| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-21页 |
| ·磷酸二酯酶的研究进展 | 第9-15页 |
| ·磷酸二酯酶的生理功能 | 第9-10页 |
| ·磷酸二酯酶的分类和性质 | 第10页 |
| ·磷酸二酯酶的组织分布 | 第10-13页 |
| ·磷酸二酯酶的结构 | 第13-15页 |
| ·同工酶PDE6的性质 | 第15-19页 |
| ·PDE6的组成和结构 | 第15-16页 |
| ·PDE6在光转导中的作用 | 第16-17页 |
| ·PDE6中γ亚基的抑制作用 | 第17-19页 |
| ·选题意义及论文设计 | 第19-21页 |
| ·本文选题意义 | 第19页 |
| ·本文设计思路 | 第19-21页 |
| 第二章 PDE6γ基因的克隆和重组质粒的构建 | 第21-35页 |
| ·引言 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| ·设计引物 | 第25页 |
| ·目的基因的扩增 | 第25-26页 |
| ·PCR产物回收 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·PCR产物与pGEM-T载体的连接和筛选 | 第27-29页 |
| ·质粒提取及酶切片段的制备 | 第29页 |
| ·载体pET-22b的酶切和回收 | 第29-30页 |
| ·载体pET-22b与目的基因片段连接及连接产物的转化 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的PCR和酶切检验 | 第31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-34页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第32页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·实验讨论 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 PDE6γ蛋白的表达和纯化 | 第35-52页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·常用试剂 | 第35-36页 |
| ·实验器材 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·主要试剂的配制 | 第36-38页 |
| ·重组的目的蛋白表达鉴定 | 第38页 |
| ·蛋白SDS-PAGE电泳 | 第38-40页 |
| ·PDE6γ目的蛋白的大量表达及纯化 | 第40页 |
| ·测定蛋白浓度(Folin法) | 第40-41页 |
| ·实验结果与讨论 | 第41-51页 |
| ·重组质粒表达筛选 | 第41-42页 |
| ·PDE6γ蛋白的分离纯化 | 第42-43页 |
| ·PDE6γ蛋白的MALDI-TOF-MS测定 | 第43-44页 |
| ·PDE6γ蛋白在变性条件下的纯化 | 第44-45页 |
| ·PDE6γ蛋白优化表达后的纯化 | 第45-48页 |
| ·PDE6γ重组蛋白分子量测定和浓度测定 | 第48-50页 |
| ·实验讨论 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 论文总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 英文缩写及中英文全名对照表 | 第58-59页 |
| 在读期间己发表和待发表论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |