| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-31页 |
| 昆虫天然免疫反应简介 | 第13-19页 |
| 1.1 体液免疫 | 第13-16页 |
| 1.1.1 黑化反应 | 第13-15页 |
| 1.1.2 抗菌肽的产生 | 第15-16页 |
| 1.2 细胞免疫 | 第16-19页 |
| 1.2.1 吞噬作用 | 第17-18页 |
| 1.2.2 集结作用 | 第18页 |
| 1.2.3 包囊作用 | 第18-19页 |
| 昆虫模式识别蛋白简介 | 第19-31页 |
| 1.3 病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP) | 第19-20页 |
| 1.4 模式识别受体(pattern recognition reporter, PRR) | 第20页 |
| 1.5 昆虫肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition protein,PGRP) | 第20-24页 |
| 1.5.1 PGRPs的蛋白结构特点 | 第20-21页 |
| 1.5.2 PGRPs在昆虫天然免疫反应中的功能 | 第21-24页 |
| 1.6 昆虫C型凝集素(C-type lectin,CTL) | 第24-29页 |
| 1.6.1 CTLs的蛋白结构特点 | 第25-27页 |
| 1.6.2 CTLs在昆虫天然免疫反应中的功能 | 第27-29页 |
| 1.7 亚洲玉米螟天然免疫反应研究进展 | 第29-30页 |
| 1.8 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 研究技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 玉米螟血淋巴细胞的鉴定及细胞免疫反应初探 | 第32-41页 |
| 引言 | 第32页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第33页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第33页 |
| 2.1.3 主要试剂配方 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 2.2.1 亚洲玉米螟幼虫感染球孢白僵菌后体态及组织观察 | 第33页 |
| 2.2.2 亚洲玉米螟血淋巴细胞种类鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.3 总血淋巴细胞计数 | 第34页 |
| 2.2.4 血淋巴细胞吞噬和集结作用观察 | 第34页 |
| 2.2.5 血淋巴细胞包囊作用观察 | 第34-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.3.1 球孢白僵菌侵染亚洲玉米螟幼虫后的现象观察 | 第35页 |
| 2.3.2 亚洲玉米螟血淋巴细胞的鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.3 亚洲玉米螟总血淋巴细胞计数 | 第36-37页 |
| 2.3.4 亚洲玉米螟幼虫血淋巴细胞对球孢白僵菌分生孢子的吞噬和集结 | 第37-39页 |
| 2.3.5 亚洲玉米螟幼虫血淋巴细胞对QFF凝胶颗粒的包囊 | 第39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 球孢白僵菌侵染后的玉米螟幼虫转录组分析 | 第41-57页 |
| 引言 | 第41页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第41-42页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第42页 |
| 3.1.3 主要试剂配方 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 球孢白僵菌诱导亚洲玉米螟幼虫和RNA提取 | 第42-43页 |
| 3.2.2 文库构建和Illumina测序 | 第43-44页 |
| 3.2.3 转录组数据的组装和注释 | 第44页 |
| 3.2.4 差异表达基因的鉴定 | 第44页 |
| 3.2.5 亚洲玉米螟免疫相关基因的鉴定和序列分析 | 第44页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR分析 | 第44-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-55页 |
| 3.3.1 亚洲玉米螟的转录组测序和Unigene组装 | 第46-47页 |
| 3.3.2 Unigene的鉴定,功能注释和分类 | 第47-50页 |
| 3.3.3 球孢白僵菌感染后的差异表达基因的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.3.4 亚洲玉米螟免疫相关基因的鉴定 | 第51-54页 |
| 3.3.5 部分差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 肽聚糖识别蛋白PGRP1的重组表达与功能研究 | 第57-77页 |
| 引言 | 第57页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-60页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第58页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第58-59页 |
| 4.1.3 主要试剂配方 | 第59-60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-68页 |
| 4.2.1 病原菌感染和组织提取 | 第60页 |
| 4.2.2 RNA提取和cDNA合成 | 第60页 |
| 4.2.3 mRNA水平表达量变化 | 第60-61页 |
| 4.2.4 模式识别受体PGRP1的表达载体构建 | 第61-63页 |
| 4.2.5 模式识别受体PGRP1重组表达与纯化 | 第63-65页 |
| 4.2.6 病原菌感染后玉米螟幼虫血淋巴中PGRP1检测 | 第65页 |
| 4.2.7 重组PGRP1和菌体的结合实验 | 第65页 |
| 4.2.8 重组PGRP1对细菌和真菌的凝集作用 | 第65页 |
| 4.2.9 重组PGRP1对亚洲玉米螟血浆酚氧化酶活性的影响测定 | 第65-66页 |
| 4.2.10 重组PGRP1对亚洲玉米螟血浆IEARase活性的影响测定 | 第66页 |
| 4.2.11 干扰PGRP1表达后对免疫相关基因表达的影响 | 第66-68页 |
| 4.3 结果与分析 | 第68-75页 |
| 4.3.1 PGRP1的氨基酸序列分析 | 第68-69页 |
| 4.3.2 亚洲玉米螟PGRP1的时空及诱导表达模式分析 | 第69-70页 |
| 4.3.3 亚洲玉米螟PGRP1的重组表达与纯化 | 第70页 |
| 4.3.4 亚洲玉米螟PGRP1可与病原菌结合 | 第70-71页 |
| 4.3.5 亚洲玉米螟PGRP1可促进病原菌凝集 | 第71-72页 |
| 4.3.6 亚洲玉米螟PGRP1可增强血浆的酚氧化酶活性 | 第72-73页 |
| 4.3.7 亚洲玉米螟PGRP1可增强血浆的IEARase活性 | 第73-74页 |
| 4.3.8 干扰PGRP1表达后对免疫相关基因表达的影响 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-77页 |
| 第五章 C型凝集素IML-1和CTL-S4的重组表达与功能分析 | 第77-105页 |
| 引言 | 第77-78页 |
| 5.1 实验材料 | 第78页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第78页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第78页 |
| 5.1.3 主要试剂配方 | 第78页 |
| 5.2 实验方法 | 第78-85页 |
| 5.2.1 亚洲玉米螟CTLs的结构域特征预测 | 第78-79页 |
| 5.2.2 序列比对和系统发育树分析 | 第79页 |
| 5.2.3 亚洲玉米螟CTLs三级结构建模 | 第79页 |
| 5.2.4 病原菌感染和组织提取 | 第79页 |
| 5.2.5 RNA提取和cDNA合成 | 第79页 |
| 5.2.6 亚洲玉米螟IML-1和CTL-S4的时空表达谱 | 第79页 |
| 5.2.7 亚洲玉米螟IML-1和CTL-S4表达载体构建 | 第79-81页 |
| 5.2.8 模式识别受体IML-1和CTL-S4的重组表达与纯化 | 第81-83页 |
| 5.2.9 重组IML-1和CTL-S4的纯化结果鉴定 | 第83页 |
| 5.2.10 重组IML-1和CTL-S4与菌体的结合实验 | 第83页 |
| 5.2.11 重组IML-1和CTL-S4与LPS、PGN、Curdlan的结合实验 | 第83-84页 |
| 5.2.12 重组IML-1和CTL-S4对细菌和真菌的凝集作用 | 第84页 |
| 5.2.13 重组IML-1和CTL-S4对血淋巴细胞包囊作用的影响 | 第84页 |
| 5.2.14 重组IML-1和CTL-S4对亚洲玉米螟血浆酚氧化酶活性的影响测定 | 第84-85页 |
| 5.2.15 重组IML-1和CTL-S4对亚洲玉米螟血浆IEARase活性的影响测定 | 第85页 |
| 5.3 结果与分析 | 第85-102页 |
| 5.3.1 亚洲玉米螟CTLs的序列分析 | 第85-93页 |
| 5.3.2 亚洲玉米螟IML-1和CTL-S4的时空表达模式分析 | 第93-94页 |
| 5.3.3 亚洲玉米螟IML-1和CTL-S4的重组表达与纯化 | 第94-95页 |
| 5.3.4 IML-1和CTL-S4可与微生物菌体及细胞壁组分结合 | 第95-97页 |
| 5.3.5 亚洲玉米螟IML-1和CTL-S4可促进微生物的凝集 | 第97-100页 |
| 5.3.6 IML-1和CTL-S4可促进血淋巴细胞的包囊和黑化作用 | 第100-101页 |
| 5.3.7 IML-1和CTL-S4可导致血浆酚氧化酶活性增加 | 第101页 |
| 5.3.8 IML-1和CTL-S4可导致血浆IEARase活性增加 | 第101-102页 |
| 5.4 讨论 | 第102-105页 |
| 第六章 结论与展望 | 第105-108页 |
| 参考文献 | 第108-125页 |
| 致谢 | 第125-127页 |
| 附录 | 第127-135页 |
| 个人简介 | 第135页 |
