| 第一章 文献综述 | 第1-31页 |
| ·γ-亚麻酸的研究进展 | 第17-20页 |
| ·γ-亚麻酸的生物学作用 | 第17-19页 |
| ·γ-亚麻酸的生物资源 | 第19-20页 |
| ·γ-亚麻酸的研究现状及应用前景 | 第20页 |
| ·植物脂肪酸的代谢途径 | 第20-22页 |
| ·油菜脂肪酸代谢调控的基因工程研究进展 | 第22-25页 |
| ·油菜脂肪酸链长度的调控 | 第22-23页 |
| ·油菜脂肪酸饱和度的调控 | 第23-24页 |
| ·油菜种子含油量的调控 | 第24-25页 |
| ·油菜种子中新不饱和脂肪酸的调控 | 第25页 |
| ·向日葵遗传转化的研究进展 | 第25-28页 |
| ·向日葵遗传转化的方法 | 第25-27页 |
| ·向日葵基因工程的特点及前景 | 第27-28页 |
| ·本研究目的与技术路线 | 第28-31页 |
| ·目的意义 | 第28-29页 |
| ·技术路线 | 第29-31页 |
| 第二章 卷枝毛霉中△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及序列分析 | 第31-43页 |
| ·材料与试剂 | 第31-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·酶及试剂 | 第31页 |
| ·试剂的配制 | 第31-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| ·卷枝毛霉M29(Mucor Circinelloides M29)菌种的培养 | 第33-34页 |
| ·卷枝毛霉M29(Mucor Circinelloides M29)总RNA的提取 | 第34页 |
| ·RT-PCR扩增△6-脂肪酸脱氢酶基因 | 第34-35页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆 | 第35页 |
| ·重组质粒的转化及鉴定 | 第35-37页 |
| ·DNA序列测定及分析 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·卷枝毛霉中总RNA的提取 | 第38页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因ORF的RT-PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因ORF的PCR产物克隆 | 第39页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因ORF的序列分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·PCR产物的克隆-构建测序载体应注意的问题 | 第41-42页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因的结构特点 | 第42-43页 |
| 第三章 卷枝毛霉中△6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第43-53页 |
| ·材料与试剂 | 第43-44页 |
| ·菌株与质粒 | 第43页 |
| ·酶及试剂 | 第43页 |
| ·酵母培养基的配制 | 第43-44页 |
| ·溶液及缓冲液 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-48页 |
| ·酵母感受态细胞的制备及转化(Invitrogen) | 第44-45页 |
| ·酵母质粒DNA的提取(Clontech) | 第45页 |
| ·菌种的保存 | 第45页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因酵母表达载体的构建及转化 | 第45-47页 |
| ·△6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·酵母表达载体的构建及转化酿酒酵母 | 第48-50页 |
| ·卷枝毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第50-51页 |
| ·确定酿酒酵母工程菌株高效产生γ-亚麻酸的温度 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·酿酒酵母系统在验证△6-脂肪酸脱氢酶功能研究中优势 | 第52页 |
| ·低温对脂肪酸脱氢酶基因表达的调控机制 | 第52-53页 |
| 第四章 种子特异性启动子分离及其功能鉴定 | 第53-74页 |
| ·材料与试剂 | 第54-55页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·菌种与质粒 | 第54页 |
| ·酶及试剂 | 第54页 |
| ·溶液的配制 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-63页 |
| ·向日葵种子贮藏蛋白Ha ds10 G1基因启动子的克隆和序列测定 | 第55-57页 |
| ·植物表达载体200、500和1300Ha ds10 G1-GUS构建 | 第57页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第57-59页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第59-62页 |
| ·转基因烟草的移栽与田间管理 | 第62页 |
| ·转基因烟草不同组织GUS化学分析 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-72页 |
| ·向日葵种子贮藏蛋白H a ds10 G1基因启动子的分离、鉴定 | 第63-66页 |
| ·植物表达载体200、500和1300Ha ds10 G1-GUS的构建 | 第66-67页 |
| ·植物表达载体200、500和1300Ha ds10 G1-GUS转化农杆菌 | 第67-68页 |
| ·烟草的转化和转基因烟草的获得 | 第68-72页 |
| ·携带1300bp转基因烟草不同组织进行GUS化学分析 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 表达△6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因油菜的获得 | 第74-90页 |
| ·材料与试剂 | 第74-75页 |
| ·植物材料 | 第74页 |
| ·菌株与质 | 第74-75页 |
| ·试剂 | 第75页 |
| ·方法 | 第75-78页 |
| ·甘蓝型油菜中双6号种子中脂肪酸成分的分析 | 第75页 |
| ·农杆菌介导的甘蓝型油菜的遗传转化 | 第75-77页 |
| ·转基因油菜的鉴定 | 第77-78页 |
| ·结果与分析 | 第78-88页 |
| ·甘蓝型油菜中双6号菜籽油中脂肪酸成分的分析 | 第78-79页 |
| ·植物表达载体的构建及农杆菌的转化 | 第79-84页 |
| ·转基因油菜的获得 | 第84-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| 第六章 表达△6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因向日葵的获得 | 第90-102页 |
| ·材料与试剂 | 第90-91页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·菌株与质粒 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90-91页 |
| ·溶液的配制 | 第91页 |
| ·向日葵转化的基本培养基 | 第91页 |
| ·方法 | 第91-93页 |
| ·向日葵新葵杂6号种子油脂中脂肪酸成分的分析 | 第91页 |
| ·农杆菌介导的向日葵遗传转化体系的建立 | 第91-93页 |
| ·转基因向日葵的鉴定 | 第93页 |
| ·结果与分析 | 第93-99页 |
| ·新葵杂6号油脂中脂肪酸成分的分析 | 第93-94页 |
| ·农杆菌介导的向日葵遗传转化体系的建立 | 第94-97页 |
| ·转基因向日葵的获得 | 第97-99页 |
| ·讨论 | 第99-102页 |
| ·影响向日葵遗传转化的因素 | 第99-100页 |
| ·以茎尖为外植体建立向日葵遗传转化体系存在的问题 | 第100页 |
| ·以向日葵下胚轴为外植体建立向日葵遗传转化体系存在的问题 | 第100-102页 |
| 第七章 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-121页 |
| 个人简介 | 第121页 |
