| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-25页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第14-17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征和猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第14-17页 |
| ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征 | 第17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断技术的发展 | 第17-21页 |
| ·临床诊断方法 | 第18页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第18-19页 |
| ·血清学方法 | 第19-20页 |
| ·分子生物学方法 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术 | 第21-24页 |
| ·实时荧光定量 PCR 方法的原理 | 第22页 |
| ·实时荧光定量 PCR 方法的分类 | 第22-23页 |
| ·多重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 方法 | 第23页 |
| ·实时荧光定量 PCR 在生命科学研究中的应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征高致病株和经典株二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 鉴别方法的建立及初步应用 | 第25-34页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·毒株与细胞 | 第25页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·病毒培养 | 第25-26页 |
| ·PRRSV 高致病株与经典株鉴别引物的设计 | 第26页 |
| ·PRRSV RNA 的提取及反转录 | 第26-27页 |
| ·PRRSV 高致病株与经典株常规 PCR 鉴定 | 第27页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 反应条件 | 第27-28页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 特异性试验 | 第28页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 重复性试验 | 第28页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 敏感性试验 | 第28页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 样品检测 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-32页 |
| ·PRRSV 引物常规 PCR 扩增电泳鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 确定两种毒株的 Tm 值 | 第29-30页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 特异性试验 | 第30页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 重复性试验 | 第30-31页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 敏感性试验 | 第31页 |
| ·二重 SYBR Green-I 实时荧光 PCR 样品检测 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 SYBR Green-I 荧光定量 PCR 方法的建立 | 第34-44页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·毒株与细胞 | 第34页 |
| ·载体与菌种 | 第34页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·病毒培养 | 第35页 |
| ·PRRSV 高致病株引物 | 第35页 |
| ·PRRSV RNA 的提取及反转录 | 第35页 |
| ·PRRSV 高致病株常规 PCR 鉴定 | 第35-36页 |
| ·PCR 产物的胶回收 | 第36页 |
| ·目的基因 DNA 产物的连接与转化 | 第36-38页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 标准品的制备及标准曲线的建立 | 第38页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 的特异性 | 第38页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 的重复性 | 第38页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 样品检测 | 第38-39页 |
| ·实验结果 | 第39-42页 |
| ·高致病性 PRRSV Nsp2 基因部分核酸序列 PCR 扩增电泳鉴定结果 | 第39页 |
| ·高致病性 PRRSV Nsp2 基因部分核酸序列重组质粒测序结果 | 第39-40页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 标准曲线 | 第40-41页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 特异性试验结果 | 第41页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 重复性试验结果 | 第41-42页 |
| ·高致病性 PRRSV SYBR Green-I 荧光定量 PCR 样品检测结果 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53页 |
