中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
引言 | 第9-12页 |
第一部分 CPG-ODN 质粒的大量抽提及鉴定 | 第12-19页 |
1. 引言 | 第12页 |
2. 材料与方法 | 第12-18页 |
·材料 | 第12-14页 |
·主要仪器设备 | 第12页 |
·质粒和菌株 | 第12-13页 |
·主要试剂 | 第13页 |
·主要试剂配制 | 第13-14页 |
·方法 | 第14-18页 |
·感受态细胞制备 | 第14-15页 |
·质粒转化 | 第15页 |
·转化菌的小量液体培养和质粒抽提 | 第15-16页 |
·CpG-ODN 的鉴定 | 第16页 |
·CpG-ODN 的大量制备 | 第16-17页 |
·紫外分光光度法测定质粒的含量和纯度 | 第17-18页 |
3 结果 | 第18-19页 |
·CpG-ODN 的酶切鉴定 | 第18页 |
·质粒的产量和纯度 | 第18-19页 |
第二部分 多肽的设计与合成 | 第19-21页 |
1 引言 | 第19页 |
2 设计与合成 | 第19-21页 |
·设计 | 第19-20页 |
·合成 | 第20-21页 |
第三部分 CPG-ODN 和多肽刺激PBMC 效果研究 | 第21-31页 |
1 引言 | 第21页 |
2 材料与方法 | 第21-27页 |
·材料 | 第21-23页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·实验材料 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要试剂配制 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·人外周血单个核细胞的分离与培养 | 第23-24页 |
·人外周血单个核细胞刺激增殖与MTT 法检测 | 第24页 |
·PCR 引物的设计与合成 | 第24-25页 |
·人外周血单个核细胞刺激及PCR 检测 | 第25-27页 |
3. 结果 | 第27-29页 |
4. 讨论 | 第29-31页 |
第四部分 CPG-ODN 增强PBMC 对HEPG2 的杀伤作用 | 第31-42页 |
1 前言 | 第31页 |
2 材料和方法 | 第31-37页 |
·实验材料 | 第31-33页 |
·主要仪器设备 | 第31-32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·主要试剂配制 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-37页 |
·人外周血单个核细胞的分离与培养 | 第33页 |
·CpG-ODN 与多肽联合或单独刺激活化PBMC | 第33页 |
·HepG2 细胞的培养与6 孔板与96 孔板接种 | 第33-34页 |
·PBMC 杀伤HepG2 的MTT 检测 | 第34页 |
·PCR 引物的设计与合成 | 第34-35页 |
·PBMC 杀伤HepG2 后PCR 检测 | 第35-37页 |
3 结果 | 第37-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
全文总结 | 第47-48页 |
附录一 英文缩略词表 | 第48-49页 |
附录二 攻读学位期间发表的论文 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |