| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 PRRSV的病原特征 | 第11-12页 |
| 1.1.1 PRRSV的结构特点 | 第11页 |
| 1.1.2 基因组特点及编码的蛋白质 | 第11-12页 |
| 1.1.3 PRRSV的生物学特征 | 第12页 |
| 1.2 PRRS流行病学特点 | 第12页 |
| 1.3 传播及病变特点 | 第12-13页 |
| 1.4 PRRS防治 | 第13-14页 |
| 1.4.1 传统灭活苗 | 第13页 |
| 1.4.2 减毒苗 | 第13-14页 |
| 1.4.3 DNA苗 | 第14页 |
| 1.4.4 活载体疫苗 | 第14页 |
| 1.5 PRRSV的病毒样颗粒 | 第14-17页 |
| 1.5.1 VLPs组成与特性 | 第14-15页 |
| 1.5.2 VLPs的免疫学机制 | 第15页 |
| 1.5.3 表达VLPs的系统 | 第15页 |
| 1.5.4 VLPs的优势 | 第15-16页 |
| 1.5.5 国内外的研究进展 | 第16页 |
| 1.5.6 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 青海株PRRSV的病毒纯化与形态观察 | 第17-21页 |
| 2.1 材料和方法 | 第17-18页 |
| 2.1.1 毒株和Marc-145细胞来源 | 第17页 |
| 2.1.2 实验仪器和设备 | 第17页 |
| 2.1.3 试剂及溶液配制 | 第17页 |
| 2.1.4 毒价测定 | 第17-18页 |
| 2.1.5 病毒纯化 | 第18页 |
| 2.1.6 电镜观察 | 第18页 |
| 2.2 结果 | 第18-20页 |
| 2.2.1 PRRSV的繁殖 | 第18-19页 |
| 2.2.2 病毒TCID_(50)测定与病毒纯化 | 第19-20页 |
| 2.2.3 病毒粒子电镜观察 | 第20页 |
| 2.3 讨论 | 第20-21页 |
| 第三章 标记型PRRSV病毒样颗粒的制备与鉴定 | 第21-44页 |
| 3.1 材料 | 第21页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 3.1.2 试剂 | 第21页 |
| 3.1.3 设备与仪器 | 第21页 |
| 3.2 方法 | 第21-31页 |
| 3.2.1 溶液配制 | 第21-22页 |
| 3.2.2 设计引物 | 第22页 |
| 3.2.3 构建pMD-18T-GP5-M-N重组质粒 | 第22-24页 |
| 3.2.4 pFastBacTMdual-Myc-GP5重组质粒的制备 | 第24-25页 |
| 3.2.5 pFastBacHTB-N重组质粒的制备 | 第25-26页 |
| 3.2.6 重组杆状病毒质粒的制备 | 第26-27页 |
| 3.2.7 Sf9与HighFive昆虫细胞培养及重组杆状病毒的产生 | 第27-28页 |
| 3.2.8 重组蛋白的表达与鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.9 标记型VLPs的电镜观察 | 第29-30页 |
| 3.2.10 间接ELISA检测标记型VLPs的反应原性 | 第30-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-42页 |
| 3.3.1 重组质粒的鉴定 | 第31-34页 |
| 3.3.2 重组杆粒的鉴定 | 第34-36页 |
| 3.3.3 重组杆状病毒的产生及P3代病毒储液TCID_(50)的测定 | 第36-37页 |
| 3.3.4 重组杆状病毒感染HF细胞及重组蛋白大量表达 | 第37页 |
| 3.3.5 重组蛋白的SDS-PAGE、Westernblotting和IFA鉴定 | 第37-40页 |
| 3.3.6 VLPs的电镜观察 | 第40-41页 |
| 3.3.7 间接ELISA检测VLPs的反应原性 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53页 |
