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烟草根黑腐病菌的分子检测与室内药剂筛选

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-16页
第一章 引言第16-37页
 1 烟草根黑腐病概述第16-20页
   ·烟草根黑腐病的发生与危害第16页
   ·症状特点第16-17页
     ·苗期症状第17页
     ·大田症状第17页
   ·病原菌的生物学特性第17-19页
   ·流行规律第19-20页
     ·侵染循环第19页
     ·寄主的抗病性第19页
     ·土壤菌量及其影响因素第19-20页
 2 烟草根黑腐病的综合防治第20-22页
   ·选用抗病品种第20-21页
   ·培育无病壮苗第21页
   ·加强田间管理第21-22页
     ·合理轮作第21页
     ·合理施肥第21-22页
     ·适时移栽第22页
     ·提高栽培管理技术第22页
   ·化学药剂防治第22页
   ·生物防治第22页
 3 真菌RDNA 序列及其应用第22-31页
   ·真菌RDNA 序列分析第22-24页
   ·ITS 序列在真菌鉴定方面的应用第24-27页
   ·ITS 序列在真菌分子分类方面的应用第27-28页
   ·ITS 序列在植物病原真菌分子检测中的应用第28-31页
     ·病原真菌的纯培养物分类鉴定和寄主组织中病原真菌检测第28-30页
     ·在土壤或水体中病原真菌的检测方面第30页
     ·病原真菌的定量检测方面第30-31页
 4 PCR 引物的设计第31-36页
   ·引物的设计以及初步筛选第31-35页
   ·引物的二次筛选第35-36页
   ·引物的最终评估第36页
 5 本研究的立题依据和目的意义第36-37页
第二章 烟草根黑腐病菌的PCR 分子检测第37-52页
 1 材料与方法第37-45页
   ·材料第37-38页
     ·供试菌株第37-38页
     ·供试载体、宿主菌株第38页
     ·主要仪器第38页
   ·试验方法第38页
     ·病原菌的分离第38页
     ·土壤的准备与接种第38页
   ·基因组DNA 提取第38-40页
   ·RDNA-ITS 区扩增及序列分析第40-43页
     ·RDNA-ITS 区扩增第40页
     ·PCR 产物的纯化与回收第40-41页
     ·目的片段的连接第41页
     ·转化大肠杆菌感受态细胞DH5Α第41-42页
       ·感受态大肠杆菌的制备第41-42页
       ·转化大肠杆菌第42页
     ·质粒的小量提取第42-43页
   ·特异性引物的设计第43-44页
   ·引物特异性验证第44页
   ·发病组织及土壤中病原菌的检测第44-45页
     ·发病组织检测第44页
     ·土壤中病原菌的检测第44-45页
       ·稀释平板法检测土壤中病原菌第44-45页
       ·土壤平板分离法检测土壤中病原菌第45页
       ·PCR 检测土壤中病原菌第45页
   ·灵敏度检测第45页
 2 结果与分析第45-50页
   ·序列测定结果与分析第45-46页
   ·特异性引物设计第46页
   ·引物特异性验证第46-47页
   ·发病组织检测第47-48页
   ·土壤中病原菌的检测第48-49页
   ·引物的灵敏度第49-50页
 3 结论与讨论第50-52页
第三章 烟草根黑腐病的防治药剂筛选第52-59页
 1 材料与方法第52-54页
   ·供试病菌第52页
   ·实验仪器与供试药剂第52页
     ·实验仪器第52页
     ·供试药剂第52页
   ·实验方法第52-54页
     ·不同药剂对病原菌孢子萌发的抑制作用第52-53页
     ·不同药剂对病原菌菌丝生长的抑制作用第53页
     ·四种杀菌剂对烟草根黑腐病菌的室内毒力测定第53-54页
 2 结果与分析第54-57页
   ·不同药剂对烟草根黑腐病菌孢子萌发的抑制效果第54页
   ·不同药剂对烟草根黑腐病菌菌丝生长的抑制效果第54-55页
   ·四种药剂的抑菌效果第55-56页
   ·四种杀菌剂的毒力比较第56-57页
 3 讨论与结论第57-59页
参考文献第59-67页
附录第67-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表的论文第71页

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