·Tat-hDDAH2的重组 | 第21-23页 |
| ·pGEX-6P-1-Tat-hDDAH2原核表达质粒的重组及鉴定 | 第21-22页 |
| ·GST-Tat-hDDAH2融合蛋白在E.coli中的表达 | 第22-23页 |
| ·重组Tat-hDDAH2的纯化 | 第23-24页 |
| ·包涵体的纯化及变性 | 第23页 |
| ·包涵体的复性 | 第23页 |
| ·融合蛋白的亲和纯化 | 第23页 |
| ·融合蛋白的PreScission蛋白酶切 | 第23-24页 |
| ·hDDAH2多抗的制备及检测 | 第24-26页 |
| ·重组pGEX-6p-1-hDDAH2原核表达质粒 | 第24页 |
| ·纯化hDDAH2蛋白 | 第24页 |
| ·制备抗原 | 第24-25页 |
| ·免疫家兔 | 第25页 |
| ·Western Blotting检测DDAH2融合蛋白 | 第25页 |
| ·抗体效价的检测 | 第25-26页 |
| ·功能研究 | 第26-28页 |
| ·细胞培养 | 第26页 |
| ·蛋白转导效率 | 第26页 |
| ·Tat-hDDAH2融合蛋白的功能实验 | 第26-27页 |
| ·Western blot检测DDAH表达 | 第27-28页 |
| ·DDAH活性测定 | 第28页 |
| ·统计分析 | 第28-29页 |
| 第二章 结果 | 第29-48页 |
| ·原核表达载体的鉴定 | 第29-31页 |
| ·重组质粒pGEM-Tat-hDDAH2的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-1-Tat-hDDAH2的鉴定结果 | 第30页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-1-DDAH2的鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第31-38页 |
| ·GST-Tat-hDDAH2融合蛋白的表达 | 第31-33页 |
| ·GST-Tat-hDDAH2融合蛋白的复性、纯化和酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·GST-HDDAH2融合蛋白的表达 | 第34-36页 |
| ·GST-hDDAH2融合蛋白的纯化和酶切鉴定 | 第36-38页 |
| ·DDAH2多克隆抗体效价的测定 | 第38-40页 |
| ·抗hDDAH2多克隆抗体的收集 | 第38页 |
| ·抗hDDAH2多克隆抗体特异性的检测 | 第38页 |
| ·抗hDDAH2多克隆抗体效价的检测 | 第38-40页 |
| ·功能研究 | 第40-48页 |
| ·Tat-hDDAH2蛋白的转导效率 | 第40-41页 |
| ·Tat-hDDAH2功能实验 | 第41-48页 |
| 第三章 讨论 | 第48-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 综述 | 第59-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
