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苏云金芽胞杆菌HD73菌株质粒及其缺失突变体研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-12页
英文缩写表第12-13页
第一章 文献综述第13-37页
   ·苏云金芽胞杆菌概述第13页
   ·质粒研究概述第13-26页
     ·质粒概述第13-14页
     ·蜡样芽胞杆菌族及其质粒第14-15页
     ·蜡样芽胞杆菌族中的典型质粒研究第15-20页
     ·蜡样芽胞杆菌族质粒的内含子及其研究第20-22页
     ·蜡样芽胞杆菌族质粒的插入序列及其研究第22-23页
     ·接合转移作用第23-26页
   ·芽胞研究概述第26-30页
     ·芽胞概述第26页
     ·芽胞的形成第26-30页
   ·苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白第30-33页
     ·苏云金芽胞杆菌 Cry 蛋白第30-32页
     ·苏云金芽胞杆菌 Vip 蛋白第32-33页
   ·本研究的立题依据以及研究路线第33-37页
     ·本研究的立题依据第33-34页
     ·本研究的技术路线第34-37页
第二章 HD73 菌株中质粒拼接及其分析第37-65页
   ·实验材料第37-39页
     ·菌株与质粒第37页
     ·酶及生化试剂第37页
     ·培养基配制第37-38页
     ·溶液及缓冲液第38-39页
   ·实验方法第39-47页
     ·核苷酸与氨基酸序列的分析第39-41页
     ·苏云金芽胞杆菌煮菌粗提 DNA第41页
     ·苏云金芽胞杆菌总 DNA 提取第41-42页
     ·苏云金芽胞杆菌大质粒提取第42页
     ·PCR 扩增第42-43页
     ·高保真酶 PCR 产物加“A”碱基反应第43页
     ·酶切反应第43-44页
     ·琼脂糖凝胶电泳第44页
     ·DNA 切胶回收第44页
     ·PCR 纯化回收第44页
     ·DNA 片段的连接第44页
     ·大肠杆菌热激感受态细胞制备第44-45页
     ·大肠杆菌热击转化第45页
     ·苏云金芽胞杆菌电击感受态细胞制备第45页
     ·苏云金芽胞杆菌电击转化第45页
     ·大肠杆菌质粒提取方法第45-46页
     ·基因序列的测定及分析第46页
     ·Trizol 法提取总 RNA第46页
     ·RNA 的去 DNA第46页
     ·RNA 的纯化第46-47页
     ·RNA 的反转录第47页
     ·RT-PCR第47页
   ·实验结果第47-63页
     ·HD73 菌株中 pHT73 质粒研究第47-54页
     ·HD73 菌株中 pAW64 质粒研究第54-59页
     ·HD73 菌株中 p1、p2、p3、p4 小质粒研究第59-63页
   ·分析与讨论第63页
   ·小结第63-65页
第三章 HD73 菌株质粒缺失突变体比较研究第65-81页
   ·实验材料第65-66页
     ·菌株与质粒第65页
     ·培养基配制第65-66页
     ·仪器设备第66页
     ·其它第66页
   ·实验方法第66-69页
     ·目的片段的扩增第66-67页
     ·高温缺失质粒第67页
     ·菌株生长曲线的绘制第67页
     ·菌体 SDS-PAGE 电泳第67-68页
     ·芽胞制备第68页
     ·芽胞萌发第68-69页
     ·活芽胞计数第69页
     ·其它第69页
   ·实验结果第69-79页
     ·HD73 质粒缺失突变体的构建及鉴定第69-71页
     ·HD73 野生型及其质粒缺失突变体的生长情况比较分析第71-73页
     ·HD73 野生型及其质粒缺失突变体的菌体沉降速度比较分析第73-74页
     ·HD73 野生型及其质粒缺失突变体菌体蛋白 SDS-PAGE 比较研究第74-77页
     ·HD73 野生型及其质粒缺失突变体萌发率的比较研究第77-78页
     ·HD73 野生型及其质粒缺失突变体芽胞产量的比较研究第78-79页
   ·分析与讨论第79-80页
   ·小结第80-81页
第四章 HD△CRY1AC 突变体的构建及其研究第81-97页
   ·实验材料第81-82页
     ·菌株与质粒第81页
     ·酶及生化试剂第81-82页
     ·培养基配制第82页
     ·仪器设备第82页
     ·其它第82页
   ·实验方法第82-83页
     ·目的片段扩增第82页
     ·其它第82-83页
   ·实验结果第83-95页
     ·cry1Ac 基因缺失片段的构建第83-84页
     ·cry1Ac 基因缺失质粒的构建与鉴定第84-86页
     ·cry1Ac 基因缺失突变体的筛选与验证第86-89页
     ·HD△cry1Ac 突变体与 HD73-T4 突变体的比较研究第89-95页
   ·分析与讨论第95-96页
   ·小结第96-97页
结论第97-99页
参考文献第99-113页
作者简介及攻读学位期间发表的论文第113-115页
致谢第115页

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