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恶性疟原虫保护性抗原复合基因DNA疫苗的构建及免疫学特征研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-13页
论文正文第13-74页
 1 前言第13-19页
 2 材料第19-22页
 3 方法第22-30页
  3.1 重组真核表达质粒pc-HGFSP的构建及鉴定第22-24页
   3.1.1 pc-HGFSP的构建流程第22-23页
   3.1.2 pSK-HGFSP供体质粒和pcDNA3载体质粒转化大肠杆菌第23页
   3.1.3 HGFSP与pcDNA3载体片段的制备、分离、回收与连接第23-24页
   3.1.4 pc-HGFSP的筛选及酶切鉴定第24页
  3.2 pc-HGFSP体外转染哺乳动物细胞及表达产物的分析鉴定第24-26页
   3.2.1 pc-HGFSP体外转染哺乳动物HepG2细胞第24-25页
   3.2.2 G418筛选阳性细胞克隆第25页
   3.2.3 间接免疫荧光试验(IFA)鉴定第25页
   3.2.4 表达产物SDS-PAGE鉴定第25页
   3.2.5 表达产物Western blot鉴定第25-26页
  3.3 pc-HGFSP质粒DNA免疫小鼠诱导的免疫应答第26-29页
   3.3.1 质粒大量制备第26页
   3.3.2 免疫接种小鼠第26页
   3.3.3 血清抗HGFSP-IgG含量测定第26-27页
   3.3.4 淋巴细胞增殖活性测定第27页
   3.3.5 NK细胞活性测定第27-28页
   3.3.6 CTL活性测定第28页
   3.3.7 CD4+、CD8~+ T细胞亚群测定第28页
   3.3.8 血清一氧化氮(NO)含量测定第28页
   3.3.9 脾脏指数测定第28-29页
   3.3.10 注射部位肌肉组织免疫酶检查第29页
  3.4 恶性疟原虫体外抑制试验第29-30页
 4 结果第30-44页
  4.1 重组真核表达质粒pc-HGFSP的构建及鉴定第30-31页
   4.1.1 pc-HGFSP质粒DNA酶切鉴定结果第30页
   4.1.2 体外转染细胞间接免疫荧光试验(IFA)鉴定结果第30页
   4.1.3 体外转染细胞表达产物SDS-PAGE鉴定结果第30页
   4.1.4 体外转染细胞表达产物Western blot鉴定结果第30-31页
  4.2 pc-HGFSP质粒DNA免疫小鼠诱导的免疫应答第31-34页
   4.2.1 血清HGFSP抗原特异性IgG抗体测定结果第31页
   4.2.2 脾脏淋巴细胞增殖活性测定结果第31-32页
   4.2.3 脾脏NK细胞活性测定结果第32页
   4.2.4 脾脏CTL活性测定结果第32-33页
   4.2.5 脾脏CD4~+及CD8~+ T细胞亚群测定结果第33页
   4.2.6 血清一氧化氮(NO)含量测定结果第33-34页
   4.2.7 脾脏指数测定结果第34页
   4.2.8 注射部位肌组织免疫酶组织化学染色结果第34页
  4.3 恶性疟原虫体外抑制试验结果第34页
  4.4 论文图片第34-44页
 5 讨论第44-60页
  5.1 传统疟疾疫苗的发展及存在的问题第44-46页
  5.2 DNA疫苗技术及其特点第46-48页
  5.3 恶性疟原虫保护性抗原复合基因HGFSP的选用第48-49页
  5.4 用于DNA疫苗的真核表达载体pcDNA3第49-50页
  5.5 体外转染及表达产物的鉴定第50-51页
  5.6 DNA免疫小鼠的免疫方案及其影响因素第51-53页
  5.7 pc-HGFSP DNA疫苗诱导小鼠的体液免疫应答第53-54页
  5.8 pc-HGFSP DNA疫苗诱导小鼠的细胞免疫应答第54-56页
  5.9 一氧化氮在抗疟疾感染方面的作用第56-57页
  5.10 恶性疟原虫体外抑制试验第57-58页
  5.11 疟疾DNA疫苗的发展方向第58-60页
 6 结论第60-61页
 7 参考文献第61-74页
致谢第74-75页
缩略语第75-77页
文献综述1第77-97页
文献综述2第97-99页

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