| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 木质纤维素资源及生物炼制 | 第13-16页 |
| 1.1.1 木质纤维素资源现状及结构 | 第13-14页 |
| 1.1.2 木质纤维素生物炼制 | 第14-16页 |
| 1.2 木质纤维素来源抑制物的形成及抑制机理 | 第16-19页 |
| 1.2.1 呋喃醛类抑制物的产生及其抑制机理 | 第17-18页 |
| 1.2.2 酚醛类抑制物的产生及其抑制机理 | 第18页 |
| 1.2.3 有机弱酸类抑制物的产生及其抑制机理 | 第18-19页 |
| 1.3 微生物对木质纤维素来源抑制物的脱毒 | 第19-23页 |
| 1.3.1 微生物对呋喃醛类抑制物的转化机理 | 第20-21页 |
| 1.3.2 微生物对酚醛类抑制物转化机理 | 第21-23页 |
| 1.3.3 微生物对有机弱酸类抑制物转化机理 | 第23页 |
| 1.4 生物基产品的合成 | 第23-27页 |
| 1.4.1 木质纤维素柠檬酸合成 | 第24页 |
| 1.4.2 烃类化合物的合成 | 第24-27页 |
| 1.5 本论文立题依据及主要研究内容 | 第27-29页 |
| 第2章 黑曲霉Aspergillus niger利用生物脱毒玉米秸秆生产柠檬酸 | 第29-44页 |
| 2.1 引言 | 第29-30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 原料 | 第30页 |
| 2.2.2 酶和试剂 | 第30页 |
| 2.2.3 菌种和培养方法 | 第30-32页 |
| 2.2.4 原料预处理和生物脱毒 | 第32页 |
| 2.2.5 玉米秸秆水解液制备 | 第32页 |
| 2.2.6 玉米秸秆水解液组分测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 柠檬酸得率计算 | 第33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-42页 |
| 2.3.1 A.niger SIIM M288对木质纤维素来源抑制物的耐受 | 第33-36页 |
| 2.3.2 生物脱毒玉米秸秆水解液中氮源和无机盐组分对柠檬酸发酵的影响 | 第36-39页 |
| 2.3.3 高浓度柠檬酸发酵过程中的发酵参数的优化 | 第39-41页 |
| 2.3.4 利用生物脱毒玉米秸秆水解液进行柠檬酸放大发酵 | 第41-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-44页 |
| 第3章 氧化葡萄糖酸杆菌Gluconobacter oxydans降解呋喃醛和酚醛的转录组分析 | 第44-66页 |
| 3.1 引言 | 第44-45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 实验菌株和试剂 | 第45页 |
| 3.2.2 培养基和菌株培养方法 | 第45页 |
| 3.2.3 呋喃醛和酚醛抑制物的耐受及降解实验 | 第45页 |
| 3.2.4 分析方法 | 第45-46页 |
| 3.2.5 DNA芯片实验 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-65页 |
| 3.3.1 G.oxydans DSM 2003对呋喃醛和酚醛类抑制物的耐受及转化 | 第47-50页 |
| 3.3.2 G.oxydans DSM 2003在呋喃醛和酚醛类抑制物胁迫下的转录组 | 第50-53页 |
| 3.3.3 呋喃醛和酚醛在G.oxydans DSM 2003中的转化路径 | 第53-57页 |
| 3.3.4 呋喃醛和酚醛的转化对葡萄糖代谢的影响 | 第57-64页 |
| 3.3.5 呋喃醛和酚醛类的转化与物质转运 | 第64-65页 |
| 3.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 第4章 谷氨酸棒状杆菌Corynebacterium glutamicum降解呋喃醛和酚醛的转录水平分析 | 第66-93页 |
| 4.1 引言 | 第66-67页 |
| 4.2 材料与方法 | 第67-78页 |
| 4.2.1 实验菌株和试剂 | 第67-70页 |
| 4.2.2 培养基和菌株培养方法 | 第70页 |
| 4.2.3 呋喃醛和酚醛抑制物的耐受和降解实验 | 第70-71页 |
| 4.2.4 重组质粒构建 | 第71-72页 |
| 4.2.5 感受态制备和阳性克隆子的筛选 | 第72页 |
| 4.2.6 重组菌株的抑制物转化性能分析 | 第72页 |
| 4.2.7 分析方法 | 第72-73页 |
| 4.2.8 荧光定量PCR(qRT-PCR)实验 | 第73-78页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第78-91页 |
| 4.3.1 C. glutamicum S9114对呋喃醛和酚醛类抑制物的耐受和降解 | 第78-81页 |
| 4.3.2 呋喃醛和酚醛胁迫下C.glutamicum S9114的qRT-PCR定量分析 | 第81-88页 |
| 4.3.3 过表达重组C. glutamicum菌株对呋喃醛和酚醛的转化 | 第88-91页 |
| 4.4 本章小结 | 第91-93页 |
| 第5章 细菌微生物中脂肪烃合成路径的构建与初步评价 | 第93-114页 |
| 5.1 引言 | 第93-94页 |
| 5.2 材料与方法 | 第94-103页 |
| 5.2.1 实验菌株和试剂 | 第94页 |
| 5.2.2 培养基及培养条件 | 第94-101页 |
| 5.2.3 目的基因扩增及重组质粒构建 | 第101-102页 |
| 5.2.4 感受态制备及阳性克隆子的筛选 | 第102页 |
| 5.2.5 RED重组 | 第102-103页 |
| 5.2.6 SDS-PAGE | 第103页 |
| 5.2.7 脂肪烃的提取与GC-MS检测 | 第103页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第103-112页 |
| 5.3.1 E.coli中脂肪烃合成路径的构建 | 第103-105页 |
| 5.3.2 E.coli重组菌脂肪烃合成产量的提升 | 第105-110页 |
| 5.3.3 C.glutamicum S9114中脂肪烃合成路径的构建 | 第110页 |
| 5.3.4 C.glutamicum S9114重组菌中长链脂肪烃合成路径推测 | 第110-112页 |
| 5.4 本章小结 | 第112-114页 |
| 第6章 结论与展望 | 第114-117页 |
| 6.1 结论 | 第114-115页 |
| 6.2 创新点 | 第115页 |
| 6.3 展望 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-132页 |
| 附录Ⅰ 主要试剂 | 第132-134页 |
| 附录Ⅱ 密码子优化后基因序列 | 第134-135页 |
| 学术成果 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136页 |
