| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 插图和附表清单 | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 植物耐旱性研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 植物耐旱的生理基础 | 第10页 |
| 1.1.2 植物耐旱的分子机制 | 第10-12页 |
| 1.2 植物耐寒性研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.1 植物耐寒的生理基础 | 第12页 |
| 1.2.2 植物耐寒性的分子机制 | 第12-13页 |
| 1.3 DNA测序技术的发展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 第一代测序技术 | 第13页 |
| 1.3.2 第二代测序技术 | 第13-14页 |
| 1.3.3 第三代测序技术 | 第14-15页 |
| 1.4 转录组研究技术 | 第15-16页 |
| 1.4.1 基因芯片技术 | 第15页 |
| 1.4.2 基因表达系列分析技术 | 第15页 |
| 1.4.3 大规模平行测序技术 | 第15页 |
| 1.4.4 RNA-seq技术 | 第15-16页 |
| 1.5 DREB转录因子与植物耐逆性 | 第16-17页 |
| 1.6 蒙古沙冬青研究进展 | 第17页 |
| 1.7 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 实验材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 蒙古沙冬青 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 缓冲液及主要试剂配制 | 第18页 |
| 2.1.5 实验中用到的引物 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-27页 |
| 2.2.1 蒙古沙冬青幼苗培养与胁迫处理 | 第18-19页 |
| 2.2.2 蒙古沙冬青总RNA提取 | 第19页 |
| 2.2.3 总RNA的纯化 | 第19-20页 |
| 2.2.4 转录组测序法 | 第20-23页 |
| 2.2.5 AmDREB1F基因的克隆与测序 | 第23-24页 |
| 2.2.6 序列分析 | 第24-25页 |
| 2.2.7 半定量RT-PCR分析 | 第25页 |
| 2.2.8 植物表达载体构建 | 第25页 |
| 2.2.9 转化拟南芥 | 第25-27页 |
| 2.2.10 转基因植株的筛选与繁殖 | 第27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-45页 |
| 3.1 蒙古沙冬青转录组测序及其生物信息学分析 | 第27-38页 |
| 3.1.1 总RNA提取及其质量检测 | 第27-28页 |
| 3.1.2 转录组测序和de novo组装结果 | 第28-29页 |
| 3.1.3 Unigene序列的RT-PCR验证结果 | 第29-30页 |
| 3.1.4 Unigene的功能注释和分类 | 第30-34页 |
| 3.1.5 蒙古沙冬青与其他植物的序列相似性 | 第34-35页 |
| 3.1.6 蒙古沙冬青转录谱概况 | 第35-36页 |
| 3.1.7 蒙古沙冬青转录组中转录因子统计 | 第36-38页 |
| 3.2 AmDREB1F基因克隆与表达分析 | 第38-45页 |
| 3.2.1 AmDREB1F基因克隆与内含子分析 | 第38-39页 |
| 3.2.2 蛋白序列分析 | 第39-42页 |
| 3.2.3 植物表达载体构建 | 第42-43页 |
| 3.2.4 表达载体转化农杆菌 | 第43页 |
| 3.2.5 AmDREB1F转基因拟南芥的获得 | 第43-44页 |
| 3.2.6 AmDREB1F在不同胁迫处理下的表达变化 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 4.1 本研究为沙冬青提供了较综合全面的转录组数据信息 | 第45-46页 |
| 4.2 蒙古沙冬青中存在复杂的应答寒旱胁迫的基因转录调控网络 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
