| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-26页 |
| ·牛传染性鼻气管炎概述 | 第14-20页 |
| ·病原简介 | 第14-15页 |
| ·流行病学 | 第15-16页 |
| ·临床症状 | 第16-17页 |
| ·发病机制 | 第17-18页 |
| ·牛传染性鼻气管炎病毒在牛呼吸道疾病复合物中的作用 | 第18页 |
| ·免疫 | 第18-19页 |
| ·防制措施 | 第19页 |
| ·牛传染性鼻气管炎病毒作为病毒载体的研究 | 第19-20页 |
| ·口蹄疫病毒活载体疫苗研究进展 | 第20-25页 |
| ·以痘病毒为载体的FMD 疫苗 | 第21-23页 |
| ·以疱疹病毒为载体的FMD 疫苗 | 第23-24页 |
| ·以腺病毒为载体的FMD 疫苗 | 第24-25页 |
| ·结语 | 第25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 O 型FMDV VP1 基因的表达鉴定及其多克隆抗体的制备 | 第26-34页 |
| ·材料和方法 | 第26-29页 |
| ·菌种、质粒及血清 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·主要的仪器设备 | 第27页 |
| ·目的基因的扩增及回收 | 第27页 |
| ·重组表达质粒的构建和鉴定 | 第27-28页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第28页 |
| ·VP1 蛋白的初步纯化 | 第28页 |
| ·VP1 蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·表达产物的 Western blot 分析 | 第28页 |
| ·VP1 蛋白的复性及间接ELISA 的检测 | 第28页 |
| ·鼠抗VP1 蛋白多克隆抗体的制备 | 第28-29页 |
| ·鼠抗VP1 蛋白多克隆抗体效价的测定 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-32页 |
| ·VP1 基因的扩增 | 第29页 |
| ·VP1 基因重组表达质粒的构建和鉴定 | 第29-30页 |
| ·VP1 基因的表达 | 第30-31页 |
| ·表达产物的Western blot 分析 | 第31页 |
| ·VP1 蛋白的纯化 | 第31页 |
| ·VP1 蛋白的间接ELISA 检测 | 第31-32页 |
| ·鼠抗VP1 蛋白多克隆抗体的制备及效价的测定 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 表达O 型FMDV VP1 基因的重组BHV-1 的构建与鉴定 | 第34-45页 |
| ·材料和方法 | 第35-37页 |
| ·细胞、病毒与质粒 | 第35页 |
| ·血清、标记抗体及主要试剂 | 第35页 |
| ·细胞培养及病毒增殖 | 第35页 |
| ·病毒基因组DNA 的制备 | 第35页 |
| ·转移载体的构建 | 第35-36页 |
| ·转移载体质粒的大量制备 | 第36页 |
| ·转移载体与亲本病毒BHV-1/gE-/LacZ~+基因组DNA 的共转染 | 第36页 |
| ·重组病毒BHV-1/gE-/VP1 的筛选 | 第36页 |
| ·重组病毒BHV-1/gE-/VP1 的PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·VP1 基因表达的Western blot 检测 | 第37页 |
| ·VP1 基因表达的IFA 检测 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-44页 |
| ·转移载体及重组病毒的构建 | 第37-42页 |
| ·重组病毒BHV-1/gE-/VP1 的筛选 | 第42页 |
| ·重组病毒BHV-1/gE-/VP1 的PCR 鉴定 | 第42页 |
| ·VP1 基因表达的Western blotting 检测结果 | 第42-43页 |
| ·VP1 基因表达的IFA 检测结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 第四章 重组病毒的生物学特性及其在兔体内的免疫原性研究 | 第45-52页 |
| ·材料和方法 | 第45-47页 |
| ·病毒与细胞 | 第45页 |
| ·试验动物 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·重组病毒与亲本病毒TCID50 的测定 | 第46页 |
| ·不同代次重组病毒VP1 基因的扩增 | 第46-47页 |
| ·动物免疫 | 第47页 |
| ·免疫动物血清中IBRV 抗体的检测 | 第47页 |
| ·免疫动物血清中VP1 抗体的检测 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·重组病毒和亲本病毒TCID_(50) 的测定 | 第47-48页 |
| ·不同代次重组病毒VP1 基因的扩增 | 第48-49页 |
| ·病毒中和试验检测IBRV 抗体 | 第49-50页 |
| ·间接ELISA 检测VP1 抗体 | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
