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蒙古沙冬青转录组测序和AmDREB1F基因的克隆

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
插图和附表清单第8-9页
缩略语表第9-10页
1 引言第10-18页
    1.1 植物耐旱性研究进展第10-12页
        1.1.1 植物耐旱的生理基础第10页
        1.1.2 植物耐旱的分子机制第10-12页
    1.2 植物耐寒性研究进展第12-13页
        1.2.1 植物耐寒的生理基础第12页
        1.2.2 植物耐寒性的分子机制第12-13页
    1.3 DNA测序技术的发展第13-15页
        1.3.1 第一代测序技术第13页
        1.3.2 第二代测序技术第13-14页
        1.3.3 第三代测序技术第14-15页
    1.4 转录组研究技术第15-16页
        1.4.1 基因芯片技术第15页
        1.4.2 基因表达系列分析技术第15页
        1.4.3 大规模平行测序技术第15页
        1.4.4 RNA-seq技术第15-16页
    1.5 DREB转录因子与植物耐逆性第16-17页
    1.6 蒙古沙冬青研究进展第17页
    1.7 本研究的目的与意义第17-18页
2 实验材料与方法第18-27页
    2.1 实验材料第18页
        2.1.1 蒙古沙冬青第18页
        2.1.2 菌株和载体第18页
        2.1.3 试剂第18页
        2.1.4 缓冲液及主要试剂配制第18页
        2.1.5 实验中用到的引物第18页
    2.2 实验方法第18-27页
        2.2.1 蒙古沙冬青幼苗培养与胁迫处理第18-19页
        2.2.2 蒙古沙冬青总RNA提取第19页
        2.2.3 总RNA的纯化第19-20页
        2.2.4 转录组测序法第20-23页
        2.2.5 AmDREB1F基因的克隆与测序第23-24页
        2.2.6 序列分析第24-25页
        2.2.7 半定量RT-PCR分析第25页
        2.2.8 植物表达载体构建第25页
        2.2.9 转化拟南芥第25-27页
        2.2.10 转基因植株的筛选与繁殖第27页
3 结果与分析第27-45页
    3.1 蒙古沙冬青转录组测序及其生物信息学分析第27-38页
        3.1.1 总RNA提取及其质量检测第27-28页
        3.1.2 转录组测序和de novo组装结果第28-29页
        3.1.3 Unigene序列的RT-PCR验证结果第29-30页
        3.1.4 Unigene的功能注释和分类第30-34页
        3.1.5 蒙古沙冬青与其他植物的序列相似性第34-35页
        3.1.6 蒙古沙冬青转录谱概况第35-36页
        3.1.7 蒙古沙冬青转录组中转录因子统计第36-38页
    3.2 AmDREB1F基因克隆与表达分析第38-45页
        3.2.1 AmDREB1F基因克隆与内含子分析第38-39页
        3.2.2 蛋白序列分析第39-42页
        3.2.3 植物表达载体构建第42-43页
        3.2.4 表达载体转化农杆菌第43页
        3.2.5 AmDREB1F转基因拟南芥的获得第43-44页
        3.2.6 AmDREB1F在不同胁迫处理下的表达变化第44-45页
4 讨论第45-47页
    4.1 本研究为沙冬青提供了较综合全面的转录组数据信息第45-46页
    4.2 蒙古沙冬青中存在复杂的应答寒旱胁迫的基因转录调控网络第46-47页
5 结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-58页
作者简介第58页

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