| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-30页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1． 乳糖酶的高级结构和可能的作用机制 | 第13-14页 |
| 2． 不同来源的乳糖酶的酶学性质 | 第14-16页 |
| 3． 微生物来源的乳糖酶基因间的比较 | 第16-18页 |
| 4． 乳糖酶的应用 | 第18-20页 |
| 4．1 解决乳糖不耐受症患者食用乳制品的问题 | 第18-19页 |
| 4．2 改良乳制品 | 第19-20页 |
| 4．3 生产低聚半乳糖 | 第20页 |
| 5． 真核基因表达系统 | 第20-28页 |
| 5．1 啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）表达系统 | 第21页 |
| 5．2 裂殖酵母（Saccharomyces pombe）表达系统 | 第21-22页 |
| 5．3 甲醇营养型酵母表达系统 | 第22-28页 |
| 5．3．1 多形汉逊酵母表达系统 | 第22-23页 |
| 5．3．2 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第23-28页 |
| 6． 基因工程技术在乳糖酶生产中的应用 | 第28-29页 |
| 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 乳糖酶基因的克隆 | 第30-43页 |
| 1． 材料与方法 | 第30-33页 |
| 1．1 材料 | 第30页 |
| 1．2 方法 | 第30-33页 |
| 2． 结果 | 第33-42页 |
| 2．1 亮白曲霉乳糖酶基因组DNA的克隆及鉴定 | 第33页 |
| 2．2 亮白曲霉乳糖酶基因cDNA的克隆及鉴定 | 第33-36页 |
| 2．3 亮白曲霉乳糖酶基因组DNA、cDNA及衍生的氨基酸序列分析 | 第36-42页 |
| 2．3．1 乳糖酶基因组DNA、cDNA及衍生的氨基酸序列分析 | 第36页 |
| 2．3．2 米曲霉乳糖酶基因组DNA序列和衍生的氨基酸序列的获得 | 第36页 |
| 2．3．3 亮白曲霉乳糖酶基因玉米曲霉乳糖酶基因同源性的比较 | 第36-40页 |
| 2．3．4 不同来源的乳糖酶基因序列的同源性比较 | 第40-42页 |
| 3． 讨论 | 第42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 乳糖酶基因的表达 | 第43-59页 |
| 1． 材料和方法 | 第43-47页 |
| 1．1 材料 | 第43-44页 |
| 1．2 方法 | 第44-47页 |
| 2． 结果 | 第47-56页 |
| 2．1 乳糖酶活性的测定 | 第47-48页 |
| 2．2 乳糖酶cDNA信号肽编码序列的去除及重组质粒pT-lacb'的鉴定 | 第48-49页 |
| 2．3 原核表达载体的构建与表达 | 第49页 |
| 2．4 毕赤酵母表达载体的构建及鉴定 | 第49页 |
| 2．5 乳糖酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第49-56页 |
| 2．5．1 筛选具乳糖酶活性的转化子 | 第49-50页 |
| 2．5．2 摇床水平各转化子乳糖酶的表达 | 第50-51页 |
| 2．5．3 发酵罐水平乳糖酶的表达 | 第51-56页 |
| 3． 讨论 | 第56-58页 |
| 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 乳糖酶酶学性质的比较 | 第59-69页 |
| 1． 材料和方法 | 第59-60页 |
| 1．1 材料 | 第59页 |
| 1．2 方法 | 第59-60页 |
| 2． 结果 | 第60-68页 |
| 2．1 乳糖酶样品的制备 | 第60-61页 |
| 2．2 乳糖酶比活性的比较 | 第61-63页 |
| 2．2．1 考马斯亮蓝法测定蛋白含量标准曲线的绘制 | 第61-62页 |
| 2．2．2 比活的比较 | 第62-63页 |
| 2．3 最适pH和pH稳定性的比较 | 第63-64页 |
| 2．4 最适反应温度和热稳定性的比较 | 第64-65页 |
| 2．5 对金属子和相关化学试剂稳定性的比较 | 第65-66页 |
| 2．6 乳糖酶K_m和V_（max）的比较 | 第66-68页 |
| 3． 讨论 | 第68页 |
| 小结 | 第68-69页 |
| 第五章 乳糖酶水解牛乳的应用研究 | 第69-77页 |
| 1． 材料与方法 | 第69-70页 |
| 1．1 材料 | 第69页 |
| 1．2 方法 | 第69-70页 |
| 2． 结果 | 第70-75页 |
| 3． 讨论 | 第75-76页 |
| 小结 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-79页 |
| 本研究创新点 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-92页 |
| 附录1 一种重组毕赤酵母乳糖酶及其应用的专利申请受理通知书 | 第92-93页 |
| 附录2 生物工程学报接受的文章 | 第93-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 简历 | 第107页 |
