| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-55页 |
| ·引言 | 第15-16页 |
| ·微流控芯片血细胞操控与分离 | 第16-26页 |
| ·机械操控分离法 | 第17-19页 |
| ·电诱导操控分离法 | 第19-20页 |
| ·磁操控分离法 | 第20-25页 |
| ·免疫磁分离技术 | 第21-22页 |
| ·高梯度磁分离技术 | 第22-25页 |
| ·其他的操控分离方法 | 第25-26页 |
| ·微流控芯片PCR扩增 | 第26-39页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第26页 |
| ·PCR芯片 | 第26-35页 |
| ·连续流动型PCR芯片(CF-PCR Chip) | 第27-30页 |
| ·微池型PCR芯片(MC-PCR Chip) | 第30-33页 |
| ·PCR—毛细管电泳集成芯片 | 第33-34页 |
| ·高度集成多功能的便携PCR芯片 | 第34-35页 |
| ·集成型血液DNA芯片PCR扩增 | 第35-39页 |
| ·焦磷酸测序微流控芯片的发展 | 第39-52页 |
| ·焦磷酸测序技术的原理 | 第40-42页 |
| ·静态焦磷酸测序 | 第41-42页 |
| ·流动焦磷酸测序 | 第42页 |
| ·微流控芯片上的流动焦磷酸测序 | 第42-52页 |
| ·本论文工作目的及设计思想 | 第52-55页 |
| 第2章 基于高梯度磁分离技术的玻璃微流控芯片连续血细胞分离研究 | 第55-75页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·理论基础 | 第56-58页 |
| ·血细胞的磁性 | 第56-57页 |
| ·高梯度磁分离技术原理 | 第57-58页 |
| ·高梯度磁场的产生 | 第57-58页 |
| ·分离原理 | 第58页 |
| ·血细胞高梯度磁分离研究进展 | 第58-60页 |
| ·实验部分 | 第60-66页 |
| ·试剂与材料 | 第60页 |
| ·仪器与装置 | 第60-62页 |
| ·芯片结构及磁分离原理 | 第62-64页 |
| ·玻璃高梯度磁分离芯片的制作 | 第64-65页 |
| ·样品预处理 | 第65-66页 |
| ·实验流程 | 第66页 |
| ·实验结果与讨论 | 第66-73页 |
| ·连续地HGMS分离细胞 | 第66-67页 |
| ·流量的影响 | 第67-68页 |
| ·细胞的沉降 | 第68-70页 |
| ·血细胞的QDs标记 | 第70-71页 |
| ·镍丝两侧细胞分布不均一现象 | 第71-73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第3章 直接全血PCR扩增方法研究及其在静态微池型PCR芯片上的应用 | 第75-95页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·实验部分 | 第76-82页 |
| ·试剂和样品 | 第76-78页 |
| ·实验试剂 | 第76页 |
| ·PCR引物 | 第76-77页 |
| ·血液样本的准备 | 第77页 |
| ·全血DNA的提取 | 第77-78页 |
| ·仪器 | 第78-80页 |
| ·PCR反应体系 | 第80页 |
| ·PCR扩增程序 | 第80-81页 |
| ·实验过程 | 第81页 |
| ·芯片上的直接全血PCR扩增反应 | 第81-82页 |
| ·实验结果与讨论 | 第82-93页 |
| ·PCR反应体系中主要成分的优化 | 第82-86页 |
| ·MgCl_2含量的优化 | 第83-84页 |
| ·BSA含量的优化 | 第84页 |
| ·dNTP含量的优化 | 第84-85页 |
| ·Taq DNA聚合酶含量的优化 | 第85-86页 |
| ·PCR扩增促进因子的影响 | 第86-87页 |
| ·PCR扩增程序的影响 | 第87-88页 |
| ·直接PCR扩增内源基因组DNA | 第88-89页 |
| ·直接PCR扩增外源DNA | 第89-91页 |
| ·不同血液量的影响 | 第89-90页 |
| ·不同外源DNA量的影响 | 第90-91页 |
| ·不同处理血液的PCR扩增效率 | 第91-92页 |
| ·芯片上的直接全血PCR扩增 | 第92-93页 |
| ·小结 | 第93-95页 |
| 第4章 毛细管流动焦磷酸测序方法的建立及其在单核苷酸多态性(SNP)检测中的应用 | 第95-123页 |
| ·引言 | 第95-97页 |
| ·实验部分 | 第97-105页 |
| ·试剂与样品 | 第97页 |
| ·仪器与装置 | 第97-99页 |
| ·微流控系统平台 | 第99-100页 |
| ·毛细管微流控系统平台 | 第99页 |
| ·高梯度磁分离芯片微流控系统平台 | 第99-100页 |
| ·焦磷酸测序过程 | 第100-105页 |
| ·焦磷酸测序所需溶液 | 第100-101页 |
| ·测序模板的制备 | 第101-103页 |
| ·四种核苷酸的配制及预处理 | 第103页 |
| ·检测核苷酸和焦磷酸测序反应液的质量 | 第103-104页 |
| ·焦磷酸测序步骤 | 第104页 |
| ·检测条件的设置 | 第104-105页 |
| ·实验过程 | 第105页 |
| ·实验结果 | 第105-117页 |
| ·磁屏蔽盒的效果 | 第105-106页 |
| ·测序反应液光下稳定性 | 第106页 |
| ·dNTP与测序反应液混合放置时间 | 第106-108页 |
| ·磁珠模板制备效率 | 第108-109页 |
| ·气泡间隔作用 | 第109-110页 |
| ·不同实验条件对焦磷酸测序反应信号的影响 | 第110-112页 |
| ·实际样品的SNP位点检测 | 第112-117页 |
| ·流动焦磷酸测序法SNP位点检测 | 第113-114页 |
| ·静态焦磷酸测序法SNP位点检测 | 第114-117页 |
| ·实验讨论 | 第117-121页 |
| ·影响磁珠模板制备效率的因素 | 第117页 |
| ·毛细管微流控系统平台上进行连续焦磷酸测序反应 | 第117-120页 |
| ·持续液流 | 第118页 |
| ·停止液流 | 第118-120页 |
| ·高梯度磁分离微流控芯片系统上的焦磷酸测序 | 第120-121页 |
| ·小结 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-131页 |
| 致谢 | 第131-133页 |
| 攻读博士学位期间发表论文目录 | 第133-134页 |
