| 缩略词 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 立题依据 | 第11-12页 |
| 2 药物筛选模型的选择和设计 | 第12-17页 |
| ·脂肪细胞葡萄糖消耗模型 | 第12-14页 |
| ·基于PPARγ信号通路的药物筛选模型 | 第14-15页 |
| ·四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型 | 第15-17页 |
| 第二部分 实验部分 | 第17-51页 |
| 1 材料与方法 | 第17-34页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·药品及试剂 | 第17页 |
| ·质粒、菌种与细胞株 | 第17-18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第18-20页 |
| ·脂肪细胞葡萄糖消耗模型的建立及化合物筛选 | 第20-21页 |
| ·模型建立 | 第20-21页 |
| ·细胞培养 | 第20页 |
| ·细胞诱导分化 | 第20-21页 |
| ·细胞染色观察 | 第21页 |
| ·阳性对照药物胰岛素使用浓度的确定 | 第21页 |
| ·化合物筛选 | 第21页 |
| ·基于PPARγ信号通路的药物筛选模型的建立及化合物筛选 | 第21-32页 |
| ·模型建立 | 第21-32页 |
| ·调控序列的设计与合成 | 第21-22页 |
| ·pTAL-PPRE1/2-SEAP质粒构建 | 第22页 |
| ·用DNA纯化试剂盒A1330提取并纯化原始pTAL-SEAP等质粒 | 第22-23页 |
| ·pTAL-SEAP质粒双酶切及纯化浓缩 | 第23-24页 |
| ·DNA片段连接 | 第24-25页 |
| ·质粒转化 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的酶切及电泳鉴定 | 第26-27页 |
| ·PPARγ信号通路药物筛选模型细胞株的建立 | 第27-32页 |
| ·化合物筛选 | 第32页 |
| ·四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型的建立及"命中"化合物验证 | 第32-33页 |
| ·试剂和样品的配制 | 第32-33页 |
| ·模型的建立 | 第33页 |
| ·化合物降糖作用的体内验证 | 第33页 |
| ·数据处理 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·模型建立 | 第34-41页 |
| ·脂肪细胞葡萄糖消耗模型的建立 | 第34-35页 |
| ·细胞诱导分化后苏丹Ⅲ染色结果 | 第34-35页 |
| ·胰岛素的葡萄糖消耗曲线 | 第35页 |
| ·PPARγ信号通路的约物筛选模型的建立 | 第35-39页 |
| ·重组质粒pTAL-PPRE1/2-SEAP酶切鉴定 | 第35页 |
| ·重组质粒的选择 | 第35-36页 |
| ·细胞株优化 | 第36页 |
| ·刚性药马来酸罗格列酮的用量选择 | 第36页 |
| ·马来酸罗格列酮对细胞增殖功能的影响 | 第36页 |
| ·模型特异性考察 | 第36-39页 |
| ·糖尿病小鼠模型的建立 | 第39-41页 |
| ·化合物筛选结果 | 第41-46页 |
| ·脂肪细胞葡萄糖消耗模型筛选结果 | 第41-42页 |
| ·化合物对PPARγ信号通路的激活作用 | 第42-43页 |
| ·化合物对糖尿病小鼠血糖的降糖作用 | 第43-46页 |
| ·51号化合物试验结果 | 第43页 |
| ·60号化合物试验结果 | 第43-44页 |
| ·192号化合物试验结果 | 第44页 |
| ·203号化合物试验结果 | 第44-46页 |
| 3 讨论与总结 | 第46-51页 |
| ·脂肪细胞葡萄糖消耗模型筛选结果讨论 | 第46-47页 |
| ·基于PPARγ信号通路的药物筛选模型筛选结果讨论 | 第47-48页 |
| ·ALX致小鼠糖尿病模型筛选结果讨论 | 第48-49页 |
| ·总结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 附图附表 | 第53-62页 |
| 附图1 胰岛素信号转导通路 | 第53页 |
| 附图2 PPAR信号转导通路 | 第53-54页 |
| 附图3 pTAL—PPRE1(2)-SEAP重组质粒结构图 | 第54-55页 |
| 附表1 230个化合物葡萄糖消耗活性结果汇总 | 第55-58页 |
| 附表2 63个化合物的PPARγ激动活性结果汇总 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 己发表文章 | 第63页 |
