| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 中英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| ·CALSARCIN家族的研究进展 | 第12-14页 |
| ·猪骨骼肌肌纤维生成的分子基础 | 第14-20页 |
| ·骨骼肌的生成过程及其调控 | 第14-15页 |
| ·肌纤维结构及其分类 | 第15-16页 |
| ·骨骼肌肌纤维对猪肉品质的影响 | 第16-17页 |
| ·钙调神经磷酸酶信号途径与骨骼肌发育的关系 | 第17-19页 |
| ·Calsarcin家族在肌纤维形成中的作用 | 第19-20页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第20-22页 |
| ·酵母双杂交的原理 | 第20-21页 |
| ·酵母双杂交系统的发展及应用 | 第21-22页 |
| ·酵母双杂交系统的局限性 | 第22页 |
| ·试验目的及技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 诱饵载体PGBKT7-CS2的构建及验证 | 第24-35页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·菌株和载体 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·试剂及培养基的配制 | 第25-26页 |
| ·仪器设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·Calsarcin-2基因编码区的克隆 | 第26-28页 |
| ·诱饵载体的制备 | 第28页 |
| ·诱饵蛋白的自激活活性及毒性验证 | 第28-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·Calsarcin-2基因CDS区的克隆 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的酶切 | 第31页 |
| ·pGBKT7载体的酶切 | 第31-32页 |
| ·诱饵载体的酶切 | 第32-33页 |
| ·酵母细胞Y187的表型验证 | 第33页 |
| ·DNA-BD融合蛋白转录活性及毒性的检测 | 第33页 |
| ·小结与讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 猪骨骼肌CDNA文库的构建 | 第35-44页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·猪骨骼肌样品 | 第35页 |
| ·菌株和质粒 | 第35-36页 |
| ·试剂及耗材 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-40页 |
| ·猪骨骼肌总RNA的提取与检测 | 第36-37页 |
| ·猪骨骼肌mRNA的分离 | 第37页 |
| ·猪骨骼肌ds cDNA文库的合成 | 第37-39页 |
| ·猪肌肉GAL4 AD cDNA融合文库的构建 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-42页 |
| ·猪骨骼肌总RNA的电泳结果 | 第40页 |
| ·猪骨骼肌mRNA的电泳结果 | 第40-41页 |
| ·ds cDNA的纯化结果 | 第41页 |
| ·猪骨骼肌GAL4 AD cDNA融合文库构建的结果 | 第41-42页 |
| ·小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 酵母双杂交筛选CALSARCIN-2蛋白互作蛋白 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·载体与菌株 | 第44页 |
| ·试剂盒 | 第44页 |
| ·培养基及其配置 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-49页 |
| ·杂交法筛选Calsarcin-2蛋白互作蛋白 | 第45-46页 |
| ·对照的小量杂交 | 第46-47页 |
| ·阳性克隆的初步鉴定 | 第47-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-50页 |
| ·杂交结果 | 第49页 |
| ·菌落PCR鉴定结果 | 第49页 |
| ·质粒酶切鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆测序及序列分析 | 第50页 |
| ·小结与讨论 | 第50-54页 |
| 第五章 小结 | 第54-56页 |
| ·本实验所获得的结果 | 第54页 |
| ·本研究的创新性 | 第54-55页 |
| ·本研究引起的思考 | 第55页 |
| ·下一步工作计划 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 附录1 | 第68-69页 |
| 附录2 | 第69-70页 |
| 附录3 | 第70-71页 |
| 攻读学位期间所发表的文章 | 第71页 |