| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 前言 | 第18-31页 |
| 第一部分 Jab1与9-1-1相互作用的鉴定 | 第31-48页 |
| 材料与方法 | 第31-39页 |
| 1.材料 | 第31-32页 |
| ·质粒、菌株和细胞株 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| 2.方法 | 第32-39页 |
| ·免疫共沉淀(immunoprecipitation,IP) | 第32-34页 |
| ·9-1-1真核表达质粒的的鉴定及大量抽提 | 第34-35页 |
| ·GST蛋白质in vitro pull-down | 第35-39页 |
| 结果 | 第39-45页 |
| 讨论 | 第45-47页 |
| 小结 | 第47-48页 |
| 第二部分 Jab1对细胞中9-1-1表达水平和功能的影响 | 第48-67页 |
| 材料与方法 | 第48-58页 |
| 1.材料 | 第48-49页 |
| ·质粒、菌株和细胞株 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| 2.方法 | 第49-58页 |
| ·Jab1真核表达质粒的鉴定及大量抽提 | 第49页 |
| ·脂质体介导的细胞转染 | 第49-50页 |
| ·逆转录病毒载体的构建 | 第50-51页 |
| ·逆转录病毒的包装 | 第51-52页 |
| ·逆转录病毒感染Pancl／V79细胞 | 第52-53页 |
| ·免疫印迹(Western Blot)检测 | 第53-55页 |
| ·siJab1表达载体的构建及大量制备 | 第55-57页 |
| ·Jab1 siRNA表达载体转染293T细胞 | 第57页 |
| ·HPRT基因突变实验 | 第57-58页 |
| 结果 | 第58-64页 |
| 讨论 | 第64-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 第三部分 DNA损伤对Jab1介导的9-1-1调节的影响 | 第67-80页 |
| 材料与方法 | 第67-70页 |
| 1.材料 | 第67-68页 |
| ·质粒和细胞株 | 第67-68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| 2.方法 | 第68-70页 |
| ·UV型DNA损伤模型的建立 | 第68页 |
| ·无DNA损伤刺激时,Jab1与9-1-1的免疫共沉淀 | 第68-69页 |
| ·DNA损伤刺激时,Jab1与9-1-1的免疫共沉淀 | 第69页 |
| ·细胞的UV assay | 第69页 |
| ·细胞的HU assay | 第69-70页 |
| 结果 | 第70-76页 |
| 讨论 | 第76-78页 |
| 小结 | 第78-80页 |
| 第四部分 Jab1调节细胞中9-1-1的机制 | 第80-87页 |
| 材料与方法 | 第80-82页 |
| 1.材料 | 第80-81页 |
| ·质粒和细胞株 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80-81页 |
| 2.方法 | 第81-82页 |
| ·Pulse-chase assay | 第81页 |
| ·蛋白酶体依赖的降解实验 | 第81-82页 |
| 结果 | 第82-83页 |
| 讨论 | 第83-86页 |
| 小结 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-107页 |
| 综述 | 第107-124页 |
| 附录 | 第124-125页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第125-127页 |
| 个人简历 | 第127-130页 |
