中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-13页 |
论文正文 | 第13-74页 |
1 前言 | 第13-19页 |
2 材料 | 第19-22页 |
3 方法 | 第22-30页 |
3.1 重组真核表达质粒pc-HGFSP的构建及鉴定 | 第22-24页 |
3.1.1 pc-HGFSP的构建流程 | 第22-23页 |
3.1.2 pSK-HGFSP供体质粒和pcDNA3载体质粒转化大肠杆菌 | 第23页 |
3.1.3 HGFSP与pcDNA3载体片段的制备、分离、回收与连接 | 第23-24页 |
3.1.4 pc-HGFSP的筛选及酶切鉴定 | 第24页 |
3.2 pc-HGFSP体外转染哺乳动物细胞及表达产物的分析鉴定 | 第24-26页 |
3.2.1 pc-HGFSP体外转染哺乳动物HepG2细胞 | 第24-25页 |
3.2.2 G418筛选阳性细胞克隆 | 第25页 |
3.2.3 间接免疫荧光试验(IFA)鉴定 | 第25页 |
3.2.4 表达产物SDS-PAGE鉴定 | 第25页 |
3.2.5 表达产物Western blot鉴定 | 第25-26页 |
3.3 pc-HGFSP质粒DNA免疫小鼠诱导的免疫应答 | 第26-29页 |
3.3.1 质粒大量制备 | 第26页 |
3.3.2 免疫接种小鼠 | 第26页 |
3.3.3 血清抗HGFSP-IgG含量测定 | 第26-27页 |
3.3.4 淋巴细胞增殖活性测定 | 第27页 |
3.3.5 NK细胞活性测定 | 第27-28页 |
3.3.6 CTL活性测定 | 第28页 |
3.3.7 CD4+、CD8~+ T细胞亚群测定 | 第28页 |
3.3.8 血清一氧化氮(NO)含量测定 | 第28页 |
3.3.9 脾脏指数测定 | 第28-29页 |
3.3.10 注射部位肌肉组织免疫酶检查 | 第29页 |
3.4 恶性疟原虫体外抑制试验 | 第29-30页 |
4 结果 | 第30-44页 |
4.1 重组真核表达质粒pc-HGFSP的构建及鉴定 | 第30-31页 |
4.1.1 pc-HGFSP质粒DNA酶切鉴定结果 | 第30页 |
4.1.2 体外转染细胞间接免疫荧光试验(IFA)鉴定结果 | 第30页 |
4.1.3 体外转染细胞表达产物SDS-PAGE鉴定结果 | 第30页 |
4.1.4 体外转染细胞表达产物Western blot鉴定结果 | 第30-31页 |
4.2 pc-HGFSP质粒DNA免疫小鼠诱导的免疫应答 | 第31-34页 |
4.2.1 血清HGFSP抗原特异性IgG抗体测定结果 | 第31页 |
4.2.2 脾脏淋巴细胞增殖活性测定结果 | 第31-32页 |
4.2.3 脾脏NK细胞活性测定结果 | 第32页 |
4.2.4 脾脏CTL活性测定结果 | 第32-33页 |
4.2.5 脾脏CD4~+及CD8~+ T细胞亚群测定结果 | 第33页 |
4.2.6 血清一氧化氮(NO)含量测定结果 | 第33-34页 |
4.2.7 脾脏指数测定结果 | 第34页 |
4.2.8 注射部位肌组织免疫酶组织化学染色结果 | 第34页 |
4.3 恶性疟原虫体外抑制试验结果 | 第34页 |
4.4 论文图片 | 第34-44页 |
5 讨论 | 第44-60页 |
5.1 传统疟疾疫苗的发展及存在的问题 | 第44-46页 |
5.2 DNA疫苗技术及其特点 | 第46-48页 |
5.3 恶性疟原虫保护性抗原复合基因HGFSP的选用 | 第48-49页 |
5.4 用于DNA疫苗的真核表达载体pcDNA3 | 第49-50页 |
5.5 体外转染及表达产物的鉴定 | 第50-51页 |
5.6 DNA免疫小鼠的免疫方案及其影响因素 | 第51-53页 |
5.7 pc-HGFSP DNA疫苗诱导小鼠的体液免疫应答 | 第53-54页 |
5.8 pc-HGFSP DNA疫苗诱导小鼠的细胞免疫应答 | 第54-56页 |
5.9 一氧化氮在抗疟疾感染方面的作用 | 第56-57页 |
5.10 恶性疟原虫体外抑制试验 | 第57-58页 |
5.11 疟疾DNA疫苗的发展方向 | 第58-60页 |
6 结论 | 第60-61页 |
7 参考文献 | 第61-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
缩略语 | 第75-77页 |
文献综述1 | 第77-97页 |
文献综述2 | 第97-99页 |