| 英文缩写及中英文全名对照表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-25页 |
| 1. 高温对畜牧业的影响 | 第12页 |
| 2. 海南气候特点及三种动物介绍 | 第12-14页 |
| ·海南气候特点 | 第12页 |
| ·海南坡鹿 | 第12-13页 |
| ·海南黄牛 | 第13页 |
| ·五指山小型猪 | 第13-14页 |
| 3. 热应激反应机理的研究 | 第14-19页 |
| ·HSP的研究 | 第14-16页 |
| ·HSP的分类及其功能 | 第15-16页 |
| ·HSPs的基因特点和转录调控 | 第16页 |
| ·HSF的研究 | 第16-19页 |
| 4. 新基因克隆的方法及cDNA文库的构建方法 | 第19-23页 |
| ·常见全长基因克隆方法 | 第19-22页 |
| ·快速扩增cDNA末端 RACE策略 | 第19页 |
| ·使用 PCR技术扩增全长基因 | 第19-20页 |
| ·文库筛选法 | 第20-21页 |
| ·电子克隆 | 第21-22页 |
| ·构建cDNA文库的方法 | 第22-23页 |
| ·SMART法 | 第22页 |
| ·CAPture法 | 第22-23页 |
| ·另外几种常见的方法 | 第23页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料和方法 | 第25-37页 |
| 1. 材料 | 第25-28页 |
| ·三种动物材料的来源 | 第25页 |
| ·主要试剂和配制方法 | 第25-27页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·试剂配制方法 | 第25-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·主要分子生物学与生物信息学软件 | 第28页 |
| 2. 方法 | 第28-37页 |
| ·总 RNA的提取 | 第28-30页 |
| ·总 RNA的提取步骤 | 第28-29页 |
| ·RNA琼脂糖变性胶检测 | 第29-30页 |
| ·双链cDNA的合成及其与 PDNR-LIB的连接 | 第30-33页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30页 |
| ·cDNA双链的合成 | 第30-31页 |
| ·蛋白酶K消化及SfiI酶切 | 第31-32页 |
| ·双链cDNA的分级分离 | 第32页 |
| ·双链cDNA与载体连接 | 第32-33页 |
| ·原始文库的构建 | 第33-35页 |
| ·扩增文库的构建和文库质量分析 | 第35-36页 |
| ·文库筛选 | 第36-37页 |
| ·菌落 PCR筛选 | 第36页 |
| ·生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 第三章 结果 | 第37-49页 |
| 1. 海南三种动物cDNA文库的构建与质量鉴定 | 第37-43页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第37-41页 |
| ·总 RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第38-40页 |
| ·双链cDNA的分级分离 | 第40-41页 |
| ·文库质量鉴定 | 第41-43页 |
| ·文库滴度的测定 | 第41-42页 |
| ·文库重组率和插入片段 | 第42-43页 |
| 2. 文库筛选结果 | 第43-49页 |
| ·五指山小型猪PMSA6基因cDNA的克隆 | 第43-44页 |
| ·五指山小型猪PMSA6基因cDNA及氨基酸的序列特征分析 | 第44页 |
| ·五指山小型猪PMSA6基因cDNA生物信息学分析 | 第44-49页 |
| ·五指山小型猪与其它动物PMSA6基因的同源性比较分析 | 第44-46页 |
| ·五指山小型猪PMSA6蛋白跨膜区、疏水性及信号肽分析 | 第46-47页 |
| ·五指山小型猪PMSA6蛋白二级结构的预测 | 第47-48页 |
| ·五指山小型猪PMSA6蛋白质三级结构的预测 | 第48-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-53页 |
| 1. 关于总 RNA提取 | 第49-50页 |
| ·降低 RNAase污染 | 第49页 |
| ·RNA提取方法的改进 | 第49-50页 |
| 2. 关于文库的质量评价 | 第50-51页 |
| 3. 关于文库筛选工作 | 第51页 |
| 4. 小结 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 参与其他课题及发表论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
