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华山新麦草附加系抗条锈病基因的遗传作图和小麦条锈菌毒性突变体的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
前言第12-14页
第一篇 小麦-华山新麦草附加系H9014-121-5-5-9 抗条锈病基因的遗传分析和SSR 标记第14-37页
 第一章 文献综述第14-25页
   ·植物抗病遗传学的分子基础第14页
   ·小麦对条锈菌抗病性的分类第14-15页
     ·小种专化型抗性第15页
     ·非小种专化型抗病性第15页
   ·小麦抗条锈菌基因的来源第15-16页
   ·已正式命名的小麦抗条锈菌基因第16-17页
   ·已获得分子标记的小麦抗条锈基因第17-18页
   ·小麦抗病基因遗传研究方法第18-21页
     ·常规表型遗传分析第19页
       ·常规杂交法(经典遗传分析方法)第19页
       ·基因推导分析法第19页
     ·小麦抗病基因定位的研究方法第19-21页
       ·非整倍体分析第19-20页
       ·细胞遗传学第20页
       ·分子标记法第20-21页
   ·小麦抗条锈病基因的分子标记与应用第21-24页
     ·抗病基因分析群体类型第21页
       ·近等基因系法(Near-Isogenic Lines,NIL)第21页
       ·分离群体分组分析法(Bulked Segregant Analysis,BSA)第21页
     ·基于基因组DNA 的分子标记技术第21-23页
       ·随机扩增多态性DNA(Randomly Amplified Polymorphic DNA,RAPD)第21-22页
       ·简单重复序列(Simple Sequence Repeat,SSR)第22页
       ·扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)第22-23页
       ·抗病基因类似序列(Resistance gene analogue,RGA)第23页
       ·相关序列扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism, SRAP)第23页
     ·SSR 标记在小麦抗病基因定位中的应用第23-24页
   ·本研究的意义第24-25页
 第二章 小麦-华山新麦草附加系H9014-121-5-5-9 抗条锈病基因的遗传分析和SSR标记第25-37页
   ·材料和方法第25页
     ·植物材料第25页
     ·病原菌第25页
     ·所需试剂与仪器第25页
   ·方法第25-31页
     ·苗期抗条锈性鉴定和遗传分析第25-26页
       ·菌种的繁殖第25页
       ·苗期抗病性鉴定和遗传分析第25-26页
       ·反应型调查标准及抗感划分标准第26页
       ·数据的分析与处理第26页
     ·抗条锈病基因分子图谱的构建第26-31页
       ·小麦基因组DNA 的提取、纯化和检测第26-28页
       ·抗病池和感病池的构建及多态性标记的筛选第28-29页
       ·微卫星引物PCR 扩增及电泳分析第29-30页
       ·遗传图谱的构建第30-31页
     ·H9014-121-5-5-9 及其杂交后代的染色体数目鉴定第31页
   ·结果第31-35页
       ·H9014-121-5-5-9 抗条锈病性的来源分析第31页
       ·H9014-121-5-5-9 抗条锈病基因的遗传分析第31-32页
     ·抗条锈基因YRHA 的SSR 分子标记图第32-34页
       ·H9014-121-5-5-9 及其杂交后代的染色体数目第34-35页
   ·讨论第35-37页
第二篇. 基因枪诱导小麦条锈菌毒性突变菌株的研究第37-64页
 第一章 文献综述第37-52页
   ·小麦条锈病的危害及其毒性变异的研究第37页
   ·植物病原真菌诱变的研究第37页
   ·小麦条锈菌毒性变异的研究第37-39页
     ·异核作用第38页
     ·基因突变第38-39页
   ·人工诱变方法第39-46页
     ·物理诱变第39-40页
     ·化学诱变第40-41页
     ·生物诱变因素第41-46页
   ·基因枪转化技术的发展和应用第46-49页
     ·基因枪技术的产生、发展及原理第46-47页
     ·基因枪技术的应用第47-49页
       ·基因枪技术的优点及不足第47-48页
       ·影响基因枪技术转化效率的主要因素第48页
       ·基因枪技术的在植物病原真菌遗传转化中的应用第48-49页
   ·插入序列的检测方法第49-51页
     ·PCR 检测第49-50页
     ·SOUTHERN 印迹杂交第50页
     ·实时荧光定量PCR第50-51页
   ·本研究的目的和意义第51-52页
 第二章 基因枪转化的三个小麦条锈菌毒性突变体的研究第52-64页
   ·材料与方法第52-59页
     ·供试突变体菌株挑取、鉴定与保存第52页
     ·质粒第52页
     ·主要仪器设备第52页
     ·试剂配置第52-54页
       ·细菌培养和质粒扩增所用试剂第52-53页
       ·电泳所用试剂第53页
       ·基因枪转化过程中所用试剂第53页
       ·GUS 表达活性检测试剂第53页
       ·小麦条锈菌DNA 提取试剂第53-54页
       ·Southern blot 过程中主要试剂第54页
     ·方法第54-59页
       ·E.coLi 菌株培养第54页
       ·质粒提取第54-55页
       ·GUS 基因表达的检测第55页
       ·突变菌株gus 基因的PCR 检测第55-56页
       ·突变菌株gus 基因southern blot 检测第56-58页
       ·毒性鉴定第58-59页
   ·结果第59-62页
     ·GUS 基因在突变菌夏孢子中的表达第59页
     ·突变体中GUS 基因的PCR 检测第59页
     ·GUS 基因的SOUTHERN 杂交第59-60页
     ·突变体的毒性鉴定第60-62页
   ·讨论第62-64页
参考文献第64-73页
致谢第73-74页
作者简介第74页

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