中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-12页 |
英文缩写表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-37页 |
·苏云金芽胞杆菌概述 | 第13页 |
·质粒研究概述 | 第13-26页 |
·质粒概述 | 第13-14页 |
·蜡样芽胞杆菌族及其质粒 | 第14-15页 |
·蜡样芽胞杆菌族中的典型质粒研究 | 第15-20页 |
·蜡样芽胞杆菌族质粒的内含子及其研究 | 第20-22页 |
·蜡样芽胞杆菌族质粒的插入序列及其研究 | 第22-23页 |
·接合转移作用 | 第23-26页 |
·芽胞研究概述 | 第26-30页 |
·芽胞概述 | 第26页 |
·芽胞的形成 | 第26-30页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白 | 第30-33页 |
·苏云金芽胞杆菌 Cry 蛋白 | 第30-32页 |
·苏云金芽胞杆菌 Vip 蛋白 | 第32-33页 |
·本研究的立题依据以及研究路线 | 第33-37页 |
·本研究的立题依据 | 第33-34页 |
·本研究的技术路线 | 第34-37页 |
第二章 HD73 菌株中质粒拼接及其分析 | 第37-65页 |
·实验材料 | 第37-39页 |
·菌株与质粒 | 第37页 |
·酶及生化试剂 | 第37页 |
·培养基配制 | 第37-38页 |
·溶液及缓冲液 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-47页 |
·核苷酸与氨基酸序列的分析 | 第39-41页 |
·苏云金芽胞杆菌煮菌粗提 DNA | 第41页 |
·苏云金芽胞杆菌总 DNA 提取 | 第41-42页 |
·苏云金芽胞杆菌大质粒提取 | 第42页 |
·PCR 扩增 | 第42-43页 |
·高保真酶 PCR 产物加“A”碱基反应 | 第43页 |
·酶切反应 | 第43-44页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
·DNA 切胶回收 | 第44页 |
·PCR 纯化回收 | 第44页 |
·DNA 片段的连接 | 第44页 |
·大肠杆菌热激感受态细胞制备 | 第44-45页 |
·大肠杆菌热击转化 | 第45页 |
·苏云金芽胞杆菌电击感受态细胞制备 | 第45页 |
·苏云金芽胞杆菌电击转化 | 第45页 |
·大肠杆菌质粒提取方法 | 第45-46页 |
·基因序列的测定及分析 | 第46页 |
·Trizol 法提取总 RNA | 第46页 |
·RNA 的去 DNA | 第46页 |
·RNA 的纯化 | 第46-47页 |
·RNA 的反转录 | 第47页 |
·RT-PCR | 第47页 |
·实验结果 | 第47-63页 |
·HD73 菌株中 pHT73 质粒研究 | 第47-54页 |
·HD73 菌株中 pAW64 质粒研究 | 第54-59页 |
·HD73 菌株中 p1、p2、p3、p4 小质粒研究 | 第59-63页 |
·分析与讨论 | 第63页 |
·小结 | 第63-65页 |
第三章 HD73 菌株质粒缺失突变体比较研究 | 第65-81页 |
·实验材料 | 第65-66页 |
·菌株与质粒 | 第65页 |
·培养基配制 | 第65-66页 |
·仪器设备 | 第66页 |
·其它 | 第66页 |
·实验方法 | 第66-69页 |
·目的片段的扩增 | 第66-67页 |
·高温缺失质粒 | 第67页 |
·菌株生长曲线的绘制 | 第67页 |
·菌体 SDS-PAGE 电泳 | 第67-68页 |
·芽胞制备 | 第68页 |
·芽胞萌发 | 第68-69页 |
·活芽胞计数 | 第69页 |
·其它 | 第69页 |
·实验结果 | 第69-79页 |
·HD73 质粒缺失突变体的构建及鉴定 | 第69-71页 |
·HD73 野生型及其质粒缺失突变体的生长情况比较分析 | 第71-73页 |
·HD73 野生型及其质粒缺失突变体的菌体沉降速度比较分析 | 第73-74页 |
·HD73 野生型及其质粒缺失突变体菌体蛋白 SDS-PAGE 比较研究 | 第74-77页 |
·HD73 野生型及其质粒缺失突变体萌发率的比较研究 | 第77-78页 |
·HD73 野生型及其质粒缺失突变体芽胞产量的比较研究 | 第78-79页 |
·分析与讨论 | 第79-80页 |
·小结 | 第80-81页 |
第四章 HD△CRY1AC 突变体的构建及其研究 | 第81-97页 |
·实验材料 | 第81-82页 |
·菌株与质粒 | 第81页 |
·酶及生化试剂 | 第81-82页 |
·培养基配制 | 第82页 |
·仪器设备 | 第82页 |
·其它 | 第82页 |
·实验方法 | 第82-83页 |
·目的片段扩增 | 第82页 |
·其它 | 第82-83页 |
·实验结果 | 第83-95页 |
·cry1Ac 基因缺失片段的构建 | 第83-84页 |
·cry1Ac 基因缺失质粒的构建与鉴定 | 第84-86页 |
·cry1Ac 基因缺失突变体的筛选与验证 | 第86-89页 |
·HD△cry1Ac 突变体与 HD73-T4 突变体的比较研究 | 第89-95页 |
·分析与讨论 | 第95-96页 |
·小结 | 第96-97页 |
结论 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-113页 |
作者简介及攻读学位期间发表的论文 | 第113-115页 |
致谢 | 第115页 |