| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-18页 |
| 1 材料 | 第18-21页 |
| ·虫株和细胞株 | 第18页 |
| ·菌株及质粒 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·溶液和培养基的配制 | 第19-21页 |
| 2 方法 | 第21-31页 |
| ·宫颈癌Hela 细胞的培养 | 第21页 |
| ·弓形虫RH 株速殖子的动物接种、收集及纯化 | 第21页 |
| ·SAG3-3’UTR 区 DNA 片段的获取 | 第21-22页 |
| ·GFP 基因片段的获取 | 第22-24页 |
| ·SAG3-3’UTR 及 GFP 基因的 PCR 扩增产物纯化 | 第24-25页 |
| ·T7 体外转录合成 SAG-3’UTR 区及 GFP 基因的 dsRNA | 第25-26页 |
| ·电穿孔法转染弓形虫 | 第26页 |
| ·SAG3 在虫体入侵中的作用 | 第26-30页 |
| ·SAG3 在虫体增殖中的作用 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-49页 |
| ·Hela 细胞易培养,易贴壁生长形成单层,镜下易观察 | 第31-32页 |
| ·弓形虫 SAG3 基因 3’UTR 区的体外扩增、纯化及 dsRNA 合成 | 第32页 |
| ·GFP 基因的体外扩增、纯化及 dsRNA 合成 | 第32页 |
| ·电转后弓形虫入侵 HELA细胞30min 镜下结果 | 第32-34页 |
| ·RT-PCR 检测转染后弓形虫在入侵的四个时间段 SAG3、TUB、MIC2、ROP2 和GRA2 的表达情况 | 第34-42页 |
| ·RT-PCR 检测转染后弓形虫在增殖的三个时间段 SAG3、TUB、AK、HXGPRT 和GRA2 的表达情况 | 第42-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| ·SAG3 的RNA 干扰效果 | 第49页 |
| ·入侵相关蛋白的表达情况变化 | 第49-50页 |
| ·增殖关键酶的表达情况变化 | 第50-51页 |
| ·微管蛋白的表达情况变化 | 第51-52页 |
| ·弓形虫的入侵机制 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54页 |
| 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录一 中英文对照 | 第62-63页 |
| 附录二 在读硕士期间发表的论文及奖励 | 第63-64页 |
| 附录三 质粒图谱 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
