| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1.引言 | 第9-19页 |
| ·细小病毒科简介 | 第9-10页 |
| ·细小病毒科的特征 | 第9页 |
| ·细小病毒基因组结构的分类和特征 | 第9-10页 |
| ·细小病毒基因组的转录和表达 | 第10页 |
| ·浓核病毒亚科简介 | 第10-12页 |
| ·浓核病毒亚科的特征 | 第10页 |
| ·浓核病毒基因组结构的分类和特征 | 第10-11页 |
| ·浓核病毒基因组的转录和表达 | 第11-12页 |
| ·家蚕浓核病病毒简介 | 第12-15页 |
| ·家蚕浓核病毒的特征 | 第12页 |
| ·几种家蚕浓核病毒的比较 | 第12-13页 |
| ·家蚕浓核病病毒的基因组 | 第13页 |
| ·家蚕浓核病毒的病理及感染周期 | 第13-14页 |
| ·家蚕浓核病毒作为病毒载体的应用 | 第14-15页 |
| ·家蚕浓核病毒的研究进展 | 第15页 |
| ·制备多克隆抗体的意义 | 第15页 |
| ·ELISA的基本原理及应用 | 第15-16页 |
| ·pMAL~(TM)原核表达系统 | 第16-18页 |
| ·pMAL~(TM)原核表达系统简介 | 第16-17页 |
| ·质粒pMAL-c2X(AmpR)的相关信息及克隆策略 | 第17-18页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2.实验材料和方法 | 第19-29页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第19页 |
| ·主要实验材料 | 第19-21页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·药品和试剂 | 第19页 |
| ·细菌培养基与试剂配制 | 第19-20页 |
| ·常用溶液及配制 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-29页 |
| ·DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·VP4目的序列的PCR扩增 | 第22页 |
| ·DNA片段的回收与纯化 | 第22-23页 |
| ·含VP4序列原核表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第25页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及产物的SDS-PAGE分析 | 第25-26页 |
| ·融合蛋白的Western-Blotting鉴定 | 第26页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第26页 |
| ·BmDNV-1-VP4融合蛋白的分离纯化 | 第26-27页 |
| ·BmDNV-1-VP4多克隆抗体的制备 | 第27页 |
| ·多克隆抗体的生物活性测定 | 第27-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-36页 |
| ·VP4序列的克隆与重组质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·VP4序列的PCR扩增 | 第29页 |
| ·重组质粒pMAL-c2X-VP4的构建和酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·BmDNV-1-VP4融合蛋白的诱导表达与表达条件的优化 | 第30-32页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·表达条件的优化 | 第31-32页 |
| ·表达产物的纯化 | 第32-33页 |
| ·BmDNV-1-VP4融合蛋白及特异性抗体的Western-Blotting检测 | 第33-36页 |
| ·BmDNV-1-VP4融合蛋白的Western-Blotting检测 | 第33页 |
| ·特异性抗体的Western Blotting检测 | 第33-34页 |
| ·ELISA检测BmDNV-1-VP4抗血清效价 | 第34-36页 |
| 4.讨论和展望 | 第36-39页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·含目的基因重组质粒的构建 | 第36页 |
| ·目的基因的表达 | 第36页 |
| ·融合蛋白的纯化及抗体制备 | 第36-37页 |
| ·展望和总结 | 第37-39页 |
| ·BmDNV-1结构基因转录子(mRNA)的分离与鉴定 | 第37页 |
| ·BmDNV-1结构基因转录子剪辑修饰的研究 | 第37-38页 |
| ·总结 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 附录 本文缩写词 | 第43-44页 |
| 硕士期间发表论文 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
