| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-15页 |
| 1.2 脂肪细胞分化和脂质代谢研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 脂肪形成的体外模型 | 第15-16页 |
| 1.2.2 脂肪细胞的分化 | 第16-18页 |
| 1.2.3 脂肪细胞的脂质代谢 | 第18-19页 |
| 1.3 KLF家族成员的发现、命名及结构 | 第19-29页 |
| 1.3.1 KLF家族成员对脂肪细胞分化和脂质代谢的作用 | 第20-21页 |
| 1.3.2 促进脂肪细胞形成的KLF家族基因 | 第21-26页 |
| 1.3.3 抑制脂肪细胞分化的KLF基因 | 第26-28页 |
| 1.3.4 脂肪形成中KLF家族成员之间的关系 | 第28-29页 |
| 1.4 基因功能研究常用方法 | 第29-30页 |
| 1.4.1 过表达载体系统 | 第29页 |
| 1.4.2 小干扰RNA(siRNA) | 第29-30页 |
| 1.5 本研究的目的、意义和内容 | 第30-32页 |
| 1.5.1 研究的目的和意义 | 第30页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 牛KLF3和KLF15基因在牛不同组织的特异性表达分析 | 第32-42页 |
| 2.1 材料和方法 | 第32-34页 |
| 2.1.1 材料 | 第32页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.2 结果分析 | 第34-39页 |
| 2.2.1 KLF3和KLF15基因基本理化性质分析 | 第34-35页 |
| 2.2.2 基因系统进化树 | 第35-36页 |
| 2.2.3 牛KLF3和KLF15的疏水性和蛋白质三级结构预测 | 第36-37页 |
| 2.2.4 KLF3和KLF15亚细胞定位 | 第37页 |
| 2.2.5 组织样总RNA提取后检测 | 第37-38页 |
| 2.2.6 KLF3在新生牛和成年牛各组织中的表达规律分析 | 第38-39页 |
| 2.2.7 KLF15在新生和成年秦川牛各组织中的表达规律分析 | 第39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-41页 |
| 2.3.1 KLF3和KLF15在新生牛和成年牛的组织表达分析 | 第39-40页 |
| 2.3.2 序列同源性分析 | 第40-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 第三章 牛KLF15基因过表达载体包装和siRNA筛选 | 第42-49页 |
| 3.1 材料和方法 | 第42-45页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2 结果 | 第45-47页 |
| 3.2.1 pATrack-KLF15穿梭载体的构建 | 第45页 |
| 3.2.2 pAd-KLF15病毒重子构建和鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.3 重组腺病毒的包装、扩增和滴度测定 | 第46页 |
| 3.2.4 KLF15siRNA干扰效率测定 | 第46-47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 牛KLF15基因牛脂肪细胞分化和脂质代谢的作用 | 第49-60页 |
| 4.1 材料和方法 | 第49-52页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.2 结果 | 第52-58页 |
| 4.2.1 牛前脂肪细胞的分离与培养 | 第52页 |
| 4.2.2 病毒侵染前体脂肪细胞最佳MOI测定和过表达效率测定 | 第52-53页 |
| 4.2.3 KLF15基因在牛前体脂肪细胞诱导分化过程中的时序表达规律 | 第53-54页 |
| 4.2.4 KLF15对脂肪细胞分化和脂质代谢的作用 | 第54-56页 |
| 4.2.5 油红O染色和甘油三酯含量测定 | 第56-58页 |
| 4.3 讨论 | 第58-59页 |
| 4.4 小结 | 第59-60页 |
| 第五章 牛KLF3基因对牛脂肪细胞分化和脂质代谢的作用 | 第60-68页 |
| 5.1 材料和方法 | 第60-62页 |
| 5.1.1 材料 | 第60页 |
| 5.1.2 方法 | 第60-62页 |
| 5.2 结果 | 第62-66页 |
| 5.2.1 牛KLF3基因在脂肪细胞中的表达规律分析 | 第62页 |
| 5.2.3 干扰KLF3基因对牛前脂肪细胞分化和脂质代谢的影响 | 第62-65页 |
| 5.2.4 油红O染色和甘油三酯含量的测定 | 第65-66页 |
| 5.3 讨论 | 第66-67页 |
| 5.4 结论 | 第67-68页 |
| 第六章 牛KLF3基因表达及SNPs与秦川牛脂质沉积的关联分析 | 第68-77页 |
| 6.1 材料和方法 | 第68-71页 |
| 6.1.1 材料 | 第68-69页 |
| 6.1.2 方法 | 第69-71页 |
| 6.2 结果 | 第71-75页 |
| 6.2.1 KLF3基因多态位点检测及遗传多样性分析 | 第71-72页 |
| 6.2.2 LD和单倍型分析 | 第72-73页 |
| 6.2.3 不同组合型在秦川牛中对脂质沉积性状的影响 | 第73页 |
| 6.2.4 转录因子预测 | 第73-74页 |
| 6.2.5 启动子活性测定 | 第74-75页 |
| 6.3 讨论 | 第75-76页 |
| 6.4 小结 | 第76-77页 |
| 第七章 牛KLF15基因对KLF3基因的转录调控研究 | 第77-91页 |
| 7.1 材料和方法 | 第78-85页 |
| 7.1.1 材料和试剂 | 第78页 |
| 7.1.2 方法 | 第78-85页 |
| 7.2 结果 | 第85-89页 |
| 7.2.1 KLF15基因在牛脂肪细胞中对KLF3的转录调控作用 | 第85页 |
| 7.2.2 KLF3基因的转录起始位点 | 第85-86页 |
| 7.2.3 KLF3启动子的扩增 | 第86页 |
| 7.2.4 牛脂肪细胞中KLF15基因对KLF3基因启动子活性的作用 | 第86-88页 |
| 7.2.5 EMSA和ChIP验证KLF15结合于KLF3的核心启动子区 | 第88-89页 |
| 7.3 讨论 | 第89-90页 |
| 7.4 小结 | 第90-91页 |
| 第八章 结论及创新点 | 第91-92页 |
| 8.1 结论 | 第91页 |
| 8.2 创新点 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-104页 |
| 附录 | 第104-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 作者简介 | 第114-115页 |
