摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 犬瘟热病毒概述 | 第13-14页 |
1.2 CDV结构蛋白 | 第14页 |
1.3 CDV受体 | 第14-16页 |
1.3.1 SLAM | 第14-15页 |
1.3.2 nectin-4 | 第15页 |
1.3.3 其它受体 | 第15-16页 |
1.3.4 未知神经受体 | 第16页 |
1.4 CDV的跨宿主感染 | 第16-18页 |
1.4.1 SLAM和nectin-4受体在CDV致病性及跨宿主感染中的作用 | 第16-18页 |
1.4.2 其他因素 | 第18页 |
1.5 研究目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 SLAM受体V区74、129位氨基酸替换对犬瘟热病毒致细胞融合的影响 | 第19-32页 |
2.1 材料与方法 | 第20-24页 |
2.1.1 质粒、细胞株 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂及设备 | 第20页 |
2.1.3 SLAM-V区蛋白三维结构的同源建模 | 第20-21页 |
2.1.4 SLAM突变体的构建及鉴定 | 第21-22页 |
2.1.5 BHK-21细胞转染 | 第22-23页 |
2.1.6 间接免疫荧光检测SLAM的表达 | 第23页 |
2.1.7 流式细胞术检测SLAM表达量 | 第23页 |
2.1.8 细胞融合实验 | 第23-24页 |
2.1.9 Hoechst33342核染色 | 第24页 |
2.1.10 平均合胞体数的计算及统计学分析 | 第24页 |
2.2 结果 | 第24-30页 |
2.2.1 SLAM蛋白三维结构 | 第24-25页 |
2.2.2 SLAM突变体的构建及鉴定 | 第25页 |
2.2.3 间接免疫荧光方法检测SLAM的表达 | 第25-26页 |
2.2.4 流式细胞术定量SLAM表达量 | 第26-27页 |
2.2.5 细胞融合及其Hoechst33342核染色结果 | 第27-29页 |
2.2.6 平均合胞体数的计算及统计学分析结果 | 第29-30页 |
2.3 讨论 | 第30-31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第三章 稳定表达水貂SLAM受体BHK-21细胞系的建立及初步应用 | 第32-40页 |
3.1 材料与方法 | 第32-36页 |
3.1.1 病料、毒株 | 第32页 |
3.1.2 细胞、质粒 | 第32-33页 |
3.1.3 主要试剂及设备 | 第33页 |
3.1.4 G418最适浓度的确定 | 第33页 |
3.1.5 稳定表达mSLAM的BHK-21单克隆细胞系的建立 | 第33-34页 |
3.1.6 mSLAM基因转录及蛋白表达检测 | 第34-35页 |
3.1.7 CDV强毒株在BMS细胞中生长情况 | 第35页 |
3.1.8 CDV流行毒株的分离及鉴定 | 第35-36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-39页 |
3.2.1 BMS细胞中mSLAM基因的转录及蛋白表达检测 | 第36-37页 |
3.2.2 CDV强毒株在BMS细胞中生长情况 | 第37页 |
3.2.3 CDV分离株的鉴定 | 第37-39页 |
3.3 讨论 | 第39页 |
3.4 本章小结 | 第39-40页 |
第四章 全文总结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
附录 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简历 | 第48页 |