| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 1 材料与仪器 | 第12-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-41页 |
| ·HCV 核心基因的克隆与鉴定 | 第18-25页 |
| ·HCV 核心基因原核核表达载体的克隆与鉴定 | 第18-23页 |
| ·HCV 核心基因真核表达载体的克隆与鉴定 | 第23-25页 |
| ·M1GS 核酶基因的构建与克隆 | 第25-29页 |
| ·M1GS 核酶原核表达载体的构建 | 第25-28页 |
| ·M1GS 核酶的真核表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·HCV 核心基因MRNA 的合成和鉴定 | 第29-32页 |
| ·HCV 核心基因的原核表达载体的线性化及5′平滑 | 第29-30页 |
| ·靶基因RNA 的体外转录合成与鉴定 | 第30-32页 |
| ·M1GS 核酶的合成和鉴定 | 第32页 |
| ·胞外切割反应 | 第32-34页 |
| ·胞内切割实验 | 第34-41页 |
| ·细胞培养及转染 | 第34-38页 |
| ·HCV 核心蛋白的western blot 分析 | 第38-41页 |
| 3 结果 | 第41-56页 |
| ·HCV 核心基因的克隆与鉴定 | 第41-45页 |
| ·HCV 核心基因原核核表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·HCV 核心基因真核表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·M1GS 核酶基因的构建与克隆 | 第45-49页 |
| ·M1GS 核酶原核表达载体的构建 | 第45-48页 |
| ·M1GS DNA PCR 模板的制备 | 第45-46页 |
| ·四个M1GS DNA 片段的PCR 扩增 | 第46-47页 |
| ·四个PGEM-M1GS 载体的双酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·四个PGEM-M1GS载体的测序结果 | 第48页 |
| ·M1GS 核酶真核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·M1GS DNA 真核表达载体的双酶切鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·HCV 核心基因MRNA 的鉴定 | 第49-50页 |
| ·M1GS 核酶RNA 的鉴定 | 第50-51页 |
| ·胞外切割反应 | 第51-52页 |
| ·胞内切割实验 | 第52-56页 |
| ·靶mRNA 的RT-PCR 半定量 | 第52-54页 |
| ·HCV 核心蛋白的western blot 检测 | 第54-56页 |
| 4. 讨论 | 第56-62页 |
| ·靶位的确定 | 第56页 |
| ·GS 的设计 | 第56-57页 |
| ·M1GS 核酶基因引物的设计 | 第57页 |
| ·靶RNA 和M1GS 核酶的制备 | 第57-58页 |
| ·胞外切割系统的建立 | 第58-59页 |
| ·胞内切割系统的建立 | 第59-62页 |
| 5 小结及展望 | 第62-64页 |
| ·小结 | 第62页 |
| ·展望 | 第62-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-67页 |
| 附录一：缩略词表中英对照 | 第67-68页 |
| 附录二：PGEM3Z 载体的图谱 | 第68-69页 |
| 附录三：在读硕士期间撰写及发表科研论文 | 第69-70页 |
| 附录四： 测序图 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
